刘冠华
- 作品数：17 被引量：39H指数：4
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- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省博士后创新项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 生长抑素免疫阳性细胞在莱芜黑山羊消化系统的分布规律
- 2008年
- 采用免疫组织化学SABC法,探究莱芜黑山羊消化系统生长抑素(SS)免疫阳性细胞的形态结构和分布规律。消化道中SS免疫阳性细胞形态多样,大多呈椭圆形和锥体形,主要分布于幽门腺区,而贲门腺区、结肠、盲肠和直肠中未见阳性细胞。胰腺中SS免疫阳性细胞数量较多,主要分布于胰岛的外套层,在胰岛的中央和外分泌部的腺泡细胞之间也有少量阳性细胞。结果表明:消化系统SS阳性细胞出现最多的部位是幽门腺区和胰岛的外套层。
- 侯衍猛王树迎尹逊河黄丽波冯华朋刘冠华
- 关键词：免疫组织化学莱芜黑山羊
- 禽波氏杆菌免疫荧光检测和抗体检测ELISA方法的建立与应用被引量：7
- 2008年
- 采用改良的Wooldridge法提取了禽波氏杆菌外膜蛋白(OMP),通过Bradford方法测定禽波氏杆菌OMP含量为320μg/mL,SDS-PAGE电泳检测发现禽波氏杆菌P5株OMP含有5种成分,相对分子质量分别为58、47、41、36、24 ku;P8株OMP含有6种成分,相对分子质量分别为58、47、41、38、211、6 ku。将提取的禽波氏杆菌OMP免疫健康青紫兰兔,每周免疫1次,共免疫4次,获得了兔抗禽波氏杆菌OMP高免血清,以此高免血清建立了检测禽波氏杆菌的间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)方法,并对其工作条件进行了优化和筛选,试验结果表明间接ELISA抗原、抗血清最佳工作浓度分别为10μg/mL、1∶12 800,酶标二抗工作浓度为1∶5 000,最佳包被条件为4℃2、4 h,最佳封闭条件为37℃1、h;间接免疫荧光(IFA)兔高免血清释释度为1∶20,FITC标记羊抗兔IgG稀释度为1∶10,感作时间为45 min时,禽波氏杆菌特异性黄绿色荧光最清晰,非特异性荧光最弱。经临床检测证明该两种方法均具有简便、快速、特异性强的特点,为禽波氏杆菌病的流行病学、血清学调查和临床快速诊断奠定了基础。
- 杨春晓王小娥刘冠华肖海君崔金生朱瑞良
- 关键词：禽波氏杆菌OMP间接ELISA
- 禽波氏杆菌OMP单克隆抗体的制备及其生物学特性研究
- 禽波氏杆菌病是由禽波氏杆菌(Bordetella avium，B.avium)引起的一种高度接触传染性疫病。近年来的研究表明该病在不同地区的鸡群中感染率为10％～50％，患病鸡群多数生长迟缓，饲料报酬低，对家禽养殖业造成...
- 刘冠华
- 关键词：禽波氏杆菌杂交瘤细胞株单克隆抗体生物学特性
- 文献传递
- 伪狂犬病基因缺失疫苗的研究进展被引量：6
- 2009年
- 伪狂犬病是由疱疹病毒科伪狂犬病病毒引起的多种畜、禽及野生动物的一种急性传染病。动物感染后表现为从隐性临床症状到严重的呼吸道和神经症状综合症。该病给世界养猪业造成巨大的损失,目前预防该病主要是以疫苗接种为主。综述了当今广泛应用的伪狂犬病基因缺失疫苗的研究现状和进展。
- 凌宗帅郭文龙刘冠华马荣德阎振贵
- 关键词：伪狂犬病病毒基因缺失疫苗
- 泰山松花粉多糖对ALV-B所致鸡免疫抑制条件下禽波氏杆菌共感染的调理作用
- 禽波氏杆菌与病毒的多重感染，尤其是与免疫抑制性病毒的共感染，在养禽业中已经越来越严重。由于药物残留和食品安全问题严重威胁着畜禽业的发展，新型植物免疫增强剂的研究与开发正逐渐成为国内畜牧行业研发的新热点。本课题通过研究泰山...
