- 干细胞在下尿路疾病修复和重建中的运用前景被引量：2
- 2015年
- 泌尿系统组织器官结构和功能的缺失可见于多种泌尿系疾病,如损伤、先天性发育障碍、严重感染、肿瘤等。对损伤和功能缺失组织器官的修复和重建是泌尿外科的重大课题。目前泌尿系重建往往采用原位的皮肤、筋膜、转皮瓣、血管等,也有使用异体组织及修补材料者。这些重建方法均面临诸多问题,包括感染、
- 李龙坤赵江
- 关键词：干细胞下尿路疾病
- 人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在低水平的自噬被引量：2
- 2014年
- 目的探讨人和大鼠膀胱平滑肌细胞是否存在自噬，以阐明自噬在膀胱疾病中的作用。方法 雌性SD大鼠8只，2～3月龄，体质量200～230 g。人膀胱标本（n=4）来自于西南医院泌尿外科膀胱癌全切患者。HE染色观察膀胱肌层定位。透射电镜（TEM）用于人和大鼠膀胱平滑肌细胞自噬小体鉴定。免疫荧光双标用于人和大鼠微管相关蛋白1轻链3（LC3）和平滑肌肌动蛋白（α-SMA）共定位。Western blot和RT-PCR检测人和大鼠膀胱肌层组织LC3蛋白和mRNA表达。结果 TEM证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬小体。免疫荧光双标和Western blot证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬标记蛋白LC3的表达。RT-PCR证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬标记蛋白LC3 mRNA的表达。结论 人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬，这种低水平自噬可能在维持膀胱平滑肌细胞自身稳态中起到重要作用。
- 赵江董兴有杨星亮王亮李龙坤周占松宋波
- 关键词：自噬膀胱平滑肌膀胱
- 二甲基亚砜通过降低炎症和氧化应激改善鱼精蛋白诱导的大鼠膀胱炎被引量：4
- 2015年
- 目的探讨二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)对鱼精蛋白(protamine sulfate,PS)诱导的大鼠间质性膀胱炎(interstitial cystitis,IC)治疗作用。方法 SD雌性大鼠48只,按随机数字表法分为正常组、PS灌注组、PS+DMSO组、盐水灌注组(NS组),每组12只大鼠。正常组大鼠未给予任何处理;PS组用0.5 m L,30 mg/m L的PS膀胱内灌注并在膀胱内保留30 min;PS+DMSO组使用50%DMSO溶解PS,按照0.5 m L,30 mg/m L的PS膀胱内灌注并在膀胱内保留30 min;NS组用0.5 m L生理盐水膀胱灌注并保留30 min,各组大鼠每周处理1次,连续处理4周。4周后,HE和甲苯胺蓝染色用于病理学评分和肥大细胞计数;尿动力学和肌条实验被用于评价大鼠膀胱功能和肌肉收缩性改变;Western blot检测SOD2、GSH-Px、IL-6、IL-1B、TNF-α的表达量。结果与PS组相比,PS+DMSO组大鼠膀胱病理学评分[(3.00±0.00)vs(0.83±0.40),P<0.05]、肥大细胞计数[(19.66±2.16)vs(6.16±1.16),P<0.05]以及炎症因子IL-6、IL-1B和TNF-α表达(P<0.05)显著降低,而抗氧化应激酶(SOD2和GSH)显著恢复(P<0.05);在膀胱功能学上,与PS组相比,PS+DMSO组大鼠膀胱排尿频率[(24.83±3.06)vs(9.83±1.47),P<0.05]显著降低,排尿间隔[(2.42±0.37)vs(6.40±0.57),P<0.05]显著延长,肌肉收缩频率[(6.93±0.97)vs(4.94±0.73),P<0.05]显著降低。结论 DMSO可能通过降低炎症和氧化应激改善鱼精蛋白诱导的大鼠膀胱炎。
- 林斌董兴有赵江王亮龙州朱景振丁国林李龙坤
- 关键词：间质性膀胱炎鱼精蛋白膀胱炎
- 膀胱平滑肌自噬在环磷酰胺诱导的大鼠膀胱炎中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的 探讨膀胱平滑肌细胞是否存在自噬及其在环磷酰胺诱导的大鼠膀胱炎中的作用及意义.方法 30只SD大鼠完全随机法分为对照组和实验组（4 h组、48 h组、72 h组、96 h组）,每组6只.实验组腹腔给予环磷酰胺150 mg/kg处理,对照组腹腔给予等体积生理盐水0.6 ml处理.Western印迹检测膀胱肌层自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）、白细胞介素（IL）-6、IL-1β和肿瘤坏死因子（TNF）-α蛋白表达变化.LC3和平滑肌肌动蛋白α（α-SMA）免疫荧光双标膀胱平滑肌细胞自噬斑点共定位.透射电镜观察膀胱平滑肌细胞自噬小体.HE染色行膀胱病理组织评分.结果 电镜、免疫荧光双标以及Western 印迹证实实验组和对照组膀胱平滑肌细胞均存在自噬.Western印迹结果显示实验4 h组膀胱肌层LC3表达显著低于对照组（0.08±0.01比0.13±0.01,P〈0.05）;实验48、72及96 h组膀胱肌层LC3表达高于对照组（0.29±0.04比0.13±0.01,P〈0.05;0.23±0.03比0.13±0.01,P〈0.05;0.16±0.03比0.13±0.01,P〉0.05）,分别为对照组的2.19、1.75、1.20倍.电镜和免疫荧光双标的结果支持该变化趋势.此外,实验组膀胱肌层炎症因子（IL-6、IL-1β和TNF-α）以及膀胱病理组织评分均显著高于对照组（均P〈0.05）.结论 膀胱平滑肌细胞存在自噬.在环磷酰胺诱导的大鼠膀胱炎中膀胱平滑肌自噬的激活不充分,未能保护大鼠膀胱肌层.
