张全福
- 作品数:20 被引量:73H指数:5
- 供职机构:中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金:World Health Organization国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
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- 汉坦病毒A9株L片段部分核苷酸序列分析
- 2000年
- 目的 测定我国分离的汉坦病毒A9株L片段的部分核苷酸序列。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术扩增我国分离的汉坦病毒A9株部分L片段cDNA ,测定PCR产物的核苷酸序列。结果 PCR扩增产物为L片段 40 0 6nt 44 5 41nt(根据 76 118株序列 ) ,和已发表的汉坦病毒L片段序列比较 ,A9株和汉滩病毒 76 118株同源性最高 ,为 85 .2 % ,和其他不同型别汉坦病毒代表株HR80 39、CG182 0、Sotkoma、NHR11、TulaL片段的同源性分别为 76 .8%、72 .3%、71.0 % ,71.7%和 70 .8%。比较推测的氨基酸序列 ,和 76 118株同源性为 96 .7% ,和HR80 39、CG182 0、Sotkoma、NHR11、TulaL片段的同源性分别为 88.3%、78.6 %、74.7% 74.0 %和 76 .0 %。遗传进化分析显示A9株L片段的进化和同为亚洲黑线姬鼠分离的 76 118株较密切 ,和从欧洲、美洲其他动物分离病毒相差较远 ,提示汉坦病毒的进化和宿主动物密切相关。结论 汉坦病毒A9株和其他不同型别汉坦病毒L片段核苷酸序列的同源性在 85 %~ 70 .8%之间 ,和汉坦病毒原型株 76 118株的同源性最高。
- 李德新梁米芳王晓芳李川张全福霍子威抗长寿宋干
- 关键词:汉坦病毒基因碱基序列
- 流行性出血热(EHF)地鼠肾细胞(GHKC)灭活疫苗的初步人体观察被引量:20
- 1991年
- 用流行性出血热(EHF)病毒L99株(家鼠型)感染金黄地鼠肾细胞(GHKC),经福尔马林(0.025%)灭活制备EHF灭活疫苗(88-17批),经检定批准,肌肉(1ml)接种志愿者12人(IO人于0、7、28天,2人分别于0、7天及0、28天各一针),进行了安全性及抗体反应的初步人体观察。结果显示,此种疫苗对人体接种无明显不良反应。接种后,12名接种者IFA、ELI-SA及中和抗体(EFRNT)全部阳转,180天和360天后仍分别有10人血清中和抗体阳性。初步表明,此疫苗是安全的,可以有效诱导抗体产生,其中和抗体多数可持续一年以上。
- 宋干黄永成杭长寿郝富勇李德新郑晓丽刘为民惠连梁米芳回良杰霍子威李淑兰张全福王晓宏傅增武王伟
- 关键词:流行性出血热地鼠肾细胞灭活疫苗
- 肾综合征出血热地鼠肾细胞灭活疫苗人群免疫的血清学效果观察被引量:2
- 1996年
