银巍
- 作品数：34 被引量：65H指数：4
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学历史地理更多>>
- 应用mRNA差异显示技术筛选大鼠小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达基因被引量：2
- 2007年
- 目的:应用mRNA差异显示技术对大鼠小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达基因进行筛选,克隆以及鉴定。方法:大鼠小脑颗粒神经元的分离和原代培养;对大鼠小脑颗粒神经元凋亡逆转模型进行荧光mRNA差异显示逆转录PCR(FDDRT-PCR,fluorescent differential display RT-PCR);EST片段亚克隆入pGEM-T Ea-syTM,克隆后测序并进行序列同源性检索;反Northern杂交重鉴定与筛选。结果:通过DDRT-PCR获得164个在小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达的ESTs;对其中的17个ESTs进行了克隆并测序;通过反Northern杂交的初步筛选初步鉴定出5个阳性片段。结论:阳性差异表达EST的筛选、克隆以及鉴定为神经元凋亡与保护分子机制研究奠定基础。
- 银巍黄奕俊皮荣标苏兴文赵灵芝邱鹏新颜光美
- 关键词：细胞凋亡差异表达基因小脑神经元
- 黄牛奶树根的三萜酸类成分研究
- 2016年
- 目的研究黄牛奶树Symplocos laurina根的三萜酸类成分。方法采用硅胶柱色谱法、ODS、凝胶Sephadex LH-20柱色谱、半制备液相色谱等技术进行分离纯化,通过波谱数据分析及物理常数对照等方法鉴定化合物结构。结果从黄牛奶树根95%乙醇提取物中分离得到10个三萜酸类化合物,分别鉴定为19α-羟基-4-羰基-3,24-非-2,4-开环齐墩果烷-12-烯-2,28-二酸(1)、negundonorin A(2)、2α,3β,19α,23-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(3)、2α,3β,19α,23-四羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸(4)、2α,3β,23-三羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(5)、2α,3β,23-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸(6)、2α,3α,19α,23-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(7)、1α,3β,19α,23-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(8)、3β,19α,23-三羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(9)、3β,19α,23-三羟基乌苏烷-2-羰基-12-烯-28-酸(10)。结论所有化合物均首次从黄牛奶树中分离得到,除化合物3、7,其他化合物均为首次从山矾属植物中分离得到。
- 区瑞莹谢丽霞彭光天谭冰心银巍邱鹏新罗海彬何细新
- 关键词：三萜酸
- 咖啡因对苯妥英诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用及机制被引量：7
- 2004年
- 目的 观察咖啡因 (caffeine)对苯妥英 (diphenylhy dantoin ,DPH) 10 0 μmol·L-1处理的大鼠小脑颗粒神经元(cerebellargranularneurons ,CGNs)存活率的影响 ,并探讨其作用机制。方法 体外培养 8d的CGNs,同时给予 10 0μmol·L-1苯妥英和 1 2 5～ 2 0mmol·L-1咖啡因 ,4 8h后行凋亡分析 ;采用dantrolene(2 0 μmol·L-1)、2APB (5 0 μmol·L-1)、nifedipine(10 0 μmol·L-1)和nimodipine(10 0 μmol·L-1)、MK80 1(4μmol·L-1)、KN93(1μmol·L-1)以及MEK1抑制剂PD980 5 9(5 0 μmol·L-1)分别预先孵育 30min ,再与10mmol·L-1咖啡因和 10 0 μmol·L-1苯妥英共孵育 4 8h ,测定CGNs存活率 ,观察咖啡因的作用与 [Ca2 + ]i 的关系 ;Westernblot法检测咖啡因对磷酸化c Jun和磷酸化ERK水平的影响。结果 ① 1 2 5～ 2 0mmol·L-1咖啡因可浓度依赖性抑制 10 0 μmol·L-1苯妥英引起的CGNs凋亡 ,显著提高CGNs存活率 ;②dantrolene、2APB、nifedipine和nimodipine、KN93、MK80 1和PD980 5 9均不能取消 10mmol·L-1咖啡因对 10 0 μmol·L-1苯妥英引起的CGNs凋亡的保护作用。③咖啡因可明显抑制苯妥英诱导CGNs中c Jun磷酸化水平的升高 ,但不影响被苯妥英抑制的ERK的活性。结论 一定浓度的咖啡因可保护苯?
