白方方
- 作品数:67 被引量:157H指数:8
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- 一种猪肺炎支原体多重组抗原ELISA检测试剂盒
- 本发明属于卫生检验领域,公开了一种猪肺炎支原体多重组抗原ELISA检测试剂盒,试剂盒中设有:多重组抗原包被的ELISA板,酶结合物工作液,阳性对照血清,阴性对照血清,样品稀释液,二抗稀释液,10×浓缩洗涤液,显色液A,显...
- 刘茂军杜改梅邵国青韦艳娜冯志新白方方熊祺琰
- 文献传递
- 猪肺炎支原体P216基因片段的表达及黏附活性研究被引量:4
- 2012年
- 本研究旨在研究猪肺炎支原体P216蛋白的黏附活性并初步建立猪肺炎支原体蛋白黏附模型。根据软件分析和文献报道从P216全基因中选取亲水性、抗原性、黏附性较好的目的片段,利用PCR从Mhp NJ株扩增P216基因片段,克隆到表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒pET-32a(+)/P216,经IPTG诱导获得重组蛋白,通过Western blot和间接免疫荧光试验检测重组蛋白的免疫原性及黏附活性。结果表明,PCR扩增的目的基因大小为l 636bp;SDS-PAGE检测重组蛋白相对分子质量为80.1ku;Western blot检测表明重组蛋白能与Mhp阳性血清发生特异性反应;间接免疫荧光试验表明该蛋白对猪肺炎支原体黏附SJPL细胞产生占位抑制作用。结果提示,P216蛋白具有良好的黏附活性,能黏附SJPL细胞,从而为猪肺炎支原体其他黏附因子的研究奠定基础。
- 杜海霞刘茂军冯志新熊祺琰白方方王海燕邵国青
- 关键词:猪肺炎支原体黏附活性
- 猪肺炎支原体DnaK蛋白质单抗的制备与鉴定被引量:1
- 2012年
- 为了获得针对猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)DnaK蛋白质的单克隆抗体,利用Mhp全菌抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备Mhp DnaK蛋白质的单抗。获得了3株可稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3A8、3E2及5D10。3株单抗的Ig重链均为IgG1,轻链均为κ链。Western Blot分析结果显示,3A8与猪鼻支原体和Mhp均有反应,3E2和5D10只与Mhp反应,同时3E2和5D10能与Mhp 168株105代、J株、临床分离株XLW-1、XLW-2、XLW-3、XLW-4、AH、WX产生特异性反应。采用间接ELISA测得3株单抗腹水与DnaK重组蛋白质及Mhp 168全菌蛋白质反应效价均为1∶1 000 000。单抗3A8为针对Mhp和猪鼻支原体(Mycoplasmahyorhinitis,Mhr)共同抗原表位的单抗;3E2和5D10为猪肺炎支原体特异性抗体,且抗体效价高。
- 缪芬芳王海燕白昀刘茂军冯志新熊祺琰白方方邵国青
- 关键词:猪肺炎支原体单克隆抗体
- 猪支原体肺炎疫苗株的应用
- 本发明一种猪支原体肺炎疫苗株在制备治疗猪支原体肺炎药物中的应用;其中,所述的猪支原体肺炎疫苗株,其分类命名为猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae),菌株号为NJ,已保藏于中国典型培养物保藏中心,...
- 刘茂军邵国青熊祺琰冯志新甘源韦艳娜白方方吴叙苏王占伟白昀王海燕王丽刘冬霞马庆红
- 文献传递
- 实时荧光定量检测猪鼻支原体的引物和探针
- 本发明涉及一种实时荧光定量检测猪鼻支原体的引物和探针,特别是用于猪鼻支原体的实时荧光定量PCR检测,属于生物技术领域。确定以猪鼻支原体P37基因保守区序列作为扩增靶序列,设计合成一对特异性引物和一条分子信标探针应用于猪鼻...
- 白方方邵国青武昱孜刘茂军冯志新熊祺琰
- 文献传递
- 集成联合用药、隔离早期断奶(SEW)和“三点式”生产体系培育猪气喘病阴性群被引量:8
- 2014年
- 为探索猪肺炎支原体阴性群的培育方法,本试验研究了集成联合用药、SEW和"三点式"饲养管理体系等技术对猪肺炎支原体的净化效果。先通过妊娠母猪的筛选,母猪程序性用药,SEW技术,屏障隔离系统,"三点式"生产饲养管理体系及仔猪程序性用药的培育方法,再通过猪肺炎支原体血清抗体检测和荧光定量PCR检测鼻拭子的方法对所培育的仔猪进行长达4个月的监测,结果发现新培育的5批猪在35日龄后血清抗体均为阴性,鼻拭子抗原检测全为阴性。结果表明集成联合用药、SEW和"三点式"生产管理体系技术可以有效净化猪肺炎支原体,为国内猪气喘病的控制和净化提供理论基础及临床实践经验。
- 甘源华利忠熊祺琰马庆红徐飞扬刘茂军杜改梅武昱孜韦艳娜冯志新王海燕白方方邵国青
- 关键词:SEW早期断奶药物净化
- 猪支原体肺炎疫苗专用稀释剂及其制备方法
- 本发明的猪支原体肺炎疫苗专用稀释剂,主要含重组P97R1蛋白免疫刺激复合物(ISCOM-P97R1),此外还可能含有其他水性佐剂成分,包括左旋咪唑、或/和黄芪多糖、或/和卡波姆。所述稀释剂的每ml溶液中含有QuilA0....
- 熊祺琰邵国青韦艳娜刘茂军冯志新白方方
- 文献传递
- 一种猪支原体肺炎减毒活疫苗及其应用
- 本发明公开了一种猪支原体肺炎减毒活疫苗及其应用,本发明筛选具有典型猪肺炎支原体感染同时无明显其他病原感染的猪肺脏病料,利用乳兔肺继代传至100代,然后分离猪肺炎支原体菌株,利用培养基进行连续传代,同时通过多个菌株的筛选获...
- 邵国青熊祺琰刘茂军冯志新韦艳娜王海燕白方方甘源王丽张道华刘冬霞华利忠武昱孜白昀王占伟
- 文献传递
- 一种猪肺炎支原体多重组抗原ELISA检测试剂盒
- 本发明属于卫生检验领域,公开了一种猪肺炎支原体多重组抗原ELISA检测试剂盒,试剂盒中设有:多重组抗原包被的ELISA板,酶结合物工作液,阳性对照血清,阴性对照血清,样品稀释液,二抗稀释液,10×浓缩洗涤液,显色液A,显...
- 刘茂军杜改梅邵国青韦艳娜冯志新白方方熊祺琰
- 文献传递
- PCR技术检测猪肺炎支原体的研究进展被引量:17
- 2012年
- 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶基因、临床样品采集方法与样品DNA处理方法、关键技术因素及普通PCR技术、多重PCR技术、套式PCR技术、荧光定量PCR技术、芯片检测和环介导等温扩增技术等在猪肺炎支原体检测中的研究进展、主要优缺点及应用进行综述。
- 张旭白方方武昱孜刘茂军冯志新熊祺琰张映邵国青
- 关键词:猪支原体肺炎猪肺炎支原体PCR检测