- 为进一步了解肾综合征出血热家鼠型(Ⅱ型)地鼠肾细胞灭活疫苗人群免疫效果,我们于1993年1月至1994年3月应用长春生物制晶研究所生产的3批中试疫苗对136名志愿者进行人群免疫的血清学效果观察。结果,3批疫苗(92-1,92-2,92-3),2种免疫程序(0,28,42d 和0,28d)的4组接种者,首针免疫后56d,用微量细胞病变中和试验检测中和抗体,阳转率均达96%以上,抗体的几何平均滴度(GMT)为43.7。未发现严重的不良接种反应,表明疫苗的安全性较好。同批疫苗(92-1批)用2种免疫程序接种者,首针免疫后180d、360d 抗体阳性率与 GMT 均明显下降,首针免疫后1年再加强免疫1次,回忆反应都很良好,抗体阳性率迅速回升至96%以上,GMT 升为32.4,表明该批疫苗、2种免疫程序接种者有相似的良好血清学效果。
- 任珂芦全香宋干黄永成孙人和王升杭长寿回良杰刘海林苑富莲霍子威郭瑞琦赵习芳丰有录张全福张莉媛石振坤李延军潘天受王忠平孙秀芳
- 关键词:灭活疫苗流行性出血热
- 汉滩病毒PS-6株的分离及其生物学性状研究被引量:4
- 2000年
- 目的 从病人血清分离汉坦病毒Ⅰ型毒株 ,为双价疫苗的配伍提供更好的候选株。方法 从陕西HFRS患者血清 ,按常规法分离汉坦病毒。用系列单克隆抗体、空斑减少中和试验、RT PCR及部分核苷酸序列分析等检定 ,确证所分离毒株的血清 (或基因 )型别。结果 从 17份HFRS患者血清中成功地分离到 1株汉坦病毒 ,定名为PS 6株。经上述方法全面鉴定确定其为汉滩病毒 (即Ⅰ型病毒 )。该毒株有较强的繁殖力 (毒力 )及较好的抗原性 ,其免疫血清对来源于不同地区的Ⅰ型病毒有较好的中和活性。结论 PS 6毒株有可能成为Ⅰ型病毒疫苗候选株 ,为双价或多价疫苗配伍。
- 姚树元杭长寿邱建明霍子威石晓宏张全福李川宋干
- 关键词:汉滩病毒生物学性状RT-PCR
- 流行性出血热细胞培养灭活疫苗灭活方法的比较被引量:1
- 1992年
- 比较了β-丙内酯(BPL)、福尔马林、γ-射线照射和加热等四种灭活方法对EHF病毒的灭活作用,灭活对病毒核壳蛋白(NP)和糖蛋白(G2)抗原的影响,以及用不同方法灭活制备的疫苗免疫动物后各种血清抗体反应。发现福尔马林可破坏病毒的G2糖蛋白,而BPL对它的破坏较小。加熱灭活后EHF病毒NP抗原滴度比灭活前有4~16倍增高,而同时使G2抗原滴度有2~4倍的降低,而γ-射线对病毒NP和G2抗原均无明显影响。同一批病毒培养物用四种方法灭活后免疫动物,血清抗体检查结果显示,γ-射线照射灭活疫苗免疫的动物其抗体滴度较高,0.3%BPL和福尔马林灭活者其血清抗体反应偏低。加热灭活疫苗IFA及抗G2抗体反应较高,但其中和抗体和HI抗体反应明显较低。用0.025%的福尔马林灭活的病毒免疫动物后产生的中和抗体滴度与0.05%及0.1%的BPL灭活者无明显差别,而以0.39%BPL灭活病毒免疫者其抗体反应偏低。血凝抑制抗体则BPL灭活疫苗免疫者较高。上述结果表明,福尔马林灭活疫苗免疫动物可产生与BPL灭活疫苗免疫者同样水平的中和抗体反应,适用于EHF灭活疫苗的生产。在四种灭活方法中,γ-射线灭活疫苗在对两种抗原的保存及免疫动物的抗体反应均较优,值得进一步研究。
- 刘为民宋干张全福李德新杭长寿
- 关键词:流行性出血热灭活疫苗
- 流行性出血热传代细胞多价纯化疫苗
- 流行性出血热传代细胞多价纯化疫苗是属生物技术领域“九五”国家医学技术攻关专题研究内容,包括我国流行性出血热病毒流行株在Vero传代细胞中的传代适应,毒株的选育,Vero细胞库的建立,病毒在Vero细胞中的培养、收获,超滤...