- 赵灵芝苏兴文银巍江伟健黄亦俊邱鹏新颜光美
- 关键词：咖啡因苯妥因小脑颗粒神经元凋亡C-JUN
- 大鼠神经元Arnt2亚细胞定位的预测与分析被引量：1
- 2006年
- 目的:分析大鼠小脑颗粒神经元Arnt2的亚细胞定位情况。方法:利用CBS生物信息资源,根据Arnt2氨基酸序列(LOCUS:NP_036913)进行真核生物亚细胞定位预测,并寻找Arnt2核输出信号(NES);最后利用激光扫描共聚焦显微术(LSM)确定Arnt2在正常大鼠小脑颗粒神经元中的亚细胞定位情况。结果:预测Arnt2在真核生物细胞中主要为细胞核定位,并具有线粒体定位的可能性;预测结果还显示Arnt2氨基酸序列上存在着核输出信号,具体位置为氨基端第143位亮氨酸;LSM分析结果证实Arnt2定位于大鼠小脑颗粒神经元细胞核内。结论:Arnt2定位于正常大鼠小脑颗粒神经元细胞核内;Arnt2具有线粒体定位的可能性,并存在核输出信号,提示在某些诱导因素作用下,Arnt2存在线粒体定向转位的趋势。
- 孙林光银巍黄奕俊程文芳苏兴文邱鹏新颜光美
- 关键词：神经元亚细胞定位
- 胆甾烷－3β,5α,6β－三醇在制备神经元保护药物中的应用
- 本发明揭示了内源性胆固醇代谢产物胆甾烷－3β，5a，6β－三醇(YC－5)对脑缺血、脊髓缺血、癫痫发作及惊厥的神经元损伤具有保护作用，涉及YC－5在制备神经元保护药物中的应用。从胆固醇经两步反应获得YC－5。经体外原代细...
- 颜光美胡海燕孙环环桑韩飞冷田东刘爱伶银巍黄奕俊张静夏邱鹏新
- 文献传递
- 小檗碱衍生物及其用途
- 本发明式（I）的化合物或其盐以及它们的用途，其中R为C<Sub>10</Sub>-C<Sub>18</Sub>烷基或苄基，<Image file="2013102185667100004DEST_PATH_IMAGE00...
- 胡海燕庹珏王亚龙谢彦奇付胜楠颜光美银巍
- 文献传递
- T_4 DNA连接酶介导的5’RACE法克隆大鼠Nor 1全长cDNA被引量：3
- 2004年
- 目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/L KCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5’RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5’端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5’RACE扩增出2.5kb序列后,75A EST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5’RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T_4DNA连接酶介导的5’RACE是一种效率较高的克隆mRNA5’端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。
- 银巍黄奕俊苏兴文赵灵芝邱鹏新颜光美
- 关键词：小脑神经元
- 尖吻蝮毒腺cDNA文库的构建、金属蛋白酶基因克隆和序列分析(英文)被引量：1
- 2006年
- 目的 构建非标准化尖吻蝮（五步蛇，Agkistrodon acutus）毒腺cDNA文库，随机挑取克隆测序，分析金属蛋白酶基因。方法 以Tnzd试剂提取新鲜尖吻蝮毒腺总RNA，以superscript Ⅱ反转录酶合成cDNA第一链并以DNA聚合酶Ⅰ连续合成第二链。双链DNA经过含EcoRⅠ酶切位点接头加接，末端磷酸化并以XhoⅠ内切酶酶切，按照〈0．25kb，0．25-0．5kb，0．5-1kb，1-2kb和〉2kb5个片段大小分别回收，随后与pBluescriptⅡSK（＋）载体相连转化E.coli DH10B，构建成尖吻蝮毒腺cDNA文库。随机挑取克隆5’端测序，共获得8696条高质量表达序列标签，经过序列拼接和聚类，这些序列在经过功能注释后最终被聚类成2855个基因聚类。其中，发现一个由74个克隆组成的基因聚类（Agkihagin）为新的金属蛋白酶基因。经反转录和巢式PCR扩增该基因并对其进行结构分析。结果 构建好的文库含有2．048×10^6个重组子，新的金属蛋白酶开框读码序列全长1827个核苷酸，编码608个氨基酸，属于PⅢ型金属蛋白酶。其Zn^2＋结合模序HEMGHNLGIDH和去整合素模序DECD在进化上高度保守。结论 该文库符合建库标准库容要求，为构建尖吻蝮毒腺基因表达谱和筛选新的目的基因提供了有效平台；克隆的金属蛋白酶基因与GenBank中其他蛇毒金属蛋白酶氨基酸序列同源性最高达87％，为研究蛇毒金属蛋白酶结构与功能的关系奠定了良好基础。
- 刘清华胡松年银巍苏兴文张晓伟李晨吉邱鹏新颜光美
- 关键词：基因文库
- 黄牛奶树根茎的化学成分研究被引量：3
- 2014年
- 采用硅胶柱层析法进行成分的分离纯化,以波谱分析法鉴定黄牛奶树的化合物的结构。从黄牛奶树根、茎部位的乙醇提取物中分离、鉴定了9个化合物,分别为:齐墩果酸-3-乙酸酯(1),高根二醇-3-乙酸酯(2),豆甾醇(3),α-菠甾醇(4),香草酸(5),蔗糖(6),麦芽糖(7),5,4'-二羟基-7-甲氧基二氢黄酮(8),肌醇(9)。全部化合物均为首次从该植物中分得。
- 谢丽霞杨璐彭光天邱鹏新银巍张翠仙何细新
- 关键词：山矾属化学成分
- 胆甾-4-烯-3,6-二酮在制备治疗或预防神经元损伤药物中的应用
- 本发明公开了胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮中在制备治疗或预防神经元损伤药物中的应用。胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮能减轻由谷氨酸引起的海马神经细胞氧化应激损伤、能减轻钾剥夺引起的小脑颗粒神经元凋亡损伤、能减轻谷氨酸引起的皮层神经...
- 张静夏颜光美银巍陈文礼张伟李心花
- 文献传递
