吴文娟
- 作品数:7 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- Ⅰ型单纯疱疹病毒ICP22通过与P-TEFb相互作用调控病毒基因转录
- ICP22是Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)中的一种多功能调控蛋白。它可以普遍抑制病毒和细胞启动子的转录实现对基因的调控作用。前期研究发现,ICP22能够抑制HSV-1的α基因的转录,并且病毒皮层蛋白VP16能够解除该抑制...
- 郭磊吴文娟刘龙丁王丽春张莹吴练秋管莹李琦涵
- 关键词:转录调控ICP22VP16P-TEFB
- HSV-1刺激相关蛋白HSRG1的功能研究
- 病毒与细胞之间的相互作用是一个广泛而复杂的过程。HSV-1是一种具有复杂调控机制的双链 DNA 病毒。HSRG1作为从 HSV-1刺激后1小时的 KMB-17细胞中克隆到的一个差异表达的新基因,其编码蛋白的生物学功能知之...
- 吴文娟李卫中洪敏张莹郭磊刘龙丁李琦涵
- 文献传递
- HSV-1间层蛋白VP22转录调控功能的分析被引量:2
- 2008年
- HSV-1间层蛋白是一类重要的功能蛋白,在病毒复制的多个环节中具有重要意义.为了解主要间层蛋白VP22在病毒复制过程中的生物学特性,本实验利用氯霉素乙酰转移酶系统,分析了VP22对病毒启动子的转录调控功能,结果表明VP22对HSV-1α4,TK和gC基因启动子明显具有剂量效应关系的转录抑制作用;VP22也能抑制病毒不同转录调控因子(VP16和ICP0)对启动子的转录激活作用,尤其明显抑制ICP0对TK和gC基因启动子的转录激活作用;VP22能明显抑制组蛋白乙酰转移酶PCAF对ICP0转录激活的促进作用,此抑制作用较VP22抑制ICP0的转录激活作用更为显著.VP22对其他病毒启动子的转录抑制效应,在内对照实验β-gal活性分析中也得到了证明.
- 余娴李卫中刘龙丁车艳春寸伟吴文娟何春艳邵聪文李琦涵
- 关键词:HSV-1
- HSVI病毒蛋白UL25与宿主蛋白的相互作用分析
- Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)是一种具有较强传染性的双链 DNA 病毒。病毒在感染细胞的整个过程中能以不同的方式与宿主细胞的多种组份发生相互作用。迄今为止的研究表明病毒核衣壳辅助蛋白 UL25在病毒整个感染宿主过程中与病...
- 郭磊张莹王蕾吴文娟李卫中刘龙丁李琦涵
- 文献传递
- 利用反向遗传学技术研究脊髓灰质炎病毒/柯萨奇病毒嵌合基因组的生物学特性
- 2007年
- 为探讨B_3型柯萨奇病毒(CVB_3)P_2基因区能否在功能上取代Ⅰ型脊髓灰质炎病毒(PV_1)的P_2基因区,构建包含PV_1/CVB_3嵌合体cDNA的真核表达质粒,其中PV_1的P_2基因区被来自于CVB_3的P_2基因区所代替.质粒转染真核细胞KMB-17后,导致了细胞病变效应,电镜观察到转染细胞的超微结构发生了改变并形成了病毒样颗粒(VLP).免疫电镜进一步证实了这些颗粒的存在.RT-PCR及中和实验结果表明质粒携带的外源基因发生转录并合成了病毒蛋白.蔗糖密度梯度离心和液闪仪计数实验显示转染细胞内标记蛋白的动态变化过程与脊髓灰质炎病毒疫苗株在正常细胞内的复制和装配过程类似.上述工作为进一步深入研究肠道病毒非结构蛋白在重组病毒的形成中所发挥的生物学作用奠定了基础.
- 李卫中洪敏吴文娟梁燕张雪梅寸韡马绍辉赵红玲李琦涵
- 关键词:脊髓灰质炎病毒柯萨奇病毒嵌合基因病毒样颗粒
- HSV-1病毒感染细胞诱导蛋白HSRG1影响病毒基因转录的延伸被引量:1
- 2010年
- 病毒刺激相关蛋白HSRG1是HSV-1病毒感染细胞时诱导表达的蛋白之一,本研究组曾报道其具有与转录调控蛋白相互作用的特性.为进一步分析HSRG1对病毒基因转录调控的影响,本研究在转染细胞中上调HSRG1分子的表达,发现它能够延缓HSV-1病毒的增殖.CAT分析结果也表明HSRG1对HSV-1多种病毒启动子的转录效率具有量效抑制作用.运用酵母双杂交及免疫沉淀技术表明,HSRG1与对RNA聚合酶Ⅱ(RNAPⅡ)的转录延伸具有重要作用的复合物P-TEFb(positive transcription elongation factor b,P-TEFb)中的调节亚基细胞周期蛋白T2(Cyclin T2)存在蛋白质相互作用,且Cyclin T2氨基端420氨基酸对二者的结合具有重要作用.荧光共定位实验表明,共转染的细胞中两蛋白的细胞内定位因二者相互作用而受影响.进一步利用CAT实验证实,HSRG1能够拮抗Cyclin T2对多种病毒启动子的转录激活作用,提示HSRG1对病毒复制增殖的抑制作用很可能是通过与Cyclin T2的结合而产生的,它具有阻断Cyclin T2的调控,影响病毒基因转录的延伸.
- 吴文娟余娴李卫中郭磊刘龙丁王丽春李琦涵
- 关键词:CYCLIN转录调节
- 利用HSV1α-基因启动子构建真核表达载体phIE被引量:1
- 2006年
- 以pcDNA3质粒为骨架,构建由1型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus I,HSVI)立即早期基因启动子指导外源蛋白转录的phIE真核表达载体,该质粒为外源蛋白的表达提供了更为广泛的选择,通过插入us1编码序列,phIE-Us1被用于分析ICP22蛋白在病毒感染早期的功能;在多克隆位点插入氯霉素乙酰转移酶编码基因构建phIE-CAT检测载体,应用于检测HSVI病毒蛋白Vp16及ICP22的功能,明确显示该质粒对于研究单纯疱疹病毒的基因转录调控具有重要的应用价值。
- 寸韡刘龙丁张莹罗杰吴文娟张雪梅廖芸李琦涵
- 关键词:单纯疱疹病毒立即早期基因启动子