邵国利
- 作品数：35 被引量：82H指数：5
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目兰州军区医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 短程低氧条件下乳腺癌BT549细胞表达beclin 1基因对上皮间质转化的影响被引量：5
- 2014年
- 目的 beclin 1基因慢病毒表达载体稳定感染三阴性乳腺癌BT549细胞后,于短程低氧条件下探讨beclin 1基因对上皮间质转化(EMT)的影响。方法用带有pLenO-GTP Vector及pLenO-GTPbeclin 1 Vector的慢病毒以感染复数(MOI)为20分别感染BT549细胞,即实验对照组及实验组,未感染细胞作为空白对照。感染96 h后用倒置荧光显微镜观察荧光,估计感染效率;用Western blot法检测beclin 1基因是否在BT549细胞中稳定表达;将各组细胞低氧培养12、24 h后采用荧光定量PCR、Western blot法及激光共聚焦显微镜检测EMT相关标志物;用Western blot法检测低氧培养24 h后的各组细胞Wnt/β-catenin信号通路的相关蛋白表达水平。用两样本t检验分析低氧时间对细胞EMT相关标志物的表达情况,余计量资料用方差分析进行统计。结果慢病毒感染BT549细胞96 h后,感染效率约为100%,实验组beclin 1蛋白高效稳定表达(F=107.200,P=0.000);低氧条件下,相对于空白对照组、实验对照组,实验组细胞的上皮标志物E-cadherin mRNA和蛋白表达水平上调(12 h:F=122.451、P=0.000,F=29.651、P=0.001;24 h:F=108.783、P=0.000,F=41.232、P=0.000),而间皮标志物Ncadherin、vimentin及fibronectin表达水平下调(12 h:N-cadherin F=92.918、P=0.000、F=138.034、P=0.000,vimentin F=135.313、P=0.000、F=39.765、P=0.000,fibronectin F=144.275、P=0.000;24 h:Ncadherin F=76.064、P=0.000、F=40.614、P=0.000,vimentin F=206.576、P=0.000、F=46.658、P=0.000,fibronectin F=411.405、P=0.000);相对于低氧培养12 h,各组细胞低氧培养24 h后E-cadherin表达水平下调(空白对照组:t=4.266、P=0.013,t=11.235、P=0.000;实验对照组:t=10.463、P=0.000,t=4.092、P=0.009;实验组:t=28.208、P=0.000,t=7.262、P=0.001),而N-cadherin(实验组除外)、vimentin和fibronectin表达水平上调(空白对照组:N-cadherin t=3.072、P=0.037、t=7.146、P=0.002,vimentin t=6.384、P=0.003、t=7.476、P=0.002,fibronectin t=8.389、P=0.001;实验对照组:Ncadherin t=2
- 郑临海吴爱国范旭龙王梦川邵国利纪术峰焦庆丽
- 关键词：细胞低氧上皮间质转化BECLIN1
- c-myc反义寡核苷酸对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究体外c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响.方法:利用脂质体LipofectamineTM2000介导将c-myc ASODN转染入大肠癌HT-29细胞中,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、Western blot方法检测c-myc基因mRNA及蛋白的表达,MTT、流式细胞仪(FCM)检测c-myc ASODN对人结肠癌HT-29细胞增殖抑制及其对奥沙利铂敏感性影响.结果:转染c-myc ASODN后,HT-29细胞内c-mycm RNA水平显著降低(0.464±0.029vs0.974±0.027,0.945±0.012,均P<0.01).在HT-29细胞中存在分子质量62kDa的特异性条带,与c-myc分子质量相符,ASODN组在PVDF膜上的特异性条带明显弱于对照组;MTT结果显示转染c-myc ASODN48h后的HT-29细胞的增殖速度较对照组细胞明显减慢.FCM显示c-myc ASODN转染后72h后,奥沙利铂+c-myc ASODN组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05).结论:体外c-myc ASODN可抑制c-myc mRNA及蛋白的表达,阻断c-myc可抑制HT-29细胞增殖并增强其对奥沙利铂的敏感性,可能为大肠癌的基因治疗提供新的靶点.
