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王艳春: 作品数：51 被引量：45H指数：4; 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>; 发文基金：国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>

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幽门螺杆菌Ure B串联融合表位的表面呈现表达: 目的应用表达载体pHIE3N表面呈现表达幽门螺杆菌Ure B串联融合表位。方法通过改造表达呈现表达载体pHIE11,在质粒上的FhuA基因多克隆位点插入两个SfiⅠ酶切位点并调整读码框,改建成pHIE3N载体。将幽门螺杆...; 封小燕王艳春李平超陶好霞王芃袁盛凌王令春王普刘纯杰; 文献传递

幽门螺杆菌毒素相关蛋白A的EPIYA多态性对胃上皮细胞AGS形态及IL-8表达的影响: 2015年; 目的:比较研究幽门螺杆菌毒素相关蛋白A(Cag A)不同分型对胃上皮细胞AGS形态及IL-8表达影响的差异。方法:设计、人工合成并优化不同cag A基因型,构建相应表达载体,转染胃上皮细胞AGS后观察不同型Cag A对细胞形态及IL-8表达的影响。结果:转染后每6 h进行细胞形态观察,于24、36 h对形成蜂鸟状细胞的数量进行统计分析,结果表明,各型Cag A均能引起发生蜂鸟状改变的细胞数量增加;较空载体对照,Cag A的6种型别皆有非常显著差异,Cag A ABCCC与其余5种Cag A型别有非常显著差异。同时于转染后12、36 h对细胞分泌的IL-8进行检测,统计分析表明,转染后12 h,转染各型Cag A细胞的IL-8表达量开始出现差异;转染后36 h,较空载体对照,Cag AABD、Cag A J-Western、Cag A ABDD和Cag A ABCCC存在非常显著差异,Cag A ABDD和Cag A ABCCC分别与Cag AABD、Cag A ABC存在非常显著差异。结论:幽门螺杆菌Cag A可引起转染后的AGS细胞发生蜂鸟状改变及IL-8表达增加,EPIYA基序C数目的增加与细胞蜂鸟状改变呈正相关,EPIYA基序C和D数目的增加与IL-8表达呈正相关。; 刘鹿王艳春陶好霞袁盛凌王令春刘纯杰; 关键词：幽门螺杆菌

钩端螺旋体层粘连蛋白结合蛋白Lsa20的表达与功能分析: 2015年; 目的:表达并纯化可溶性重组钩端螺旋体层粘连蛋白结合蛋白Lsa20,并对其与层粘连蛋白(LN)相互作用的生物特性进行分析。方法:优化合成Lsa20基因,连接到表达载体p ET28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,然后利用Ni-NTA亲和介质纯化目标蛋白,重组蛋白经超滤浓缩后,进行相关ELISA、流式细胞术、间接免疫荧光实验。结果:构建了重组蛋白表达菌株,目标蛋白呈可溶性表达,纯化后纯度达90%以上;ELISA证实重组Lsa20与LN有较强的亲和力,测得解离常数为(27.23±2.53)nmol/L;流式细胞术及间接免疫荧光实验结果表明重组Lsa20可黏附到COS-7细胞表面。结论:重组Lsa20在体外能够与层粘连蛋白结合,具有同天然蛋白类似的生物学特性。同时,以Lsa20与LN相互作用实验为例,建立了研究LN结合蛋白生物功能的基本方案,为后续鉴定和研究新的LN结合蛋白的作用规律及黏附机制奠定了良好的实验基础。; 魏颖袁盛凌姚雪晶陶好霞王令春刘纯杰田威王艳春; 关键词：原核表达层粘连蛋白相互作用

幽门螺杆菌活菌载体疫苗及其专用重组菌: 本发明涉及一种幽门螺杆菌活菌载体疫苗及其专用重组菌。该专用重组菌为重组福氏志贺氏菌(Sh.flexneri)，是将含有幽门螺杆菌尿素酶B亚单位和幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位的融合蛋白的编码基因导入福氏志贺氏菌(Sh.fl...; 刘纯杰张兆山陶好霞王令春袁盛凌展德文王芃王艳春; 文献传递

