袁磊
- 作品数：23 被引量：19H指数：3
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项四川省科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 一株乙型脑炎病毒四川分离株的基因组序列分析
- 引言流行性乙型脑炎是由乙型脑炎病毒（JEV）引起的一种的人兽共患性疾病,其主要流行于亚洲及太平洋地区[1,2]。目前JEV是引起母猪繁殖障碍的主要病原之一,给我国养猪业带来了巨大的经济损失[3]。本研究对2012年从爆发...
- 石双艳袁磊曹三杰文心田黄小波文翼平伍锐
- 日本脑炎病毒基因Ⅰ型与Ⅲ型复合RT-PCR鉴别方法的建立被引量：2
- 2014年
- 为建立一种简单快捷的鉴别日本脑炎病毒(JEV)基因Ⅰ型与基因Ⅲ型的方法,根据基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV的保守序列,分别设计合成了针对基因Ⅰ型和Ⅲ型JEV的RT-PCR引物P1、P3和P2、P3,以JEV SA14-14-2和CZ1株的核酸提取液为模板,通过对反应体系及条件的优化,建立了一种可快速鉴别JEV基因Ⅰ型与Ⅲ型的复合RT-PCR方法,并用建立的方法对27份临床样品进行了检测。结果显示,以设计合成的引物进行复合RT-PCR扩增,得到与基因Ⅰ型JEV预期相符的381bp的特异性条带,得到与基因Ⅲ型JEV预期相符的550bp的特异性条带,而对猪瘟病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒及猪伪狂犬病病毒核酸的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果显示,该方法对基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV的最小检出量分别为1.0pg/μL和10pg/μL。利用建立的复合RT-PCR方法对27份临床样品进行检测,结果5份为基因Ⅰ型,2份为Ⅲ型,与核苷酸序列分析结果一致。结果表明,建立的复合RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、快速简便等特点,可用于检测及鉴别基因Ⅰ型与基因Ⅲ型JEV。
- 张亮刘澣扬石双艳袁磊伍锐黄小波文翼平文心田曹三杰
- 关键词：日本脑炎病毒复合RT-PCR
- 日本脑炎病毒基因Ⅰ型和Ⅲ型复合RT-PCR鉴别方法的建立
- 为建立一种简单快捷的鉴别日本脑炎病毒(JEV)基因Ⅰ型和基因Ⅲ型的方法,本研究根据基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV的保守序列,分别设计合成了针对基因Ⅰ型和Ⅲ型JEV的RT-PCR引物P1/P3和P2/P3,以JEV SA14-1...
- 张亮刘澣扬石双艳袁磊伍锐黄小波文翼平文心田曹三杰
- 文献传递
- 2株乙型脑炎病毒的E基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2012年
- 目的对2009年分离自四川省崇州与内江地区的2株乙型脑炎病毒的E基因进行序列测定与分析,了解其序列特征与遗传变异情况。方法采集猪场流产死胎脑组织与蚊虫样品12份,用BHK-21细胞分离培养出2株乙型脑炎病毒,命名为JEV-CZ1株和JEV-NJ1株。针对乙脑疫苗株SA14-14-2基因组252-2509区段设计1对引物,扩增出分离株主要抗原基因E基因并测序,与不同国家及地区的乙脑毒株进行E基因核酸序列及推导氨基酸序列的同源性比较与进化树分析。结果测序分析的E蛋白基因片段长1 500bp,编码500个氨基端残基。JEV-CZ1株与广泛使用的减毒疫苗株SA14-14-2的E基因核酸序列与推导氨基酸序列的同源性分别为87.6%和97.2%,JEV-NJ1株与SA14-14-2株的E基因核酸与氨基酸序列的同源性分别为99.5%与99.2%。JEV-CZ1株与疫苗株SA14-14-2株在E蛋白3个结构域中有15个氨基酸的差异,JEV-NJ1株有3处差异。其中JEV-CZ1株在E138位的氨基酸为Glu,符合强毒特征。通过基因遗传进化分型显示,JEV-CZ1株为基因Ⅰ型,JEV-NJ1株为基因Ⅲ型,且2株病毒与以往四川分离的毒株遗传关系较近。结论此次研究的分离株具有较强的地域性,遗传变异不大,且与疫苗株有较高的同源性。
- 黄小波袁磊王伟杰贾静文心田曹三杰
- 关键词：乙型脑炎病毒E基因氨基酸序列遗传进化分析
- 四川两株乙型脑炎病毒的PrM/E基因的克隆与序列分析
- 本研究于2009年7月至9月从四川地区规模化猪场采集了猪脑组织与库蚊样品共12份,利用细胞培养的方法从采自四川崇州与内江地区的样品中分离得到两株乙型脑炎病毒,分别命名为JEV-CZ1株和JEV-NJ1株。设计1对特异性引...