- 邵国利吴爱国焦得闯纪术峰
- 关键词：反义寡核苷酸反义治疗HT-29
- VEGF反义寡核苷酸对体外生长的大肠癌HT-29细胞的抑制作用被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)对体外生长的人大肠癌HT-29细胞的抑制作用.方法:实验设空白对照组、脂质体转染组、错义链转染组(SODN组)和不同浓度反义链转染组(ASODN组).用LipofectamineTM2000介导的VEGF ASODN和错义寡核苷酸(SODN)转染人大肠癌细胞株HT-29,半定量RT-PCR检测各组细胞VEGF mRNA的表达;Western blot测定转染48、72h后VEGF蛋白表达;MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡.结果:转染48h后,ASOND组的VEGF mRNA表达水平明显低于脂质体对照组和SODN组(0.455±0.032vs0.934±0.031,0.915±0.004,P<0.01);脂质体对照组与SODN组之间无显著差异.细胞转染48、72h后,ASODN组蛋白表达明显弱于脂质体对照组和SODN组,且72h弱于48h.与对照组比较,VEGF ASODN对HT-29细胞有明显的生长抑制作用,并且抑制呈剂量和时间依赖性(P<0.05).结论:VEGF ASODN通过抑制VEGF的基因表达,对体外生长的人大肠癌HT-29细胞的增殖进行抑制.
- 焦得闯吴爱国邵国利纪术峰
- 关键词：反义寡核苷酸大肠癌MTT法免疫印迹
- miR-125b-1增强乳腺癌SKBR-3细胞对紫杉醇的药物敏感性被引量：4
- 2012年
- 目的探讨miR-125b-1增强紫杉醇对乳腺癌SKBR-3细胞化疗敏感性的影响,及其对靶基因Her2蛋白表达的影响。方法合成miR-125b-1并通过LipofectamineTM2000转染SKBR-3细胞,将实验分为空白对照组(脂质体转染SKBR-3细胞株)、阴性对照组(siRNA转染SKBR-3细胞株)、miR-125b-1组(miR-125-1转染SKBR-3细胞株)3组。分别用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Her2 mRNA和蛋白质表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测miR-125b-1对紫杉醇作用于SKBR-3细胞化疗敏感性的影响。结果 miR-125b-1转染后的SKBR-3细胞中Her2 mRNA和蛋白质水平显著下降;流式细胞仪检测结果显示,转染miRNA-125b-1的SKBR-3细胞G2M期细胞比例显著高于其他组(P=0.000),而空白对照组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P=0.094)。三组之间比较,G0-G1期、S期比例差异无统计学意义;用miR-125b-1处理组细胞的IC50与未处理组相比下降2.69倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-125b-1可增强乳腺癌SKBR-3细胞对紫杉醇的化疗敏感性,下调Her2可能是其作用机制之一。
- 胡斌吴爱国李学孝纪术峰王梦川吴凯邵国利
- 关键词：乳腺肿瘤紫杉醇微RNAS
- miRNA-125b-1对乳腺癌SKBR-3细胞放射敏感性的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨miRNA-125b-1对乳腺癌SKBR-3细胞放射敏感性的影响,及其对靶基因HER-2蛋白表达的影响。方法合成miRNA-125b-1并通过lipofectamineTM2000转染SKBR-3细胞,分别用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot法检测HER-2mRNA和蛋白质表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖抑制率;经不同剂量X线照射后,平板克隆形成实验计算细胞存活率,用单击多靶数学模型进行曲线拟合作图,求曲线参数D0、Dq和N值,比较细胞放射敏感性的变化。RT-PCR和Western blot定量结果的组间比较采用单因素方差分析,细胞周期及细胞增殖实验结果的组间比较采用重复测量方差分析。结果 miRNA-125b-1转染后的SKBR-3细胞中HER-2mRNA(F=447.78,P=0.00)和蛋白质水平(F=10.07,P=0.01)显著下降;转染后的SKBR-3细胞出现了G2M期阻滞;miRNA-125b-1组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组(F=163.28,P=0.00);曲线拟合后显示,转染后的细胞(D0=1.87,Dq=2.68,N=4.21)与对照组(D0=2.51,Dq=4.10,N=5.11)相比D0,Dq和N值均下降(SER=1.34,P<0.05),提示细胞放射敏感性增加。结论 miRNA-125b-1使乳腺癌SKBR-3细胞的放射敏感性增加,可为HER-2阳性的乳腺癌提供新的治疗方法。
- 胡斌吴爱国李学孝纪术峰王梦川吴凯邵国利
