谢伟
- 作品数:18 被引量:79H指数:6
- 供职机构:三峡大学更多>>
- 发文基金:宜昌市科技计划项目湖北省生物资源保护与利用重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 重组hGM-CSF在烟草中表达的研究
- 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)是一种具有多项潜能的造血生长因子,具有十分重要的临床应用价值,在国际生物技术制药市场上占有重要的位置。本研究根据已知的hGM-CSF序列设计引物,以质粒pBR322-hGM...
- 谢伟
- 关键词:转基因烟草KOZAK序列药用蛋白
- 文献传递
- 一种模拟黄土地区土壤侵蚀特性的实验装置与方法
- 本发明涉及一种模拟黄土地区土壤侵蚀特性的实验装置,它包括实验水槽,所述实验水槽铰接安装在支架的顶部,所述实验水槽上设置有进水口和出水口,所述实验水槽内部设置有土样盛放槽,所述土样盛放槽内部有实验土壤,所述实验水槽的一端设...
- 郑祥旺范勇陈国柱方芙蓉谢伟
- 文献传递
- 重组人粒细胞集落刺激因子在大肠杆菌中的表达(英文)被引量:3
- 2008年
- 背景:粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(human granulococyte-macrophage colony stimulating factor,hGM-CSF)是刺激造血前体细胞分化及增殖的细胞因子,同时在机体免疫调节过程中具有重要作用。大肠杆菌表达系统所具有的低成本、高产量等优点则是其他体系无法比拟的,因此仍是目前最常用的外源基因表达系统。目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子在大肠杆菌中的表达。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-02/06在三峡大学生物技术研究中心实验室完成。材料:质粒pBR322hGM-CSF购自美国ATCC菌种保藏中心。hGM-CSF抗体购自Sigma公司,IPTG、X-gal和载体pMGT-18,购自上海生物工程技术公司。方法:根据hGM-CSF基因序列设计出引物,以克隆载体质粒pBR322-hGM-CSF为模板,得到hGM-CSF基因并重组入原核表达载体pGEX-4T-1中,将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定并用Western bloting检测。主要观察指标:hGM-CSF在大肠杆菌中的表达。结果:SDS-PAGE显示,得到相对分子量为40500的目的蛋白,表达量可达菌体总蛋白的17.9%。Western bloting检测表明,抗hGM-CSF单抗可与相对分子量为40500大小的电泳条带发生特异性反应。结论:实验构建了原核表达载体pGEX-hGM-CSF,并在大肠杆菌中诱导表达,得到hGM-CSF融合蛋白。
- 谢伟乐超银王健刘敏何光源
- 关键词:重组人粒细胞集落刺激因子大肠杆菌原核表达
- 一种水动力自升降消落带湿地生态治理系统及其施工方法
- 本发明公开了一种水动力自升降消落带湿地生态治理系统及其施工方法,它包括升降导引装置,所述升降导引装置固定安装在边坡上,在升降导引装置上滑动配合安装有用于种植植物的植被种植载体,在植被种植载体的侧端面连接有用于消能的消能装...
- 方芙蓉夏栋郑祥旺潘昊谢伟王永华
- 5种中国兰花RAPD反应条件的优化被引量:11
- 2005年
- 以5种中国兰花为材料,提取了其叶片基因组DNA;以春兰叶片的基因组DNA为模板,优化了RAPD的反应条件。试验结果表明:春兰基因组DNA的最适扩增条件为,25μL体系,Taq酶0.08U/μL,dNTP240μmol/L,Mg2+1.2mmol/L,随机引物0.5μmol/L,模板DNA6.2ng/μL;反应因子低于最适值,会导致扩增带数减少甚至无带;但若高于最适值,则会出现带的弥散或缺失。
- 谢伟乐超银周艳林直何正权
- 关键词:中国兰花兰属植物观赏园艺基因组DNARAPD
- 重组人粒细胞集落刺激因子在大肠杆菌中表达的研究
- 2008年
- 谢伟乐超银郭政宏刘敏
- 关键词:重组人粒细胞集落刺激因子粒细胞巨噬细胞集落刺激因子大肠杆菌HGM-CSF造血生长因子机体免疫调节
- 一种重组葡激酶及其高效分泌表达的方法
- 一种葡萄球菌激酶及利用生物技术高效分泌表达重组葡萄球菌激酶的方法。它以金黄色葡萄球菌的总DNA为模板,通过PCR扩增,获得含信号肽的葡激酶(Sak)基因。该基因序列第33、34及36位氨基酸,不同于已报道的Sak基因。将...
- 乐超银刘敏郭政红谢伟梁薇姚伟梁宏伟陈发菊陈凡戴建武
- 文献传递
- 不同调控序列作用下GUS基因在烟草中瞬时表达活性被引量:3
- 2007年
- 以pBI121为出发质粒,利用烟草泛素启动子Ubi.U4、CaMV35S启动子以及Kozak序列构建4种GUS基因表达载体,通过叶盘转化法转化烟草叶片,检测瞬时表达活性,研究不同调控序列对外源基因表达的调控作用。结果表明:CaMV35S启动子附加Kozak序列后使GUS活性比独立使用CaMV35S提高了近2倍;双CaMV35S启动子附加Kozak序列驱动GUS基因的表达活性与单CaMV35S附加Kozak序列相当;烟草泛素启动子附加Kozak序列的表达活性为CaMV35S启动子附加Kozak序列的1.5倍;Ubi.U4-CaMV35S复合启动子附加Kozak序列驱动GUS基因表达水平最高,其表达效率是双CaMV35S启动子附加Kozak序列调控下GUS表达效率的3倍,为CaMV35S独立作用时的10倍。
- 谢伟乐超银郭政宏戴志鹏刘敏姚伟
- 关键词:KOZAK序列转基因烟草
- 香果树组织培养过程中遗传变异的RAPD分析被引量:9
- 2008年
- 用RAPD分子标记方法,从DNA水平上分析野生型香果树以及通过器官发生途径和体细胞胚胎发生途径得到的香果树再生植株以及体细胞胚胎发生过程中不同继代次数的培养物之间的遗传变异。筛选了100个随机引物,其中有75条随机引物能够扩增出条带,从中选取11个引物进行PCR扩增的结果显示:香果树体细胞胚胎无性系中有RAPD多态性位点,在胚性愈伤组织中也检测到少数RAPD变异位点。表明RAPD分子标记方法可以鉴定香果树组织培养过程中的遗传变异。
- 熊丹谢伟陈发菊梁宏伟王玉兵
- 关键词:香果树RAPD分析体细胞胚胎发生
- 兰花基因组DNA多态性RAPD分析被引量:15
- 2006年
- 利用随机扩增多态DNA技术(RAPD)对兰属的3个品种春兰、春剑、蕙兰进行了分析与研究,建立了它们之间的DNA指纹图谱,找到了参试样品的特征谱带,并探讨它们之间的亲缘关系。结果从20条BA系列引物中筛选出能稳定扩增的10个引物,且对3个品种的植株进行扩增,共扩增出257条,其中243条具有多态性,分析结果表明春剑与春兰的相似系数较之与蕙兰的相似系数要高。
- 谢伟乐超银郭政宏何正权梁薇梁宏伟姚伟
- 关键词:兰花随机扩增多态DNA技术