由江峰
- 作品数:120 被引量:772H指数:17
- 供职机构:北京大学基础医学院生理学与病理生理学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划教育部科学技术研究重大项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 自泌性白细胞介素-6对人肺巨细胞癌系PG生长的刺激作用被引量:1
- 1997年
- 目的探讨白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人肺巨细胞癌系PG生长的影响。方法应用逆转录PCR技术,Northern杂交方法分析IL-6及其受体基因表达;应用生物活性检测方法测定IL-6分泌;应用抗IL-6中和抗体鉴定IL-6对PG细胞生长的作用。结果PG细胞表达IL-6受体,重组人IL-6刺激PG细胞增殖;PG细胞表达IL-6且产生有生物活性的IL-6,抗IL-6抗体可特异性地抑制PG细胞生长。结论IL-6为PG细胞自泌性生长刺激因子。
- 付坚郑杰方伟岗吴秉铨曾灵芳由江峰王洁良崔湘林
- 关键词:肺肿瘤白细胞介素-6
- 鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因的筛选及其对转移性前列腺癌细胞生物学行为的影响被引量:2
- 2010年
- 目的筛选肿瘤转移相关新基因,探讨鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因(PAG1)转染对人前列腺癌细胞系PC-3M的高转移亚系PC-3M-1E8体外生物学行为的影响。方法利用PC-3M高转移亚系PC-3M-1E8、低转移亚系PC-3M-284,人肺巨细胞癌细胞系(PG)高转移亚系PG—BE1和低转移亚系PG—LH7cDNA制作4张基因芯片,筛选出PC-3M和PG高、低转移亚系共同差异表达基因。对在两个转移亚系共同表达下调的PAG1基因做进一步研究,采用即时定量PCR及Westernblot验证PAG1在PC-3M细胞系中的表达。构建pcDNA3.0-PAG1真核表达载体,稳定转染PC-3M-1E8细胞。MTT比色实验及软琼脂集落形成实验检测肿瘤细胞体外增殖能力;流式细胞术检测肿瘤细胞周期及凋亡;Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力。结果基因芯片初步筛选出PC-3M高、低转移亚系差异表达基因共327个,上调基因123个,下调基因204个。PG高、低转移亚系差异表达基因共281个,上调基因167个,下调基因114个。PC-3M与PG高转移亚系共同表达下调基因9个、上调基因8个。即时定量PCR及Westernblot证实PAG1在PC-3M高转移亚系中表达低于低转移亚系。MTT比色及软琼脂集落形成实验显示转染pcDNA3.0-PAG1组细胞增殖速度明显低于转染空载体组和未转染组(均P〈0.05)。细胞周期检测转染pcDNA3.0-PAG1组比转染空载体组和未转染组处于G0~G,期的细胞百分数明显增加(P〈0.05)。转染pcDNA3.0-PAG1组与转染空载体组和未转染组相比凋亡细胞百分率无显著差异(P〉0.05)。体外穿膜侵袭实验结果表明转染pcDNA3.0-PAG1组比转染空载体组和未转染组穿膜细胞数目明显减少,分别为(35.1±4.9)、(127.6±6.6)和(135.0±5.0)个(P〈0.05)。结论利用同一母系来源的高、低转移亚系制作基因芯片可以摒除转移无关基因的干扰,筛选出差异表
- 于文娟王曰伟谢志刚由江峰王洁良崔湘琳裴斐郑杰
- 关键词:肿瘤标记生物学寡核苷酸序列分析
- 液泡型ATP酶C亚基ATP6V0C在人前列腺癌细胞系中的表达及其意义
- 2013年