炭疽杆菌芽孢疫苗载体的探索性研究: 炭疽芽孢杆菌/(Bacillus anthracis/)是一种G+菌,它引起的炭疽是一种人兽共患的烈性传染病,严重危害人类的健康,在我国列为乙类传染病。同时它又是一种潜在的生物战剂。因此,炭疽疫苗一直是生物安全研究的一个...; 王艳春; 关键词：炭疽芽孢杆菌芽孢基因打靶疫苗载体; 文献传递

利用λ-Red重组系统和平衡致死系统改造抗药性致腹泻工程疫苗被引量：4: 2006年; 质粒pMM085是含有猪毒素源性大肠杆菌(ETEC)的黏附素K88与无毒肠毒素LTA-B+基因的重组质粒,含氯霉素抗性基因,由此构建的菌苗株带有抗药性。利用平衡致死系统改建此疫苗株,即将质粒上的氯霉素抗性基因cat替换成asd基因,并把新构建的质粒转移到缺失asd基因的大肠杆菌X6097中。但由于质粒pMM085是一个23kD的大质粒,传统的基因工程操作不易进行,利用λ-Red重组系统,将表达Red重组蛋白的质粒pKD46转化含pMM085的大肠杆菌X6097,并用两端各带有39ntcat基因同源区、含全长asd基因的PCR产物电击转化此感受态细胞,在λ-Red重组系统的帮助下,成功实现了asd基因对cat基因的置换。; 袁盛凌王芃刘向昕王艳春展德文张兆山

幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用: 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽，其氨基酸序列为序列表中序列37。它的编码基因序列为序列表中序列28。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应，从而增强对幽门...; 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞

能在芽孢表面展示PAD4蛋白的炭疽芽孢杆菌及其应用: 本发明公开了一株能在芽孢表面展示PAD4蛋白的炭疽杆菌株及其应用。该菌株，是将Pa4基因插入到炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)芽孢蛋白bclA基因未端获得的菌株。具体可为炭疽芽孢杆菌(Bacillus...; 展德文王艳春刘纯杰陶好霞袁盛凌王令春王芃; 文献传递

炭疽芽孢杆菌突变株AP431与A16R的生物特性比较研究被引量：1: 2016年; 目的系统评价所构建的炭疽芽孢杆菌突变株AP431的生物特性,并与出发菌株A16R对比,为后续研究提供数据基础。方法绘制生长曲线比较突变株AP431和A16R的生长性能;糖酵解实验分析二者生化特性的差异;免疫印迹和流式细胞术检测菌株的保护性抗原PA蛋白表达情况;连续传代共培养分析其竞争关系;过氧化氢灭菌实验和抑菌圈实验分析菌株对活性氧的耐受性;以C57小鼠为动物模型比较二者的毒力大小。结果与A16R相比,突变株AP431生长稍慢,生化特性基本一致。突变株AP431的PA蛋白在S层呈现表达良好,并且在培养基上清、细胞内和外膜上的表达水平均比A16R高。共培养实验发现AP431的生存竞争能力明显减弱。过氧化氢敏感实验表明,突变株AP431对过氧化氢的敏感性比A16R显著增高。动物毒力实验结果显示,分别在两种注射剂量下,突变株的致死率显著降低,与A16R组相比差异显著(P<0.01)。结论与A16R相比,炭疽菌突变株AP431保护性抗原PA表达水平明显提高,毒力明显降低,可作为新的疫苗候选株进行进一步研究。; 聂伯尧苏润雨陶好霞袁盛凌刘纯杰杨百亮王艳春; 关键词：生物特性毒力

细菌芽胞——一种新型的疫苗载体被引量：1: 2008年; 杆菌属的芽胞作为益生菌已经应用于人和动物的食品生产和细菌疗法。目前,芽胞作为一种新型的疫苗载体,开始用于破伤风、炭疽等疫苗的研究。与目前的第二代疫苗相比,细菌芽胞热稳定性好,遗传操作方便,是一种理想的疫苗载体。本文就其作为疫苗载体的相关研究进行综述。; 王艳春张兆山; 关键词：细菌芽胞疫苗疫苗载体

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