王海龙
- 作品数：131 被引量：266H指数：8
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- 一种全自动移液枪枪头盒
- 本发明属于生物医学设备技术领域，具体涉及一种全自动移液枪枪头盒。包括盒体、输送机构、棘轮机构和控制机构；本发明将枪头竖直插在存放盘上，且存放盘和导向盘上的存放槽和螺旋轨道相互对应使的枪头可以分散开来，避免了枪头堆积造成灭...
- 王海龙郭民庞敏王天奇陈朝阳王维郭海秀于保锋郭睿王文桃刘跃华秦轲茹高丽孙佳于倩倩刘丹丽李燕
- 文献传递
- ANKRD49对人肺腺癌细胞迁移能力的影响及其机制
- 2024年
- 目的 研究ANKRD49(ankyrin repeat domain 49)对人肺腺癌细胞NCI-H1299迁移能力的影响及其机制。方法将携带ANKRD49基因的慢病毒载体及针对ANKRD49的shRNA感染NCI-H1299细胞,构建稳定过表达与敲低ANKRD49的细胞模型,同时分别构建感染空白序列慢病毒载体和无意义shRNA序列慢病毒载体的对照细胞模型。采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测ANKRD49 mRNA和蛋白表达水平;细胞划痕试验检测ANKRD49对细胞迁移能力的影响;实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2/9及基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloprotease,TIMP)-1/2 mRNA及蛋白表达水平;Western blot法检测p65、p-p65、IκBα和p-IκBα蛋白表达水平。结果 ANKRD49过表达组细胞中ANKRD49 mRNA和蛋白水平均显著高于对照组(t分别为70.02和45.68,P均<0.001)。与对照组相比,ANKRD49过表达组细胞24和48 h的迁移能力明显升高(t分别为5.343和3.282,P分别为0.005 9和0.030 4);MMP-2和MMP-9 mRNA转录水平及蛋白表达水平均明显升高(t分别为9.304和6.193,P分别为0.000 7和0.003 5),TIMP-1和TIMP-2 mRNA转录水平及蛋白表达水平均明显下降(t分别为3.858和3.517,P分别为0.018 2和0.024 5),MMP-2/TIMP-1和MMP-9/TIMP-2值明显升高(t分别为17.7和9.682,P分别<0.001和<0.01);p-p65和p-IκBα蛋白表达水平明显升高,p65和IκBα总蛋白水平无明显变化,p-p65/p65、p-IκBα/IκBα值明显增高(t分别为3.962和5.370,P分别为0.016 7和0.005 8)。ANKRD49敲低后结果均与过表达结果相反。结论 ANKRD49通过激活NF-κB/p65信号通路增加MMP-2/9的表达及提高MMP-9/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2值来促进NCI-H1299细胞的迁移。
- 胡金瑞樊莎莎孙佳王维杨勇王智欣刘超锋庞敏王海龙
- 关键词：肺腺癌迁移核转录因子-ΚB
- 加味不忘散对AD大鼠学习记忆及在体海马长时程增强的影响
- 目的： 1.观察加味不忘散对AD大鼠学习记忆能力的影响;2.观察加味不忘散对AD大鼠在体海马CA1区LTP的影响。 方法： 将40只雄性Wistar大鼠（230g±30g）随机分成对照组、AD模型组、加味不忘散低剂...
- 王海龙
- 关键词：学习记忆海马组织电生理指标
- 文献传递
- 刚地弓形虫磷酸甘油酸变位酶2基因克隆、表达与免疫原性分析
- 目的对刚地弓形虫磷酸甘油酸变位酶2(Tg PGAM 2)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入Kpn I和Bam H I酶切位点,RT-PCR扩增编码Tg P...
- 王芬王海龙殷丽天孟晓丽刘红丽申金雁殷国荣
- 关键词：刚地弓形虫克隆原核表达免疫原性
- 文献传递
- 小鼠精子发生相关蛋白3基因在小鼠生精细胞的特异表达及对HEK 293T细胞凋亡和自噬的影响被引量：3
- 2018年
- 目的检测小鼠精子发生相关蛋白3(spata3)基因在小鼠生精细胞的表达情况,并借助过表达细胞模型进一步分析该基因对人胚肾HEK 293T细胞凋亡及自噬的影响,旨在探讨spata3在精子发生过程中的意义。方法分别采用RT-PCR和免疫印迹法检测spata3基因mRNA及蛋白产物在小鼠各组织中的表达;应用免疫组织化学和免疫荧光染色观察SPATA3蛋白在生精细胞中的定位;借助脂质体将真核表达载体Plv-EGFP-2(a)purospata3瞬时转染HEK 293T细胞,进一步在蛋白水平分析细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)、BAX和Bcl-2及自噬相关蛋白LC3A/B的变化。结果 Spata3基因及其编码产物在小鼠睾丸组织特异表达;粗线期精母细胞和圆形精子细胞的胞质与胞核均有显著SPATA3蛋白的阳性着色,长形精子细胞的胞质也有大量分布;过表达spata3的HEK 293T细胞内活化型Caspase-3和PARP降解产物的含量较对照组差异无显著性,BAX表达量0.815±0.020较裸细胞组0.469±0.012和空载体转染组0.588±0.018均有所增高,Bcl-2含量0.214±0.020低于裸细胞0.507±0.021和空载体转染组0.545±0.024,LC3A/B-Ⅱ的表达量0.741±0.037则显著高于裸细胞组0.136±0.011和空载体转染组0.169±0.012。结论 Spata3基因在小鼠生精细胞特异表达,过表达spata3对HEK 293T细胞凋亡无明显影响,但可以促进细胞自噬。
- 王玉晶温丽敏白欣艳曹睿王海龙郭睿
- 关键词：293T细胞细胞转染自噬小鼠
- Survivin启动子控制的自杀基因HSVtk真核表达载体
- 本发明公开了一种Survivin启动子控制的自杀基因<I>HSVtk</I>真核表达载体，本发明所述真核表达载体结合外源药物更昔洛韦(GCV)，对KYSE150食管癌细胞具有特异性杀伤作用，且其作用显著强于HepG<Su...