- 目的探讨液泡型ATP酶C亚基ATP6V0C在不同转移潜能人前列腺癌细胞系中的表达及其意义。方法采用半定量RT-PCR、荧光实时定量RT-PCR和Western blot法检测ATP6V0C在人不同转移潜能前列腺癌细胞系PC-3M-1E8、PC-3M(高转移潜能)和PC-3M-2B4、PC-3(低转移潜能)中的表达。结果 ATP6V0C在PC-3M-1E8、PC-3M细胞系中的mRNA及蛋白表达量均明显高于在PC-3M-2B4、PC-3细胞系中的表达,其中,ATP6V0C在PC-3M-1E8中的表达最高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 ATP6V0C在高转移潜能人前列腺癌细胞系中的表达明显高于低转移潜能人前列腺癌细胞系,证明其和肿瘤的转移密切相关,有可能成为判断人前列腺癌侵袭和转移的重要指标及治疗前列腺癌的新靶点。
- 邹鹏程徐晓艳张梦雪由江峰裴斐
- 关键词:前列腺肿瘤
- 肺癌MDM2蛋白表达与p53基因突变的关系被引量:2
- 1998年
- 目的:研究肺癌MDM2蛋白表达与p53突变之间的关系。方法:用免疫组化检测125例肺癌p53和MDM2蛋白表达,以聚合酶链反应单链构象多态性(PCRSSCP)方法检测p53基因第5~8外显子的突变。结果:PCRSSCP检测阳性的52例肺癌MDM2阳性率为19.2%;而阴性的73例肺癌MDM2蛋白阳性率为35.6%。统计学检验显示肺癌MDM2蛋白表达与p53突变之间呈负相关(χ2=3.98,P<0.05);MDM2蛋白阳性与肺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、分化程度、临床分期和p53蛋白表达无显著相关性。
- 张骏郑杰方伟岗李红梅由江峰王洁良吴秉铨
- 关键词:MDM2蛋白肺肿瘤P53基因基因突变
- 可调控型反义基质金属蛋白酶9表达抑制人黑色素瘤细胞侵袭转移表型的研究被引量:13
- 2003年
- 目的 探讨基质金属蛋白酶 (MMP) 9与肿瘤转移的相关性。方法 利用基因重组技术构建反义MMP 9cDNA四环素可调控型表达载体 ,用脂质体法转染反义MMP 9至转移性人黑色素瘤细胞株WM4 5 1(高表达MMP 9)。检测转染后细胞MMP 9表达水平的改变以及体外生长、侵袭、裸鼠体内成瘤及自发转移能力的变化。结果 转染反义基因后 ,WM4 5 1细胞MMP 9的表达及活性明显下降 ,同时MMP 2的表达也受到一定抑制 ,细胞生长速度、体外侵袭能力及裸鼠体内成瘤性及自发转移能力均受到一定程度抑制 ;运用四环素可以抑制四环素负调控逆转录病毒载体上的外源基因的表达。结论 反义MMP 9基因下调MMP 9的表达 ,可使人黑色素细胞转移能力受到一定程度的抑制 ,说明MMP 9在人黑色素瘤细胞转移过程中起重要作用。同时 。
- 孔灵玲方伟岗由江峰钟镐镐郑杰
- 关键词:黑色素瘤肿瘤转移
- 金属蛋白酶MMP-9反义cDNA基因对高转移性人肺巨细胞癌系的转染效应被引量:10
- 1999年
- 已研究发现基质金属蛋白酶(matrixmetaloproteinases,MMPs)表达,与恶性肿瘤的侵袭转移表型呈正相关,故抑制MMPs可望抑制癌细胞的侵袭和转移。本研究拟应用MMP9反义cDNA转染,通过直接阻断MMPsmRNA转录和蛋白表达,...
- 谢建武方伟岗李红梅由江峰由江峰郑杰钟镐镐吴秉铨
- 关键词:金属蛋白酶CDNA基因
- RNA沉默LASS2/TMSG1基因促进人前列腺癌细胞侵袭和转移的分子机制被引量:4
- 2014年
- 目的探讨LASS2/TMSGl基因沉默对人前列腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响及其分子作用机制。方法建立稳定表达LASS2/TMSGl-shRNA的低转移潜能人前列腺癌PC-3M-2134细胞系,然后采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)掺人实验、软琼脂集落形成实验、流式细胞术、Matrigel穿膜侵袭实验和裸鼠体内成瘤实验研究LASS2/TMSGl的细胞生物学功能;采用Westernblot法、明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2和9(MMP.2和MMP-9)的表达、分泌及活性;并采用V—ATPase活性检测试剂盒检测细胞内V—ATPase活性,以及采用BCECFH+敏感荧光探针检测细胞外H+浓度以研究LASS2/TMSGl抑制前列腺癌转移的分子作用机制。