- 关键词：乳腺肿瘤放射疗法微小RNA人表皮生长因子受体2
- 乳腺癌组织Beclin1和EMT相关分子标志物表达及其临床意义探讨被引量：10
- 2015年
- 目的探讨乳腺癌组织Beclin1和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子标志物(E-cadherin,N-cadherin)表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)、免疫组织化学和蛋白质印迹法分别检测2012-12-01—2013-06-01南方医科大学珠江医院收治的67例乳腺癌和正常乳腺组织标本中Beclin1及E-cadherin、N-cadherin的mRNA和蛋白表达情况,分析Beclin1与EMT及临床病理学特征的关系。结果乳腺癌组织和正常乳腺组织中Beclin1mRNA的表达量分别为2.194±0.502和5.637±1.445,z=-6.806,P<0.001;E-cadherin mRNA的表达量分别为2.647±0.717和6.538±2.045,z=-5.088,P=0.009;N-cadherin mRNA的表达量分别为6.501±0.741和3.860±0.955,z=5.928,P<0.001。Beclin1蛋白定位于胞膜和胞质,以胞质为主;E-cadherin蛋白定位于胞膜和胞质,以胞膜为主;N-cadherin蛋白定位于胞膜和胞质,以胞质为主。乳腺癌组织和正常乳腺组织中Beclin1蛋白表达量分别为5.531±0.848和7.871±0.817,z=-5.431,P<0.001;E-cadherin蛋白的表达量分别为1.257±0.142和2.885±0.294,z=-4.904,P<0.001;N-cadherin蛋白表达量分别为0.802±0.072和0.419±0.049,z=4.453,P<0.001。Beclin1蛋白是EMT的保护因素,Beclin1蛋白与人类表皮生长因子受体(human epidermal growth factor 2,HER-2)、Ki-67和TNM分期呈负相关性,P值均<0.05;与年龄、组织分级、雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progestrone receptor,PR)无相关关系。结论无论mRNA水平还是蛋白质水平,乳腺癌组织中Beclin1和E-cadherin较正常乳腺组织表达均下调,N-cadherin较正常乳腺组织表达上调。Beclin1是EMT的保护因素,Beclin1与HER-2、Ki-67和TNM分期均存在负相关关系,可作为乳腺癌的预后指标,对进一步研究乳腺癌的远处转移机制提供理论参考。
- 焦庆丽吴爱国邵国利王梦川纪术峰郑临海范旭龙张健
- 关键词：BECLIN1上皮-间质转化
- c-myc反义寡核苷酸对结肠癌HT29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性研究
- 大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,全世界范围内,大肠癌发病率排在恶性肿瘤的第3位。在我国,随着生活水平的不断提高,饮食习惯的改变,大肠癌的发病率呈逐年上升趋势以4.2/%的平均速度递增。目前大肠癌的治疗方法以手术切除为主,辅...
- 邵国利
- 关键词：C-MYC基因反义寡核苷酸反义治疗
- 文献传递
- 成人淋巴结朗格罕细胞组织细胞增生症1例
- 2009年
- 焦得闯吴爱国邵国利纪术峰吴凯
- 关键词：组织细胞增生症朗格罕细胞人淋巴结腹股沟包块慢性淋巴结炎足背动脉搏动
- Let-7a对人乳腺癌细胞生长的抑制作用及机制被引量：5
- 2010年
- 目的探讨let-7a对人乳腺癌MCF-7细胞株的抑制作用及机制。方法分别用lipofectami-neTM2000介导的let-7a转染MCF-7细胞株(实验组)和siRNA转染细胞株(阴性对照组),并设空白对照组(脂质体转染组)。使用荧光显微镜观察细胞转染效率;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;半定量RT-PCR法检测IMP-1 mRNA的表达;Western blot法测定转染48 h后IMP-1蛋白的表达水平。结果实验组和阴性对照组的细胞转染效率无明显差别;let-7a组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组及空白对照组(均为P<0.05),且具有时间和浓度依赖性;let-7a组的IMP-1 mRNA表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组(F=220.384,P=0.000);在MCF-7细胞中存在IMP-1蛋白表达,let-7a转染组特异性条带明显弱于两个对照组。结论 let-7a对人乳腺癌MCF-7细胞增殖有抑制作用,其机制可能与抑制IMP-1的基因表达有关。
- 吴凯吴爱国马雷杨华峰邵国利
- 关键词：乳腺肿瘤微小RNA细胞转染
- 大肠癌合并副肿瘤综合征1例
- 2009年
- 吴凯吴爱国焦得闯邵国利
- 关键词：副肿瘤综合征大肠癌饮水呛咳双下肢乏力腱反射活跃构音不清
