罗文萍 作品数:13 被引量:17 H指数:3 供职机构: 重庆医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市教育委员会科学技术研究项目 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
γ-氨基丁酸在围植入期小鼠子宫的含量及其意义 被引量:3 2012年 目的:通过检测γ-氨基丁酸(GABA)在围植入期第1日到第8日小鼠子宫的含量;并腹腔注射GABA,探讨其在围植入期小鼠子宫中的含量变化及对子宫蜕膜化的影响。方法:比色法检测妊娠小鼠第1日到第8日子宫中GABA含量;并于妊娠第5日开始腹腔注射GABA,浓度分别为0.05、0.5、5g/kg,每日1次,至第8日时称重蜕膜鼓包及石蜡切片后行HE染色,测量蜕膜化区域面积。结果:与第1日比较,第3日中GA-BA含量上调(P<0.05),第4日时出现下降趋势,却在第5日植入位点处出现最大值(P<0.01),且第6到8日的非植入位点处GABA含量显著高于植入位点;体内实验发现,0.05g/kgGABA及5g/kg GABA可显著减少蜕膜鼓包数量,0.5g/kgGABA可显著降低蜕膜鼓包重量。同时,0.05g/kg GABA及0.5g/kg GABA可显著减少蜕膜化区域面积。结论:γ-氨基丁酸含量在围植入期小鼠子宫中呈现动态变化,并可能参与抑制妊娠小鼠子宫蜕膜化。 罗文萍 赵海 刘真真 谭冬梅 谭毅关键词:Γ-氨基丁酸 比色法 蜕膜 骨形态发生蛋白-7(BMP-7)促进小鼠子宫内膜蜕膜化研究 2010年 目的:探讨骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)在子宫内膜蜕膜化过程中的作用。方法:①采用RT-PCR和免疫组织化学技术分别观察BMP-7的mRNA和蛋白在妊娠第5~8日小鼠子宫中的表达情况;②原代培养小鼠子宫基质细胞,用孕酮(P4)、E2和cAMP诱导蜕膜化的同时分别加入1ng/ml、10ng/ml、100ng/mlBMP-7重组腺病毒,Westernblotting检测催乳素(PRL)的表达。结果:①BMP-7mRNA在妊娠第5~8日小鼠子宫着床位点的表达高于着床旁组织(P<0.01),且在着床点的表达随着妊娠天数的增加逐渐增强(P<0.05)。BMP-7蛋白在妊娠第5日、第6日分别表达于植入胚胎周围的基质细胞和初级蜕膜带,第7日、第8日时主要表达于次级蜕膜带以及植入位点系膜侧基质细胞。②在小鼠子宫基质细胞的蜕膜化过程中,BMP-7重组腺病毒组的催乳素蛋白表达均显著增加(P<0.01),其中10ng/ml组增加最明显(P<0.01)。结论:BMP-7蛋白具有促进小鼠子宫内膜蜕膜化的效应。 徐倩 谭毅 张倩 罗文萍 谭冬梅关键词:小鼠 子宫内膜 蜕膜化 BMP9作为下颌下腺损伤修复治疗靶点的应用 本发明属于生物医学技术领域,公开了BMP9作为靶标在筛选治疗下颌下腺损伤的药物中的应用,还公开了试剂在制备下颌下腺损伤修复治疗药物中的应用,所述试剂促进BMP9表达。本发明研究通过体内给予Ad‑BMP9用以增强BMP9信... 罗文萍 赵天宇 程倩钰γ-氨基丁酸通过其A型受体参与小鼠胎盘血管的形成研究 被引量:1 2014年 目的探讨不同浓度的γ-氨基丁酸 (γ-aminobutyric acid,GABA) A型受体激动剂/抑制剂对小鼠胎盘形成的影响。 方法 免疫组化检测孕鼠中晚期胎盘中GABA的A型受体(GABAAR)π亚基(GABRP)的表达规律。将昆明孕鼠分为8组,每组3只,处理组从妊娠第7~13天分别腹腔注射0.009 5、 0.095 mg/kg及0.95 mg/kg A型受体激动剂和0.018 4、0.184 mg/kg 及1.84 mg/kg的A型受体抑制剂溶液,对照组注射生理盐水,空白组不作任何处理。