郭占云
- 作品数:19 被引量:42H指数:4
- 供职机构:同济大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国科学院科研项目上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 类胰岛素生长因子-1的C结构域不影响胰岛素二硫键的热力学稳定性被引量:1
- 2002年
- 胰岛素和类胰岛素生长因子-1(IGF-1)都属于胰岛素超家族,两者不但一级、三级结构有较高的同源性,而且生理功能也有少量交叉.然而两者的折叠行为却有很大的差别:胰岛素及其重组前体(PIP)只折叠成一种热力学稳定的二硫键配对,而IGF-1却折叠成两种热力学稳定的二硫键异构体.为了了解两者折叠行为差异的分子机制,制备了由胰岛素的A,B 链和IGF-1的C结构域构成的单链杂交分子——[B10Glu]Ins/IGF-1(C),研究了该杂交分子二硫键的热力学稳定性以及它在含有少量流基试剂的变性剂中的解折叠程度,同时还纯化了该杂交分子一种主要的非天然二硫键异构体,并研究了它的再折叠情况.观察到IGF-1中C结构域的引入并未改变胰岛素分子的折叠热力学,但是影响了折叠的动力学过程.
- 郭占云冯佑民
- 关键词:胰岛素解折叠再折叠热力学稳定性
- 重组天然和新型人胰岛素及其制备方法
- 本发明提供了新型重组人胰岛素:去B1人胰岛素,[B12N]人胰岛素,[B16X]人胰岛素和[B26X]人胰岛素。它们保留了大部分的人胰岛素生物活性,而且后三种新型人胰岛素能够在较高浓度下仍以单体形式存在,从而更具速效优点...
- 冯佑民梁镇和张友尚唐月华王燕陈晖史民王琼庆郭占云刘滨朱尚权许英镐
- 文献传递
- 蛋白质二硫键异构酶家族的结构与功能被引量:17
- 2009年
- 蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)家族是一类在内质网中起作用的巯基-二硫键氧化还原酶.它们通常含有CXXC(Cys-Xaa-Xaa-Cys,CXXC)活性位点,活性位点的两个半胱氨酸残基可催化底物二硫键的形成、异构及还原.所有PDI家族成员包含至少一个约100个氨基酸残基的硫氧还蛋白同源结构域.PDI家族的主要职能是催化内质网中新生肽链的氧化折叠,另外在内质网相关的蛋白质降解途径(ERAD)、蛋白质转运、钙稳态、抗原提呈及病毒入侵等方面也起重要作用.
- 王志强周智敏郭占云
- 关键词:蛋白质二硫键异构酶内质网二硫键蛋白质折叠
- 蛋白质组学在神经退行性疾病中的研究进展被引量:2
- 2007年
- 蛋白质组学是后基因组时代兴起的新型学科,是从整体水平对蛋白质的综合分析。阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化症等是最常见的神经退行性疾病。应用蛋白质组学对它们进行研究,不仅可从蛋白质水平上揭示疾病的本质,还有助于全面探讨其病理机制,建立诊断标准,发现药物治疗靶点。
- 何胜祥陈平郭占云邵晓霞
- 关键词:蛋白质组学阿尔茨海默病帕金森病肌萎缩侧索硬化症
- 大分子拥挤及其对蛋白质折叠的影响被引量:5
- 2003年
- 闫菡郭占云冯佑民席丹
- 关键词:大分子拥挤蛋白质折叠细胞化学
- 蛋白质多肽激素生物发光配基-受体结合测定新方法
- 2015年
- 蛋白质多肽激素是一大类内源信号分子,通过激活靶细胞膜上特定受体发挥重要调控功能。配基-受体结合测定是研究蛋白质多肽激素与受体相互作用的重要实验方法,但传统方法要使用放射性同位素(如碘-125),限制了该方法的广泛使用。我们在近期工作中利用超灵敏的Nano Luc荧光素酶建立了"生物发光配基-受体结合测定新方法"用于研究蛋白质多肽激素与受体的相互作用。该方法具有灵敏度高、重复性好、安全无害、操作简便等的优点,有望广泛用于蛋白质多肽激素与受体相互作用研究。
- 刘亚丽郭占云
- 关键词:生物发光NANO
- 重组天然和新型人胰岛素及其制备方法
- 本发明提供了新型重组人胰岛素:去B1人胰岛素,[B12X]人胰岛素,[B16X]人胰岛素和[B26X]人胰岛素。它们保留了大部分的人胰岛素生物活性,而且后三种新型人胰岛素能够在较高浓度下仍以单体形式存在,从而更具速效优点...
- 冯佑民梁镇和张友尚唐月华王燕陈晖史民王琼庆郭占云刘滨朱尚权许英镐
- 文献传递
- 胰岛素及其超家族的结构功能及折叠的研究
- 冯佑民唐月华郭占云陈晖乔志松
- 完成了胰岛素在酵母中分泌表达的研究,继而将基因工程和蛋白质工程技术用于胰岛素及其超家族的结构功能及折叠的研究。阐明了胰岛素分子中3个二硫键对胰岛素的结构与功能的重要性依次为A20-B19>A7-B7>A6-A11。提出A...
- 关键词:
- 关键词:胰岛素折叠
- 毛细管电泳法测定重组人源化IgG2抗体的纯度被引量:4
- 2018年
- 目的建立利用毛细管电泳法测定重组人源化免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)纯度的方法,并进行优化和验证。方法采用单因素法,对稀释液、碘乙酰胺浓度(非还原条件)、加热方式、进样电压、进样时间、分离电压、样品盘和卡盒温度进行多水平优化,并利用优化的方法测定IgG2的纯度。以峰面积对样品加样量进行线性回归,确定该方法的线性范围,并对该方法进行精密度、准确度及溶液稳定性验证。结果最佳电泳条件为:选用超纯水作为稀释液,250 mmol/L碘乙酰胺(非还原条件),70℃干热10 min,进样电压为5 kV,进样时间为30 s,分离电压为15 kV,样品盘和卡盒温度为20℃。在优化的色谱条件下,在还原条件下,IgG2纯度检测的线性范围为50~150μg,相关系数为0.998,重复性的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.14%,中间精密度的RSD为0.24%,且20℃放置13 h稳定;在非还原条件下,IgG2纯度检测的线性范围为50~150μg,相关系数为0.999,重复性的RSD为0.36%,中间精密度的RSD为0.16%,且20℃放置13 h稳定。结论该方法线性关系良好,且精密度、准确度、灵敏度较高,测定结果稳定可靠,适用于重组人源化IgG2的纯度分析。
- 黄碧君黄艳胡红琴郭占云
- 关键词:免疫球蛋白G纯度毛细管电泳法
- 一种基于生物发光测定蛋白连接酶活力的组合物、方法及其应用
- 本发明涉及一种基于生物发光测定蛋白连接酶活力的新方法,该方法对各种蛋白连接酶普遍适用,可用于已知蛋白连接酶的表征、活力跟踪及抑制剂筛选,也可用于从植物及其它来源筛选各种新型蛋白连接酶。本发明的特征是通过重组表达或其它方法...
- 郭占云张聪慧邵晓霞