- 郭繁霞赵雪杨世发刘冠华朱瑞良
- 关键词：禽波氏杆菌免疫调理
- 间接免疫酶组化检测禽波氏杆菌在感染鸡体内的抗原定位被引量：7
- 2013年
- 本试验以超声破碎和高速离心方法提取禽波氏杆菌外膜蛋白,作为抗原免疫家兔,制备并纯化兔抗禽波氏杆菌外膜蛋白IgG,建立了能进行禽波氏杆菌抗原定位和检测的间接免疫酶组化法,并对试验条件进行了优化。对禽波氏杆菌人工感染海兰褐雏鸡的检测结果表明,该法能特异性地对气管、肺、肝、心、脾、肾中的禽波氏杆菌进行抗原定位,同细菌分离鉴定的结果符合率为100%。同时对感染鸡胚肝脏和心脏中禽波氏杆菌的检测结果均为阳性。该法具有高度敏感性和特异性特点,可用于禽波氏杆菌临床和试验感染条件下的诊断和定位检测。
- 杨萍萍刘静静赵雪贺晓华刘冠华朱瑞良
- 关键词：禽波氏杆菌抗原定位
- 支气管败血波氏杆菌外膜蛋白的提取及其免疫效果的检测被引量：3
- 2008年
- 本研究以小鼠为实验动物模型,研究支气管败血波氏杆菌的外膜蛋白(OMP)和其中的有效保护抗原成分(OMP68)的免疫原性及免疫保护作用。本研究利用改进的Wooldridge的方法提取了支气管败血波氏杆菌P11和P13的OMP,利用SDS-PAGE比较了2株之间差异,采用Western-blotting进行了分析并确定了P13菌株OMP(P13-OMP)中的有效保护性抗原成分,采用电洗脱方法获的分子量为68kD的P13-OMP有效保护抗原成分(OMP68),然后制备了油乳剂P13的全菌、P13-OMP和OMP68免疫抗原。抗体动态变化:将清洁级小鼠70只随机分成7组,10只/组,用油乳剂P13的全菌和不同剂量的P13-OMP和OMP68免疫抗原分别免疫,采用间接ELISA检测免疫小鼠的相应抗体水平并分析抗体动态变化;主动免疫保护试验:将清洁级小鼠80只随机分成8组,10只/组,分别采用制备的油乳剂P13-OMP(OMP25μg/只)、OMP68(25μg/只)和P13菌体免疫抗原在免疫10d后,分别用100LD50的P11和P13腹腔攻毒,然后统计保护率并分析免疫原所提供的免疫保护力。免疫P13-OMP和OMP68油乳剂抗原后,7d时,抗体水平开始逐渐上升,42d时,抗体水平分别达到215.3和214.8,然后逐渐下降,70d时,抗体水平分别达到29.1和210.2。主动免疫时,P11和P13攻毒的P13-OMP免疫组分别均得到9/10和9/10的保护,OMP68免疫组分别均得到9/10和10/10的保护,而P13全菌免疫组分别得到4/10和6/10保护,对照组全部死亡。P13-OMP和OMP68抗原均具有良好的免疫原性和免疫保护作用,为支气管败血波氏杆菌OMP亚单位疫苗的研制奠定了良好的理论基础。
- 肖海君闫振贵崔金生刘冠华王小娥杨春晓朱瑞良
- 关键词：支气管败血波氏杆菌小鼠外膜蛋白免疫原性
- 鸡胚中禽波氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：1
- 2013年
- 从出现孵化率降低(80.3%)和弱雏率增多(16.5%)等现象的山东某大型海蓝褐种禽孵化场18日龄将出壳鸡胚中分离到1株禽波氏杆菌,命名为LL09株,并进行了23S rRNA的序列扩增和耐药性分析。结果表明,其23S rRNA序列与同年分离到的XT09株的同源性为100%,与其它8株B.avium的同源性为96.2%～96.6%,而与GenBank中收录的B.avium NC-010645的同源性为95.8%。该菌对所检测的14类47种药物中有28种呈现完全耐药,6种为低敏,只有13种药物比较敏感。耐受药物中包括了头孢类、青霉素类、单酰胺环类、大环内酯类、糖肽类、磺胺类等常用药物,只有喹诺酮类、氨基糖苷类和呋喃类中的部分药物的杀菌效果较好。
- 杨萍萍谭燕玲赵雪刘静静贺晓华刘冠华朱瑞良
- 关键词：禽波氏杆菌鸡胚耐药性
- 支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立和应用被引量：4
- 2009年
- 根据支气管败血波氏杆菌ptxA基因设计1对引物,扩增特异的872bp核酸片段,建立了应用PCR检测支气管败血波氏杆菌的方法。特异性试验结果表明,3株支气管败血波氏杆菌参考菌株均能扩增出872bp特异性的核酸片段,兔源性的大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,PCR的最低检出限量为210个支气管败血波氏杆菌。利用建立的PCR检测方法对22株从山东省泰安地区某兔场采集的疑似兔支气管败血波氏杆菌病病兔鼻黏液棉拭子进行检测,结果19株为阳性。并同时进行普通血清学方法和细菌学方法,对检测结果进行了比较,结果显示,PCR方法阳性检出率高于其他检测方法。
- 肖海君崔金生翁立雪王小娥杨春晓曲朝杰朱彩霞刘冠华朱瑞良
- 关键词：支气管败血波氏杆菌PCR
- 莱芜黑山羊消化道内分泌细胞的免疫组织化学研究被引量：4
- 2007年
- 目的探究莱芜黑山羊消化道内5-羟色胺(5-HT)、生长抑素(SS)、胃泌素(Gas)和血管活性肠肽(VIP)4种免疫阳性细胞的形态结构和分布规律。方法采用免疫组织化学SABC法。结果消化道中4种免疫阳性细胞形态多样,大多呈椭圆形和锥体形。5-HT阳性细胞数量以结肠最多,空肠和回肠次之,幽门腺区、十二指肠和直肠较少,食管、贲门腺区、胃底腺区和盲肠中未见;SS阳性细胞在幽门腺区数量最多,贲门腺区、结肠、盲肠和直肠中未见;Gas阳性细胞大量出现于十二指肠,在食管、贲门腺区和盲肠未见;除个别器官(食管、十二指肠和回肠)未见VIP阳性细胞外,在消化道的其余各段均有分布。结论消化道内5-HT、SS、Gas和VIP 4种细胞出现最多的部位分别是结肠、幽门腺区、十二指肠和贲门腺区。
- 侯衍猛汤连升王树迎宋翔刘冠华王怀蓬
- 关键词：消化道内分泌细胞免疫组织化学莱芜黑山羊
