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干细胞与糖尿病治疗被引量：1: 2003年; 干细胞诱导分化为胰岛 β细胞以重建胰岛为糖尿病的治疗开辟了新途径。胚胎干细胞和成体干细胞是较好的用于细胞替代治疗的细胞来源 ,但干细胞参与糖尿病治疗还存在取材困难 ,分离困难等问题。葡萄糖及成纤维细胞生长因子是胰岛 β细胞基因表达的重要影响因子。; 屈纪富郝利孟萍艾智华程天民; 关键词：胰岛Β细胞干细胞分化

创伤早期伤口液作用真皮多能干细胞差异表达cDNA文库的构建被引量：4: 2005年; 目的：研究创伤早期伤口液作用前后真皮多能干细胞基因表达的变化,探讨真皮多能干细胞参与创伤修复启动的分子机制。方法：取伤后1d伤口液作为创伤修复启动微环境,刺激真皮多能干细胞,24h后提取总RNA为实验方(tester),未予刺激的真皮多能干细胞总RNA为驱动方(driver)。实验方、驱动方总RNA由SMART cDNA方法合成cDNA,然后用抑制消减杂交(SSH)方法获得消减杂交产物。消减杂交产物克隆到T载体构建消减文库。对部分克隆进行杂交筛选及序列比对。结果：消减杂交文库挑取615个克隆进行PCR扩增,阳性率约为97%。取其中48个克隆进行反向Northern杂交,获得5个差异表达基因。经Genebank检索,这些差异表达基因与已知序列有较高同源性,其中大多为与创伤修复相关的基因。结论：我们成功构建了创伤早期伤口液刺激前后大鼠真皮多能干细胞差异表达cDNA文库,并筛选、克隆出部分与真皮多能干细胞参与创伤修复相关的差异表达基因。; 屈纪富史春梦郑怀恩郝利程天民; 关键词：真皮多能干细胞创伤愈合抑制消减杂交

真皮多能干细胞在创伤愈合中的作用被引量：6: 2004年; 目的:研究真皮多能干细胞的部分基本生物学特性,观察其在创伤愈合中的意义。方法:采用前期建立的技术分离、纯化并扩增真皮多能干细胞;利用流式细胞技术观察真皮多能干细胞周期变化;四唑盐比色试验(MTT法)观察其辐射敏感性。收集伤后1,2,3和4d伤口液,观察其对真皮多能干细胞的反应性。结果:分离、纯化的真皮多能干细胞形态较为均一,增殖能力强;培养的细胞凋亡数量少,多处于静止期,对辐射极为敏感;这种细胞增殖对伤口液具有良好的反应性,尤其伤后早期伤口液作用更为明显。结论:发育成熟的个体中仍存在较为幼稚的真皮多能干细胞,它们在创伤愈合过程中具有重要意义,特别是在创伤修复启动中的作用值得进一步深入研究。; 屈纪富史春梦麦跃郝利程天民; 关键词：真皮多能干细胞创伤伤口愈合细胞培养细胞周期

创伤早期伤口液对体外培养真皮多能干细胞增殖迁移特性的影响被引量：8: 2006年; 目的探讨真皮多能干细胞在创伤修复启动中的作用。方法采用前期建立的技术分离、纯化并扩增真皮多能干细胞、真皮成纤维细胞和血管内皮细胞;利用四唑盐比色试验(MTT法)检测不同时间、不同浓度伤口液对上述细胞的影响。在此基础上,观察伤后1d伤口液对真皮多能干细胞贴壁力和迁移力等与创伤修复密切相关的指标变化。结果伤后不同时相不同浓度伤口液对真皮多能干细胞增殖均具有显著刺激作用,但以伤后早期的伤口液作用最为明显。成纤维细胞和血管内皮细胞对伤口液反应均显著弱于真皮多能干细胞。伤口液作用后真皮多能干细胞贴壁力和迁移能力较对照组细胞显著增加。结论真皮多能干细胞是创伤愈合,特别是创伤修复启动过程中的一种重要的间充质干细胞,对其深入研究有望为阐明创伤修复启动分子机制提供依据。; 屈纪富江德鹏郑怀恩郝利文亮程天民; 关键词：真皮多能干细胞伤口液

抑制消减杂交在干细胞研究及组织修复中的应用被引量：3: 2003年; 干细胞(stemcells)是指具有自我更新和多向分化潜能的细胞,它们在组织修复(细胞疗法和组织工程的种子细胞、基因治疗的载体)研究中具有无可比拟的优越性。但目前干细胞基本生物学特性及应用研究中仍有诸多问题尚未阐明,特别是基因和分子水平的机制仍远未阐明。机体组织和细胞基因表达的变化能灵敏、细致地反映生长、发育、分化的发生机制,分析细胞或组织间基因差异表达(differentialexpression)是阐明其活动机制的重要方法。抑制消减杂交(suppressionsubtractivehy-bridization,SSH)技术是一种新近发展的差异基因筛选技术,它是以抑制PCR(suppressionPCR)为基础,将标准化检测子cDNA单链步骤和消减杂交步骤合为一体的技术,具有假阳性率低、敏感性高、速度快、效率高等特点。SSH技术已被国内外很多研究者所采用,克隆了多种新基因。近来应用SSH技术对涉及干细胞分化调控机制进行了初步研究,这对深入研究干细胞生物学特性及应用奠定了基础。随着SSH技术的不断完善,它在包括干细胞及组织修复等方面的研究中将发挥重要作用。; 屈纪富郝利程天民; 关键词：干细胞抑制消减杂交 SSH 基因表达

细胞因子在创伤愈合过程中的变化及其意义的研究进展被引量：48: 2003年; 创伤愈合包括多种细胞、细胞因子和细胞外基质之间错综复杂的网络作用。细胞因子可以调节创伤愈合过程中的多种细胞反应 ,提供细胞间相互联系的方法 ;它们也可影响细胞外基质的合成和释放。因此 ,细胞因子在创伤愈合过程中具有重要作用。; 屈纪富郝利孙薇程天民; 关键词：细胞因子创伤愈合转化生长因子Β 血小板源性生长因子角质细胞生长因子

热休克蛋白70在创伤愈合中的作用被引量：2: 2006年; 目的探讨热休克蛋白70(heat shock prote in 70,HSP70)在创伤愈合过程中的变化及其意义。方法取大鼠伤后1天伤口液作为创伤修复启动微环境,刺激真皮多能干细胞,24小时后检测细胞表达HSP70含量的变化。同时制作单纯创伤和难愈创伤动物模型,通过免疫组化和图像分析方法观察伤后不同时相点伤口组织HSP70含量变化。结果创伤早期伤口液作用真皮多能干细胞后,HSP70表达显著增加。单纯创伤组大鼠伤后各时相点伤口局部HSP70表达均显著增加,尤以真皮组织增加明显,其峰值为伤后3天。难愈创伤组大鼠伤口局部HSP70含量在伤后各时相点亦显著增加,但与单纯创伤组相比,其含量在伤后各时相点均显著减少,尤以真皮组织表达减少更为明显,并且HSP70表达峰值显著延迟,为伤后7天。结论HSP70不仅是一种应激保护分子,而且还是参与调节创伤愈合的一种重要分子。; 屈纪富史春梦江德鹏郑怀恩郝利文亮程天民; 关键词：创伤愈合热休克蛋白70

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