第14天时称量各组胎盘和胚胎,HE染色观察胎盘形态学变化,检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)表达情况。结果 GABRP强表达于孕鼠第10~17天的母胎蜕膜区;与对照组比较,0.95 mg/kg GABAAR激动剂组蜕膜区血管数量和胎盘迷路区胎儿有核红细胞的数量显著增加(P〈0.05),同时迷路区PCNA和VEGF的表达显著增加(P〈0.05);1.84 mg/kg GABAAR抑制剂组胎盘和胚胎的质量显著降低(P〈0.05),同时迷路区PCNA和VEGF表达均降低。结论 GABA可能通过与其A型受体结合参与调节小鼠胎盘增殖和血管的生成过程。 赵海 马婧 卢俊杰 谭冬梅 张倩 罗文萍 谭毅关键词:Γ-氨基丁酸 蜕膜化 胎盘 MK基因对小鼠子宫基质细胞蜕膜化进程的影响 被引量:1 2011年 为探索肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)的死亡受体(mouse killer,MK)对小鼠子宫基质细胞蜕膜化进程的影响,构建MK基因过表达和siRNA干扰重组腺病毒.原代培养的小鼠子宫基质细胞感染MK过表达或者干扰重组腺病毒并诱导蜕膜化,72 h后用免疫细胞化学与流式细胞术分别检测蜕膜细胞的标志物催乳素(prolactin,PRL)与蜕膜细胞凋亡率的变化情况.妊娠d4小鼠子宫角注射MK重组腺病毒,观察胚胎植入点的数量变化.实验结果表明,与对照组相比,在诱导的蜕膜细胞中过表达MK使得催乳素的含量显著降低(P<0.05),同时,蜕膜细胞的凋亡率明显升高(P<0.05),而siRNA干扰之后催乳素的含量显著升高,凋亡率明显下降(P<0.05),但是,宫角注射MK基因过表达和siRNA干扰重组腺病毒之后,胚胎植入数量均显著减少(P<0.01).提示MK基因通过参与小鼠子宫内膜基质细胞的蜕膜化进程,调节蜕膜细胞增殖与凋亡之间的平衡从而影响胚胎的植入. 杨根岭 罗文萍 刘真真 谭冬梅 王应雄 谭毅关键词:蜕膜化 胚胎植入 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因抑制小鼠子宫基质细胞的蜕膜化 被引量:6 2010年 为了观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因对体外培养的小鼠蜕膜基质细胞增殖及凋亡的作用,探讨TRAIL对小鼠子宫蜕膜化进程的影响,构建TRAIL过表达及干扰质粒,转染小鼠基质细胞后诱导蜕膜化发生.转染72h后,应用半定量RT-PCR和Western blotting检测蜕膜基质细胞中TRAILmRNA和蛋白质的表达情况、MTT法观察蜕膜基质细胞的生长和增殖能力、流式细胞术检测蜕膜基质细胞的细胞周期分布情况和凋亡率.经酶切和核苷酸测序证实,TRAIL基因正确克隆入真核表达载体且能够上调TRAIL的表达,干扰质粒能有效地抑制TRAIL基因的表达.TRAIL过表达和RNA干扰的结果表明:TRAIL具有将蜕膜基质细胞阻滞在G0/G1期、抑制蜕膜基质细胞增殖并促使其凋亡的功效,提示TRAIL可能参与调节胚胎植入后基质细胞的有序蜕膜化进程. 张晋平 罗文萍 张倩 彭洪英 谭冬梅 王应雄 谭毅关键词:蜕膜化 γ-氨基丁酸(GABA)及其A型受体π亚基在植入前小鼠子宫的动态表达 被引量:3 2011年 目的:探讨γ-氨基丁酸(GABA)及其A型受体π亚基在胚胎植入中的作用。方法:①Real-time PCR方法检测π亚基mRNA在妊娠小鼠第1 ̄5日子宫组织的表达变化。②免疫组织化学方法检测GABA和π亚基在妊娠小鼠第1日、第4日子宫组织的表达。结果:①π亚基mRNA在妊娠小鼠第1 ̄5日子宫组织均有表达,并随妊娠进程逐渐降低,第1日、第2日表达较强,第3日开始下降,第4日、第5日显著下降(P<0.01),且第5日植入位点组织明显低于植入位点旁组织(P<0.01);②GABA和π亚基蛋白在妊娠第1日、第4日小鼠子宫内膜均有表达,第4日时在腔上皮的表达降低,而在基质细胞的表达升高;③第1日时,π亚基蛋白在子宫肌层有表达,但第4日时却不再表达。