宋子仪 作品数:14 被引量:50 H指数:4 供职机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
猪SFRP4基因的表达规律及抑制剂SP600125对前体脂肪细胞分化的影响 被引量:1 2012年 分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled-related protein 4,SFRP4)是Wnt信号通路可溶解的调控子.通过高通量测序(Solexa)技术、实时定量PCR(RT-qPCR)技术对瘦肉型和脂肪型猪不同生长阶段脂肪组织、脂肪细胞中SFRP4表达规律进行研究;用JNK信号通路特异性抑制剂SP600125处理猪原代前体脂肪细胞,研究抑制JNK信号通路对猪前体脂肪分化以及SFRP4 mRNA和蛋白表达的影响.结果显示,SFRP4在脂肪型猪脂肪组织表达量显著高于瘦肉型猪(P<0.01);不同组织检测结果发现,SFRP4广泛表达于各个组织,并高表达于脂肪组织;前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化过程中SFRP4表达量逐渐升高;SP600125促进前体脂肪细胞分化,引起PPARγ、FABP4、ATGL、Perilipin的显著升高(P<0.01),而SFRP4表达被显著抑制.本研究为调控脂肪细胞分化关键基因的筛选提供新的理论参考. 关华 郑加盟 陈宗正 宋子仪 杨浩 杨公社关键词:高通量测序 前体脂肪细胞 分化 猪TCTP基因的表达规律及其对脂肪细胞分化的影响 被引量:3 2011年 翻译控制肿瘤蛋白(TCTP,translationally controlled tumor protein)是一类广泛存在各种生物、序列高度保守的蛋白,最初认为TCTP是一类生长相关蛋白,近年研究发现TCTP可能具有非常重要的生物学功能.本研究通过高通量测序(Solexa)技术、实时定量PCR(RT-qPCR)对瘦肉型和脂肪型猪不同生长阶段脂肪组织、脂肪细胞中TCTP的表达规律进行了研究,采用siRNA技术,沉默TCTP,研究了其对脂肪细胞分化的影响.结果表明:TCTP在瘦肉型猪脂肪组织中的mRNA表达量显著高于脂肪型猪(P<0.01);在不同日龄猪脂肪组织中,TCTP的mRNA表达量随着日龄增长而降低;在不同组织中的检测结果发现,TCTP在心、肝、肾、肌肉和脂肪中有较高的表达,肺和脾中表达量较低;TCTP的mRNA表达量在猪前体脂肪细胞增殖过程中逐渐增高,在分化阶段逐渐下降;沉默TCTP促进了脂肪细胞的分化,引起了PPARγ、C/EBPα、SREBP-1c的显著升高(P<0.01).以上研究发现,TCTP在脂肪沉积过程中可能具有抑制作用,为进一步研究肥胖关键基因调控机制提供科学依据. 李新建 杨浩 程佳 宋子仪 杨公社关键词:高通量测序 实时定量PCR SIRNA干扰 分化 Cyclin C在小鼠棕色脂肪形成中的作用及其机制研究 肥胖是当前人类社会所面临的一个十分严峻的健康问题。大量的研究表明,肥胖可诱发二型糖尿病、高血压、非酒精性脂肪肝等代谢性疾病,因此成为人们关注的焦点以及研究的热点。近年来的研究发现,棕色脂肪是一个新的治疗肥胖的靶点。与以甘... 宋子仪关键词:棕色脂肪 PPARΓ C/EBPΑ 文献传递 干扰C1q肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)抑制3T3-L1前体脂肪细胞的分化 毋文静 宋子仪 熊燕 李岳峰 卫宁 王禹 庞卫军 杨公社关键词:脂肪因子 SIRNA LiCl诱导大鼠脂肪基质细胞成骨分化研究 2011年 【目的】探讨体外培养条件下,LiCl诱导大鼠脂肪基质细胞向成骨细胞分化的潜能。【方法】采用Ⅰ型胶原酶消化组织块法分离获得大鼠脂肪基质细胞,将其分为处理组和对照组,分别用25 mmol/L LiCl和25mmol/L NaCl处理3周,采用形态学、SQ RT-PCR、免疫荧光染色、碱性磷酸酶染色及茜素红染色等方法,检测大鼠脂肪基质细胞向成骨细胞分化的能力。【结果】大鼠脂肪基质细胞在LiCl诱导24 h后,细胞形态由成纤维样变成方块状;诱导3周后,SQ RT-PCR检测发现,细胞表达碱性磷酸酶(AP)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)和骨γ羧基谷氨酸(Bglap)等成骨细胞特异性基因,与处理0 d相比,差异达极显著水平(P<0.01),碱性磷酸酶和茜素红染色均呈阳性,其中茜素红染色阳性率可达60%以上;免疫荧光染色检测结果显示,LiCl处理3周后细胞表达成骨细胞特异性蛋白OSX和OPN,阳性率均达70%左右。