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闫伟
作品数:
1
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供职机构:
徐州医学院附属医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张中明
徐州医学院附属医院
袁光达
徐州医学院附属医院
董红燕
徐州医学院
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2013
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大鼠PEDF44mer慢病毒载体的构建及鉴定
2013年
目的 构建大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)44mer基因的慢病毒表达载体并检测其表达.方法 化学合成PEDF 44mer-6his,亚克隆入GV206载体,测序鉴定.挑取阳性克隆转染293T细胞,实时荧光定量PCR法测定病毒滴度.将已构建的病毒转染293T细胞,RT-PCR和Western blot法检测44mer-6his表达.结果 阳性克隆测序与设计的44mer基因序列完全一致,44mer慢病毒构建成功.实时荧光定量 PCR法检测病毒滴度为2.00E+9 TU/ml.44mer慢病毒转染293T细胞后,RT-PCR检测到44mer表达.Western blot显示44mer-6his融合蛋白表达阳性.结论 成功设计构建了PEDF 44mer慢病毒,为进一步研究44mer在缺血性心肌病中的作用和机制奠定基础.
闫伟
袁光达
张中明
董红燕
关键词:
色素上皮衍生因子
慢病毒表达载体
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