结果转染LASS2/TMSGl-shRNA后,PC-3M-284细胞的增殖能力、锚定不依赖生长能力及体外侵袭能力明显提高(P〈0.05),而细胞凋亡率明显下降(P〈0.01),但对细胞周期无影响(P〉0.05);LASS2/TMSGl基因沉默组移植瘤的体积、质量及淋巴结转移率(5/6)和核增殖指数(0.53±0.05)明显大于空白对照组(0/6,0.13±0.02)和无关阴性对照组(1/6,0.10±0.03;P〈0.05);LASS2/TMSGl基因沉默组的V—ATPase酶活性(P〈0.01)及细胞外H’浓度明显升高(P〈0.01),而MMP-2及MMP-9的表达量和分泌量无明显变化(P〉0.05),但分泌的MMP-2和MMP-9活性增加(P〈0.05)。结论特异性shRNA沉默LASS2/TMSGl基因能促进人前列腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力,其机制可能是沉默LASS2/TMSG1基因后激活液泡型ATPase,从而使细胞外H’浓度升高,进而激活MMP-2和MMP-9有关,提示LASS2/TMSG1基因是一种新的肿瘤转移抑制基因。
- 徐晓艳由江峰裴斐
- 关键词:前列腺肿瘤基因沉默
- 用免疫学方法纯化混有异种肿瘤细胞成份的肿瘤细胞系
- 1997年
- 用免疫学方法纯化混有异种肿瘤细胞成份的肿瘤细胞系*高振强郑杰吴秉铨由江峰王洁良崔湘林关键词肿瘤细胞系纯化免疫组化中图号R73-351R371.3人类肿瘤移植裸鼠后可以保持许多肿瘤原有的的特性如转移等,因此,裸鼠成为肿瘤研究的重要工具。但移植瘤的再培养...
- 高振强郑杰吴秉铨由江峰王洁良崔湘林
- 关键词:肿瘤细胞系纯化免疫组织化学
- 整合素β1和细胞外基质对人胶质瘤细胞U251细胞骨架的作用被引量:1
- 2014年
- 目的研究整合素β1和细胞外基质[主要选取层黏连蛋白(laminin,LN)和纤黏连蛋白(fibronectin,FN)多形性胶质母细胞瘤U251细胞(U251MG)]对细胞微丝和中间丝(胶质纤维酸性蛋白glial fibrillary acidic protein,GFAP)骨架的影响。方法体外整合素β1抗体和细胞外基质处理U251MG细胞系,通过免疫荧光细胞化学染色及激光共聚焦显微镜,观察并分析细胞微丝和GFAP细胞骨架在细胞中定位的变化;通过运动迁移实验分析其对细胞运动能力的影响。结果 FN、LN包被处理的U251MG细胞内可见粗壮而密集、清晰的微丝结构。抗整合素β1抗体处理的细胞内,微丝分布杂乱而模糊,并可见大量絮团状的F-actin小体。抗整合素β1抗体处理的细胞内GFAP染色荧光信号减弱,FN和LN对GFAP表达及结构无影响。微丝和GFAP双标均阳性重合处位于F-actin小体处。抗整合素β1抗体减弱U251MG细胞在FN和LN的运动、迁移能力(P<0.05)。结论在U251MG细胞中,通过整合素β1和FN、LN相互作用,可改变细胞微丝的分布,并以此影响胶质瘤细胞的运动和迁移。GFAP在U251MG细胞内的分布同F-actin小体有关。
- 黄江梅钟延丰田新霞由江峰
- 关键词:胶质瘤整合素Β1细胞外基质细胞骨架
- 用半定量RT-PCR检测内皮素及其受体mRNAs在不同组织中的表达被引量:2
- 1995年
- 本文应用半定量逆转录-多聚酶链反应(sqRT-PCR)方法,检测了内皮素(ET)及其受体(ETR)mRNAs在心、肝、肺、肾等重要生命器官中的表达。结果显示,ET及ETRmRNAs均同时广泛表达于心、肝、肺、肾等重要脏器中,而且其表达量均以肺组织最高,其次是心脏和肾脏,而以肝组织表达量最低。结果提示,ET可能是生命活动中必不可少的细胞因子,ET及其受体在部位上的平行分布揭示ET可能不是一种循环激素,而是以自分泌和(或)旁分泌方式起作用的一种局部介质。肾脏既有中等量的ET表达,又有中等量的ETR表达,证明肾脏也是ET发挥作用的重要靶器官,提示ET在肾脏生理和肾脏病理中可能具有重要的意义。
- 陈建康邹万忠由江峰
- 关键词:聚合酶链反应内皮素受体