结论:①GABA和π亚基可能参与调节小鼠植入前期子宫内膜的容受性改变;②π亚基可能还参与植入前期子宫肌肉收缩,调节胚胎在子宫的空间分布。 刘真真 罗文萍 谭冬梅 谭毅关键词:子宫 γ-氨基丁酸信号对小鼠胎盘早中期建立的影响 被引量:2 2012年 为了观察γ-氨基丁酸B型受体R1亚基(GABAB1R,GB1)在妊娠小鼠第1天至第8天(D1~D8)子宫中的表达规律,探讨γ-氨基丁酸(GABA)信号是否参与了胎盘早中期建立.应用半定量RT-PCR、免疫组织化学及Western blotting检测GB1在妊娠小鼠D1~D8子宫中的表达情况,原代分离D8.5的绒毛膜锥(EPCs)及蜕膜细胞,检测GABA及GABA B型受体激动剂baclofen、拮抗剂2-hydroxysaclofen对EPCs黏附及外延生长以及对蜕膜细胞侵袭能力的影响.D8时体内注射0.05 g/kg、0.5 g/kg及5 g/kg的GABA,于D14收集胎盘,制作石蜡切片.结果显示,GB1 mRNA及蛋白动态表达于D1~D8子宫.100μmol/L GABA及5μmol/L Baclofen促进EPCs的外延生长,抑制蜕膜细胞的侵袭,同时,20μmol/L 2-hydroxysaclofen成功逆转GABA对EPCs及蜕膜细胞的侵袭调节作用.5 g/kg的GABA可导致D14小鼠胎盘的迷路层滋养层细胞增多,母鼠血窦及胎鼠血管减少或发育不良,海绵滋养层的细胞滋养层细胞变小,糖原细胞减少或消失.结果提示,在小鼠早中期胎盘建立过程中,GABA信号促进滋养层侵袭至母体蜕膜组织,而抑制蜕膜细胞积极主动的侵袭行为,并可损害胎盘的结构. 罗文萍 谭冬梅 杨根岭 卢俊杰 赵海 谭毅关键词:蜕膜细胞 胎盘 γ-氨基丁酸信号在JAR细胞中的表达及对细胞侵袭能力的影响 2012年 目的:本文通过研究γ-氨基丁酸(GABA)及其受体GABRP、GABAB1R在滋养层细胞株JAR中的表达,采用Transwell模型,给予GABA受体的激动剂和拮抗剂干预,探讨其对JAR细胞侵袭能力的影响。方法:免疫细胞化学,RT-PCR,Western blot方法检测GABA、GABRP、GABAB1R滋养层细胞株JAR中的表达;Matri-gel细胞侵袭模型检测GABA、GABAAR,GAB-ABR激动剂和拮抗剂对JAR细胞侵袭能力的影响。结果:GABA、GABRP、GABAB1R在细胞株JAR均有表达;GABAA受体激动剂促进JAR细胞的侵袭,而GABAB受体激动剂抑制JAR细胞的侵袭。结论:在滋养层细胞株JAR中,GA-BA信号可能调节细胞的侵袭能力,从而参与滋养细胞相关妊娠疾病的发生发展。 罗文萍 刘真真 彭洪英 谭冬梅 赵海 谭毅关键词:JAR细胞 Γ-氨基丁酸 CD82/KAI1在神经胶质瘤细胞株中的表达及对细胞迁移能力的影响 被引量:2 2010年 目的研究CD82/KAI1在胶质瘤CHG-5及U251细胞株的表达及意义。方法 RT-PCR、免疫细胞化学、免疫荧光检测CHG-5及U251细胞中CD82/KAI1的表达;分别设立1:100、1:200CD82/KAI1抗体干预组和空白对照组,通过划痕实验对CD82/KAI1对细胞迁移能力的影响进行分析。结果①U251细胞中CD82/KAI1的mRNA表达高于CHG-5细胞(P<0.01);U251细胞中CD82/KAI1的蛋白水平表达高于CHG-5细胞(P<0.01)。②CD82/KAI1抗体干预组迁移细胞数量均显著高于对照组(P<0.05),且迁移细胞数量随抗体浓度升高而增加(P<0.05)。结论 CD82/KAI1在恶性胶质瘤细胞株中表达,且在U251细胞中表达较CHG-5细胞高。CD82/KAI1可抑制胶质瘤U251细胞的迁移。 陈亮 罗文萍 钟东 王亮 唐兆华 杨刚 唐文渊关键词:U251细胞 神经胶质瘤