- 赵江王亮杨星亮董兴有李龙坤宋波
- 关键词：自噬膀胱膀胱炎
- BK通道对大鼠膀胱Cajal间质细胞兴奋性的调控作用被引量：2
- 2014年
- 目的观察BK通道在大鼠膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)中的表达,探讨其对膀胱ICCs的调节功能。方法健康雌性清洁SD大鼠48只,Western blot和免疫荧光双标观测膀胱ICCs BK通道表达情况,膜片钳记录膀胱ICCs BK通道电流,激光共聚焦检测膀胱ICCs钙内流。结果膀胱ICCs表达起主要功能的BK通道α、β1亚基,记录到ICCs上BK通道外向电流。通道特异性阻断剂蝎毒素(IBTX)可明显抑制膀胱ICCs细胞BK电流,+80 mV下药物作用后相对电流由(23.627±3.897)pA降低为(3.603±1.885)pA(P<0.05)。IBTX可增加膀胱ICCs钙离子内流,胞内钙荧光强度(F1/F0)从(1.00±0.07)增加到(1.84±0.45),(P<0.05)。结论膀胱ICCs表达BK通道,阻断BK通道可增加膀胱ICCs的兴奋性。
- 白新宇董兴有王亮赵江赵滨王青青李龙坤
- 关键词：大电导钙激活钾通道膀胱膜片钳
- 乙酰半胱氨酸对硫酸鱼精蛋白诱导的大鼠膀胱炎的作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对硫酸鱼精蛋白(protamine sulfate,PS)诱导的大鼠膀胱炎的治疗作用及可能机制。方法雌性SD大鼠64只,按随机数字表法分为生理盐水灌注组(NS组)、硫酸鱼精蛋白灌注组(PS组)、NS+PS组、NAC+PS组,每组16只。NS组0.5 mL生理盐水灌入膀胱并在膀胱内保留30 min。PS组采用0.5 mL、30 mg/mL PS灌注大鼠膀胱,方法同NS组。NS+PS组和NAC+PS组大鼠在膀胱灌注PS前2 h,经腹腔注射0.5 mL NS或0.5 mL 300 mg/kg NAC溶液,灌注方法同NS组。各组大鼠每周处理3次,持续1个月。病理染色及膀胱湿质量检测分析大鼠膀胱炎症、水肿及肥大细胞浸润改变;尿动力学检测大鼠尿动力各项指标;Western blot法检测大鼠膀胱炎症因子IL-6和TNF-α表达。结果 NAC治疗组大鼠膀胱尿动力指标[收缩间歇(330.02±69.49)s]、膀胱黏膜损伤指数(1.37±0.91)及肥大细胞浸润计数(1.93±1.34)均优于PS灌注组尿动力指标[收缩间歇(161.32±58.17)s]、膀胱黏膜损伤指数(2.75±0.46)及肥大细胞浸润计数(3.40±2.19),Western blot法检测显示NAC治疗组较PS灌注组炎症因子IL-6和TNF-α表达也降低(P<0.01)。结论 NAC可显著改善PS诱导的大鼠膀胱炎,其机制可能是降低PS诱导的膀胱炎TNF-α和IL-6的表达,以及减少肥大细胞浸润。
- 王亮赵江董兴有杨星亮白新宇李龙坤
- 关键词：乙酰半胱氨酸硫酸鱼精蛋白膀胱炎间质性膀胱炎
- 静态尿道压力图对良性前列腺增生所致膀胱出口梗阻的诊断价值被引量：5
- 2014年
- 目的探讨静态尿道压力图(resting urethral pressure profile,RUPP)在评价良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasiat,BPH)所致的膀胱出口梗阻中的诊断价值。方法回顾性分析2011年8月至2013年8月内我院收治的119例BPH患者的尿动力学资料,依据压力流率同步测定结果分别分为无梗阻组、可疑梗阻组、梗阻组。分别比较3组间RUPP指标的差异,并通过多因素Logistic回归分析建立函数模型,运用受试者工作曲线(ROC曲线)分析比较回归模型及各个指标诊断膀胱出口梗阻(bladder outlet obstruction,BOO)的价值。结果梗阻组的膀胱颈压、精阜压、前列腺长度、功能曲线长度、前列腺平台面积均显著大于无梗阻组,而最大尿道压和最大尿道闭合压组间则无统计学差异;多元Logistic回归分析中,前列腺平台面积和精阜压进入模型,经ROC曲线比较,联合指标对于梗阻的诊断价值明显高于其他指标(AUC为0.968),而单一指标中则以前列腺平台面积(prostatic plateau area,PPA)的ROC曲线下面积最具诊断价值(AUC为0.893)。结论 RUPP参数可用于诊断BPH所致膀胱出口梗阻,且特别适用于不能进行压力-流率测定(pressure-uroflow studies,P/Q)患者尿道梗阻情况的评价,参数中回归模型的诊断效力最佳。