- 袁磊王伟杰曹三杰黄小波贾静文翼平文心田
- 关键词：乙型脑炎病毒遗传进化分析
- 文献传递
- 一种高滴度基因I型猪乙型脑炎病毒毒株及其用途
- 本发明涉及一种基因I型乙型脑炎病毒毒株，其特征在于：它是由中国典型培养物保藏中心保藏的保藏号为CCTCC？NO:V201526的毒株。本发明还公开了一种基因Ⅰ型乙型脑炎疫苗。本发明基因I型乙型脑炎病毒毒株，其生长滴度高，...
- 曹三杰文心田伍锐岳辉喜黄小波文翼平袁磊刘瀚扬刘洪明田耕
- 文献传递
- 一种乙脑假病毒及其制备方法
- 本发明公开了一种重组载体，它是中国典型培养物保藏中心保藏的保藏号为CCTCC？NO：M2015570的重组菌DH5α/pcDNA3.1-SPME携带的重组质粒pcDNA3.1-SPME。本发明还公开了一种制备乙脑假病毒的...
- 曹三杰文心田刘瀚扬伍锐黄小波文翼平袁磊冯瑶周玉鹏曹玉琴
- 文献传递
- 乙脑E基因和猪IL-6基因重组腺病毒的构建与初步免疫研究
- 引言日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是通过蚊媒传染的黄病毒属病毒。目前JEV是引起母猪繁殖障碍的主要病原之一,给我国养猪业带来了巨大的经济损失。研究显示IL-6能增加免疫...
- 刘瀚扬刘凯田耕周玉鹏袁磊文心田曹三杰黄小波文翼平伍锐
- 文献传递
- 信号肽影响日本乙型脑炎假型病毒包装效果及感染能力的研究
- 猪乙型脑炎病毒(JEV)是一种人畜共患的虫媒病毒,具有传染性和危险性,研究这类病毒需要一种安全的研究代替工具,假型病毒技术为解决这些问题提供了一种有效的研究手段。为了构建1种高包装滴度的JEV假型病毒,我们设计并包装出了...
- 刘瀚扬曹三杰伍锐袁磊刘洪明冯瑶曹玉琴田耕周玉鹏黄小波文翼平文心田
- 关键词：信号肽日本乙型脑炎假病毒
- 文献传递
- 基因Ⅰ型和基因Ⅲ型日本脑炎病毒RT-LAMP鉴别检测方法的建立被引量：7
- 2016年
- 为建立一种快速、灵敏、特异的鉴别基因Ⅰ型和基因Ⅲ型日本脑炎病毒(JEV)的反转录-环介导等温扩增方法,根据Gen Bank中登录的基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV毒株基因序列,分别设计了1套基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP引物,并以此引物分别建立了基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP方法。结果显示,基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP方法均能在1 h内完成对相应基因型JEV RNA的扩增,并与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒和伪狂犬病病毒无交叉反应。灵敏性试验结果显示,基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV特异性RT-LAMP方法均能扩增出24 copies的JEV RNA。本研究建立的基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV特异性RT-LAMP检测方法具有灵敏性高、特异性好、简便、快速的特点,能够快速对JEV进行检测及基因Ⅰ型和基因Ⅲ型的鉴别,具有广泛的应用价值。
- 周玉鹏张亮伍锐文心田刘瀚扬袁磊田耕黄小波文翼平曹三杰
- 关键词：日本脑炎病毒
