岳昌武 作品数:60 被引量:140 H指数:6 供职机构: 遵义市第一人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省卫生厅科学技术基金 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 文化科学 更多>>
定量PCR快速检测动物食品中沙门菌污染 被引量:3 2009年 沙门氏菌是动物性食品中的重要食源性致病菌,建立其快速检测方法对动物性食品的质量控制具有重要作用。根据沙门氏菌16srDNA、dT fermentation等基因或DNA功能区序列设计PCR引物,通过比较3种不同的基因组DNA提取方法,提取待检样品总DNA,进行多基因定量PCR检测。结果表明,该方法简单快速且灵敏度高,在动物食品中的检测灵敏度可达10cfu/g,整个检测时间在10h以内。说明该方法对检测动物中沙门氏菌具有特异性高且灵敏、快速等特点,适用于快速、准确地检测动物中沙门氏菌的需要。 岳昌武 吕玉红 刘坤祥 陈泽慧 白国辉关键词:动物食品 沙门菌 定量PCR DNA提取 一种固态发酵用培养瓶 本实用新型涉及一种固态发酵用培养瓶,包括瓶本体,瓶口位于瓶本体的顶部,瓶底位于瓶本体的底部,瓶口的直径小于瓶底的直径,瓶口的直径和瓶本体的高度的比例为(4‑6):(10‑15),瓶底的直径和瓶本体的高度的比例为12:(1... 吴杰 岳昌武 曲璟秋 邓成敏 李晓倩 徐彬文献传递 甘薯S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因克隆与表达 被引量:11 2007年 从实验室建立的甘薯冷胁迫抑制消减文库中分离出一cDNA片段,经NCBI比对后发现该片段与其它植物的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因具有90%的同源性,根据相关物种S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因cDNA序列设计引物,以甘薯总RNA为模板,经RT-PCR扩增首次获得全长1182bp的甘薯SAMS完全编码区,NCBI比对分析结果表明:该片段与不同种属植物sams基因的编码区序列的核苷酸相似性达85.48%,所推导的氨基酸序列相似性达93.6%。根据核苷酸序列和氨基酸序列分别构建了SAMS系统进化树,从分子水平阐明了植物种属间的亲缘进化关系,为其种质资源利用提供理论依据。利用该序列与原核表达载体pET32a连接构建融合表达载体pET-SAMS,酶切鉴定后转入大肠杆菌BL21,在不同温度下诱导3h后均表达出一63KDa大小融合蛋白。 岳昌武 何博文 何明雄 张义正关键词:S-腺苷甲硫氨酸合成酶 冷胁迫 RT-PCR 原核表达 粪便基因组DNA提取方法比较及在沙门菌定量PCR检测中的应用 被引量:3 2009年 目的建立并优化1种可用于临床微生物检测的粪便微生物基因组DNA提取方法并应用于沙门菌定量PCR快速检测。方法分别利用土壤微生物基因组DNA提取试剂盒法、微生物基因组DNA提取试剂盒法和本实验室改进酚/氯仿抽提法提取腹泻患者粪便基因组DNA,根据沙门氏菌16srDNA、dT等基因或DNA功能区序列设计PCR引物,进行多基因定量PCR检测。结果3种方法提取的基因组DNA均可进行有效的定量PCR扩增,采用所建立的多重PCR方法可特异鉴别粪便沙门氏菌。结论本研究改进的粪便基因组DNA提取方法及临床微生物的定量PCR检测可在较短的时间内实现对大量临床样品快速诊断,有一定应用前景。 岳昌武 吕玉红 刘坤祥 陈公安关键词:基因组DNA提取 粪便 定量PCR 沙门菌 马杜拉放线菌(Actinomadura sp.)FXJ1.344发酵产物的分离鉴定与活性分析 被引量:2 2018年 分离鉴定来源于江西酸性红壤中的马杜拉放线菌(Actinomadura)FXJ1.344所产生的次级代谢产物,并对其中生物活性物质进行分析。