对照组碱性磷酸酶和茜素红染色均呈阴性,不表达成骨细胞相关基因及蛋白。【结论】大鼠脂肪基质细胞在25 mmol/L LiCl处理下,可分化为成骨样细胞,且表达成骨细胞标志基因及相关蛋白。 高倩 赵丽丽 宋子仪 王少璞 张雅卿 杨公社关键词:脂肪基质细胞 氯化锂 一种高效细胞永生化载体的构建及其功能分析 宋子仪 杨浩 高倩 李岳峰 史新娥 庞卫军 杨公社关键词:细胞永生化 HTERT 慢病毒 猪前体脂肪细胞 阻断PI3K/AKT通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化 被引量:17 2014年 【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,希望为深入研究FoxO1调控骨骼肌生长发育的作用机理奠定基础。【方法】以1—3日龄健康大白猪为材料,采用单根肌纤维法分离培养猪骨骼肌卫星细胞,接种第2天、第4天和第6天在倒置显微镜下观察细胞形态并拍照。在细胞分化第8天,用免疫荧光染色方法染肌管,DAPI染核,并在荧光倒置显微镜下观察拍照。待细胞汇合至70%—80%时,将培养基换成含50 nmol·L-1渥曼青霉素(wortmannin,WM)的分化培养基,分别于细胞分化第0天、第4天和第8天收集细胞,提取总RNA和总蛋白,采用real-time qPCR和Western blotting方法检测WM对FoxO1以及骨骼肌卫星细胞分化标志基因表达的影响。【结果】猪骨骼肌卫星细胞在接种第2天开始贴壁,呈梭形。第4天细胞数量增加,部分发生融合。第6天时细胞呈方向性生长。第8天细胞进一步融合形成肌管。WM处理组的FoxO1 mRNA表达水平未发生显著变化(P>0.05),非磷酸化的FoxO1蛋白表达显著高于对照组(P<0.05),而p-FoxO1蛋白表达较对照组显著下降(P<0.05)。WM处理组的细胞在分化第8天,虽然也出现了蜂窝状生长,但是与对照组相比细胞未呈方向性生长并形成肌管。Western blotting结果显示,WM明显抑制猪骨骼肌卫星细胞分化早期标志基因MyoD、中后期标志基因MyoG和末期标志基因MyHC蛋白的表达。【结论】以WM阻断PI3K信号通路能使FoxO1去磷酸化,抑制猪骨骼肌卫星细胞的分化,延迟肌管的形成,并降低成肌分化标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达。总之,阻断PI3K信号通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化。 史新娥 吴国芳 宋子仪 路宏朝 贾龙 朱嘉宇 杨公社关键词:PI3K AKT通路 FOXO1 骨骼肌卫星细胞 成肌分化 FOXO1 猪GRN基因shRNA慢病毒干扰载体的构建及其有效性检测 本实验中成功构建了猪GRN慢病毒干扰载体,获得的病毒能成功高效感染猪前体脂肪细胞,并且能稳定沉默GRN基因的表达。本研究成功构建了猪GRN基因干扰载体,获得了高侵染能力的病毒液,为进一步研究GRN基因在猪脂肪沉积过程中的... 杨浩 李新建 程佳 宋子仪 关华 杨公社关键词:RNA干扰 猪前体脂肪细胞 一种猪成熟脂肪细胞快速去分化为前体脂肪细胞的培养方法 本发明公开了一种猪成熟脂肪细胞快速去分化为前体脂肪细胞的培养方法,包括以下步骤:a.猪成熟脂肪细胞的分离;b.天花板培养法去分化猪成熟脂肪细胞;c.去分化脂肪细胞的传代培养。本发明提供的方法能够廉价、快速而高效的获得大量... 杨公社 宋子仪 张国华 赵丽丽 杨浩 高倩 李新建 郑雪莉文献传递 不同营养成分对公猪精液品质的影响 被引量:7 2013年 公猪优良精液的产生与必要的营养供给是密不可分的。为探讨鸡蛋、豆粕、胡萝卜三种营养物质对公猪精液品质的影响,本试验通过评价精液采集量、精子密度、活力及畸形率等指标,来判定其对猪精液的影响。试验表明,公猪日粮中饲喂豆粕和鸡蛋对公猪精液的采集量,活力均有显著的提高;饲喂胡萝卜对公猪精液的采集量,活力无明显差异。为公猪饲养过程中提供一些实际的生产指导。 朱轶铂 渊锡藩 宋子仪 仇杨 史新娥 李步社 杨公社关键词:豆粕 鸡蛋 胡萝卜 公猪 精液品质