- 杨星亮赵江冯观贵于伟李龙坤
- 关键词：良性前列腺增生膀胱出口梗阻
- 过表达精子相关抗原9对前列腺癌细胞PC3生物学行为的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究精子相关抗原9(sperm-associated antigen 9,SPAG9)对前列腺癌细胞增殖、细胞周期、侵袭转移等生物学行为的影响,探讨可能的分子机制。方法前列腺细胞PC3中转染SPAG9后,qRT-PCR和Western blot检测转染后细胞SPAG9的表达变化;CCK-8检测SPAG9对PC3细胞增殖的影响;流式细胞术检测SPAG9对PC3细胞周期的作用;Transwell实验检测转染SPAG9对PC3细胞体外迁移能力的影响。结果 qRT-PCR检测结果表明SPAG9组的SPAG9的相对表达量(20.776 3±3.080 9)明显高于对照组(1.010 2±0.178 4)(P<0.01)。Western blot结果显示在前列腺癌细胞PC3中过表达SPAG9后成功。CCK-8实验表明SPAG9促进细胞增殖;流式细胞术检测结果表明过表达SPAG9使PC3细胞周期加快;在Transwell迁移实验中,SPAG9转染细胞后,SPAG9组穿膜细胞数为(88.078±4.509)/视野,对照组穿膜细胞数为(54.333±4.582)/视野,SPAG9组细胞迁移能力明显高于对照组(P<0.05)。结论 SPAG9促进前列腺癌细胞PC3的增殖、细胞周期及侵袭转移等生物学行为,并可能通过ERK和JNK信号通路发挥这些作用。
- 龙洲刘骞朱景振赵江董兴有冯观贵丁国林李龙坤
- 关键词：前列腺癌增殖细胞周期
- 肾造瘘管固定装置
- 本实用新型公开了一种肾造瘘管固定装置，包括固定盘和用于固定固定盘的固定结构，所述固定盘中心设置有固定孔，所述固定孔壁设置有气囊垫，还包括与气囊垫连通的充气囊，所述充气囊通过气囊管与气囊垫连通。该结构的肾造瘘管固定装置，具...
- 胡晓燕赵江李龙坤龚桂芝
- 文献传递
- 长链非编码RNA KCNQ1DN对尿源干细胞的干性调控研究被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨长链非编码RNA KCNQ1DN在尿源干细胞干性调控中的作用。方法:收集健康成人(n=6)尿液,提取尿源干细胞并传代培养,分别收集P3、P5和P7代尿源干细胞,并应用实时荧光定量PCR(RTPCR)检测KCNQ1DN基因表达水平。构建靶向干扰KCNQ1DN的慢病毒载体LV3-shKCNQ1DN,转染P2代尿源干细胞并培养96小时后荧光显微镜观察感染效率,RT-PCR检测KCNQ1DN的表达,CCK8法检测细胞的增殖,RT-PCR和Western blotting检测干性相关转录因子c-Myc、Nanog、Rex1的mRNA及蛋白的表达。结果:随着尿源干细胞传代代数的增加,KCNQ1DN的表达量逐渐升高(P<0.05)。shKCNQ1DN转染尿源干细胞后KCNQ1DN的表达显著降低(P<0.01),敲低尿源干细胞中KCNQ1DN的表达能够促进尿源干细胞的增殖并上调干性相关转录因子c-Myc、Nanog和Rex1mRNA及蛋白的表达。结论:随着尿源干细胞的生长,长链非编码RNA KCNQ1DN的表达逐步被激活,并对尿源干细胞的干性起到负性调控作用。
- 吴清剑陈伟杨帆方针强赵江王青青杨振兴张远宁李龙坤
- 关键词：干性长链非编码RNA