采用无水乙醇提取放线菌FXJ1.344发酵菌丝体,粗提物依次用硅胶柱层析法和凝胶柱层析法分离纯化,高效液相色谱法进行制备,并采用超高效液相色谱串联质谱法和核磁共振分析鉴定化合物结构。最终得到2个纯化物,分别为6-hydroxytetrangulol和tetrangulol。用滤纸片扩散法和对倍稀释法检测其抑菌活性,结果表明这2个纯化物均有较好的抗藤黄微球菌(Micrococcus luteus)活性,其最小抑菌浓度分别为3.90μg/m L和15.6μg/m L。 余成 刘宁 张志敏 黄英 岳昌武关键词:发酵培养 次级代谢产物 抑菌活性 卤化II型聚酮类抗生素化合物、制备方法及其应用 本发明公开了一种卤化II型聚酮类抗生素化合物,其特征在于,结构为:<Image file="DDA0001009604680000011.GIF" he="312" imgContent="drawing" imgFor... 岳昌武 邵美云 钱声艳 吕玉红 保玉心 王苗文献传递 链霉菌次级代谢产物生物合成基因簇异源表达研究进展 被引量:4 2018年 天然活性物质的合成、调控和抗性基因都是成簇的排列在微生物基因组内,通过基因工程等技术,将目的基因转移至不同的宿主菌内异源表达,不仅能够激活沉默基因簇,且可将异源表达体系作为一个非常有用的工具,通过生物合成或组合生物合成的方法生产出更多结构新颖且功能独特的实用天然产物或其衍生物。 王苗 王倩 岳昌武关键词:链霉菌 次级代谢产物 异源表达 生物合成 连接方法对重组效率影响的比较研究 2008年 [目的]为探索一种适于连接PCR产物和不同粘端的新方法。[方法]分别采用冻融法、割胶法、试剂盒法和牙签法连接PCR产物与质粒DNA以及酶切产物与质粒DNA,比较不同连接方法对重组效率的影响。[结果]采用冻融法和割胶法连接PCR产物与pMD18-T,其连接效率分别为94.00%和93.00%,略高于试剂盒法和牙签法。采用冻融法和割胶法连接酶切产物的重组效率分别为86.67%和88.00%,略高于试剂盒法和牙签法。牙签法简化了连接前DNA相关操作,具有较高的连接效率,完全能够满足普通连接反应,特别是粘端连接反应要求。[结论]割胶法具有很高的重组效率和转化效率,可以满足普通连接反应、文库构建对连接效率和转化效率的要求,具有一定的应用前景。 莫宁萍 岳昌武 刘坤祥 凌锌关键词:分子克隆 微生物转化氧化槐定碱活性菌株的筛选 被引量:1 2015年 目的通过微生物转化方法对氧化槐定碱进行结构修饰和改造,以期得到结构新颖或活性更强的衍生物,从中筛选出对氧化槐定碱有催化活性的微生物菌株。方法采用稀释法分离土壤微生物菌株,表面消毒法分离植物内生菌,通过薄层色谱法(TLC)对转化反应进行筛选;通过表型和基因型鉴定活性菌株。结果从遵义医学院土壤分离得到土壤微生物菌株26株,从植物分离得到内生真菌60株;17株土壤微生物具有催化活性,其中菌株T003表现出强的选择性,经显微结构和16S r DNA序列分析,鉴定其为Escherichia coli。结论微生物转化法为氧化槐定碱的结构修饰和改造提供了一个很好的选择方法。 付少彬 文福来 闫松 张芸 李义 岳昌武关键词:生物转化 生物碱 土壤微生物 低温胁迫对甘薯s-腺苷甲硫氨酸合成酶mRNA表达水平的影响 被引量:14 2008年 [目的]为研究s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因在冷胁迫条件下的表达情况。[方法]分别提取4℃胁迫处理0、12、24、48和72 h后的甘薯叶、茎和块根组织总RNA,通过反转录和实时定量PCR技术分析了该基因的mRNA表达情况。[结果]叶、茎和块根组织中该基因表达量都明显升高,分别于胁迫后24、72和72 h达到表达高峰,其中块根组织表达量增加量最大。[结论]低温胁迫能够促进相关基因的mRNA表达水平升高。 肖静 凌锌 岳昌武 曾霓关键词:低温胁迫 甘薯 S-腺苷甲硫氨酸合成酶 实时定量PCR