- 杭长寿李德新孙世华解燕乡霍子威张全福梁米芳
- 文献传递
- 流行性出血热病毒结构蛋白的研究被引量:14
- 1990年
- 用超速离心方法从感染流行性出血热(EHF)病毒的细胞培养液中浓缩和纯化了A9、Chen、76-118、R22、L99 5株病毒,对5株病毒进行的SDS-PAGE均显示了此病毒的G1、G2和NP 3个结构蛋白。3株野鼠型病毒A9、Chen、76—118株的结构蛋白分子量相同,两株家鼠型病毒R22、L99株的结构蛋白分子量相同,但两个不同血清型病毒间有所不同。用放射免疫沉淀(RIP)分析了16株EHF病毒的G2,发现存在着分子量为55kD、57kD两种不同的G2.RIP和蛋白印迹实验(Western-blot)均发现在EHF病毒中至少存在分子量分别为48kD、50kD和52kD的3种NP。根据G2、NP的分子量,可将从我国不同地区不同宿主分离的15株EHF病毒分为两型 5个亚型。
- 李德新宋干杭长寿梁米芳张全福
- 关键词:流行性出血热病毒结构蛋白
- 汉坦病毒弱毒株的选育被引量:5
- 1996年
- 为了研制肾综合征出血热减毒活疫苗,研究病毒毒力,改进了汉坦病毒感染环磷酰胺处理地鼠动物模型,即检测地鼠感染病毒后出现的类似于人发病过程的四期经过。利用该动物模型从汉坦病毒(Ⅰ型)A9毒株中,采用空斑选育法筛选,获得1株对乳小鼠丧失脑内致死力及对环磷酰胺处理地鼠丧失致病力的弱毒株。弱毒株感染乳小鼠及环磷酰胺处理地鼠后,在肝、脾、肾、肺及脑中呈"一过性"繁殖,用免疫荧光法检测不到明显的病毒抗原,但采用逆转录-聚合酶链反应可检测到特异性病毒核酸。
- 邱建明宋干杭长寿张全福霍子威陈健樱姚树元
- 关键词:汉坦病毒弱毒株选育疾病模型聚合酶链反应
- 汉滩病毒毒力标志的建立被引量:3
- 1995年
- 比较了汉滩病毒A9株强毒克隆病毒与弱毒克隆病毒在体外培养、诱导中和抗体能力,以及单克隆抗体(单抗)反应谱等方面的差异。发现最为明显的区别在于弱毒克隆病毒对小鼠腹腔巨噬细胞及人外周血单核细胞敏感性降低,在Vero-E6细胞上繁殖缓慢,空斑形成需较长时间,且斑小。但强、弱毒克隆病毒的致细胞融合活性,刺激CTLs应答活性,以及时Vero-E6细胞的吸附速率与穿透力均无明显差别。经温度敏感(ts)试验及缺损干扰(DI)颗粒检测,表明弱毒克隆病毒为非ts株,不含DI颗粒。而弱毒克隆病毒免疫6~8周龄BALB/c小鼠,同样能诱导较高滴度的中和抗体。强、弱毒克隆病毒的单抗反应谱表明,除了对4株抗糖蛋白单抗的反应性有显著差异外,两克隆病毒对18株抗核蛋白单抗及18株抗糖蛋白单抗的反应性无显著差异。
- 邱建明宋干杭长寿张全福霍子威桃树元
- 关键词:汉滩病毒
- 流行性出血热地鼠肾细胞双价灭活疫苗的人体观察被引量:10
- 1993年
- 为了研制一种对两型流行性出血热(EHF)均有良好预防效果的灭活疫苗,采用地鼠肾细胞(GHKC)传代适应滴度高(≥8.5logTCID50/ml)的两型EHF病毒株(家鼠型L99株及野鼠型JR株)试制出GHKC双价灭活疫苗(90-1批液体苗和90-2批冻干苗),经卫生部批准,进行了约200人的人体免疫观察。疫苗用福尔马林灭话,加AI(OH)_3佐剂。共免疫242人,其中206人免疫前血清抗体反应阴性。全部接种者除极少数有轻、中度反应,余均无不良反应。两批疫苗接种后,IFA抗体阳转率分别为95.9%及89.2%,ELISA抗体分别为93.5%及91.8%。抽样检查中和抗体反应(每批疫苗30人),用酶斑减少中和试验(EFRNT)检查,两批疫苗对L99株病毒中和抗体阳转率均为100%;对JR株抗体阳转率分别为88.2%及66.7%。每个接种者免前及第一针疫苗接种后56,180,360天血清同时用ELISA法检查抗体,并抽样(每批疫苗30例)检查中和抗体,发现两种抗体的阳性率有逐渐降低的动态变化。两批疫苗三种免疫程序(0,7,28天,0,28,42天及0,28天)接种者的免疫反应基本相似,仅0,28天接种者的抗体水平稍低。对68例接种者于免疫后1年用同一疫苗(90-2批)加强免疫一次,其ELISA及中和抗体均显著升高。试用淋巴细胞转化试验检查20人按种后细胞免疫反应。
- 宋干黄永成杭长寿李淑兰刘为民傅增武李德新郝富勇霍子威惠连张全福回良杰詹发先王伟石晓宏郑晓丽林静王晓宏王琪
- 关键词:流行性出血热地鼠肾细胞疫苗