- 于保锋李勇芳孟凡秀张琪齐永利李卓奇赵娜张英敏袁洋洋曾思衡姚志坚杨巧艳温晓薇温丽敏白欣艳张紫燕解军徐钧郭睿张悦红王惠珍弓韬王海龙杨丽红刁海鹏陈显久秦琴董秀山胡晓年
- 文献传递
- 香烟烟雾对巨噬细胞毒性作用的研究被引量：1
- 2005年
- 目的 研究香烟烟雾对体外培养的巨噬细胞的毒性作用。方法 采用台盼蓝拒染法测定不同浓度香烟烟雾提取物(CSE)和CSE +盐酸氨溴索作用于体外培养的小鼠巨噬细胞后多个时间点的细胞存活率。结果 各组巨噬细胞培养 30min ,1h和 3h后的细胞存活率均在 95 %以上 ,组间无统计学差异 ;6h和 12h 10 %CSE(体积分数 )组、10 %CSE +氨溴索组、2 0 %CSE组、2 0 %CSE +氨溴索组细胞存活率明显下降 ,与空白对照组、5 %CSE组、5 %CSE +氨溴索组有明显差异 (P <0 0 1) ;2 4h 5 %CSE组、5 %CSE +氨溴索组、10 %CSE组、10 %CSE +氨溴索组、2 0 %CSE组及 2 0 %CSE +氨溴索组细胞存活率均明显下降 ,与空白对照组有显著性差异 (P <0 0 1) ;在 6h、12h和 2 4h ,各CSE浓度组与相应氨溴索干预组之间细胞存活率均无差异 (P >0 0 5 )。结论 香烟烟雾可对巨噬细胞造成致死性的损伤 ,表现出明显的时间 -剂量依赖性 。
- 庞敏许建英杜永成王海龙
- 关键词：巨噬细胞存活率盐酸氨溴索
- 重组弓形虫热休克蛋白70鼻内及皮下免疫小鼠诱导的免疫应答比较被引量：5
- 2011年
- 目的比较重组弓形虫热休克蛋白70(rTgHSP70)滴鼻及皮下免疫小鼠诱导的免疫应答及其持续时间。方法将90只BALB/c小鼠随机分为3组:滴鼻组用20μg rTgHSP70滴鼻,皮下组用80μg rTgHSP70皮下免疫,间隔2周加强免疫1次,对照组不处理。末次免疫后第1、2、3、4、5、6周,每组分别处死小鼠5只,ELISA法检测血清IgG水平、鼻咽和肠冲洗液sIgA水平;分离脾淋巴细胞和肠上皮内淋巴细胞(IEL)并计数。结果滴鼻组小鼠血清IgG水平第1～6周高于皮下组和对照组,其中第3～5周差异有统计学意义(P<0.001);皮下组小鼠第3、4周显著高于对照组(P<0.001)。滴鼻组小鼠第3～5周,皮下组小鼠第4～5周鼻咽冲洗液sIgA水平显著高于对照组(P<0.001)。滴鼻组小鼠小肠冲洗液sIgA水平第1～6周显著高于皮下组和对照组(P均<0.001);皮下组小鼠第3、4周显著高于对照组(P<0.001)。滴鼻组小鼠脾淋巴细胞数量第2～4周显著高于对照组(P<0.000 1),3～4周显著高于皮下组(P<0.001);皮下组小鼠第2～4周显著高于对照组(P<0.001)。滴鼻组小鼠IEL数量第1～6周显著高于对照组(P<0.000 1),第3～4周显著高于皮下组(P<0.000 1),皮下组小鼠第1～5周显著高于对照组(P<0.05)。结论 rTgHSP70皮下和滴鼻免疫小鼠均能诱导有效的黏膜和系统免疫应答,且滴鼻免疫的效果优于皮下免疫,是rTgHSP70更为有效的免疫途径。
- 殷丽天曹蕾王海龙孟晓丽张建红殷国荣
- 关键词：刚地弓形虫热休克蛋白70鼻内免疫
- 不同剂量霍乱毒素联合弓形虫ESA小鼠鼻内免疫的佐剂效应被引量：2
- 2010年
- 目的观察不同剂量霍乱毒素（cholera toxin,CT）联合弓形虫排泄-分泌抗原（excreted-secreted antigens,ESA）滴鼻免疫小鼠的佐剂效应,探索CT作为鼻黏膜佐剂的适宜剂量。方法 5~6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为5组,每组12只,分别以0、0.5、1.0、1.5或2.0μg CT联合ESA 20μg滴鼻免疫小鼠,间隔2周进行加强免疫,共2次。末次免疫后30 d,眼静脉丛采血并颈椎脱臼处死小鼠,用ELISA法检测血清IgG和粪便sIgA水平。分离脾、Peyer’s patch（PP）、肠系膜淋巴结（MLN）淋巴细胞。结果 1.5和2.0μg CT组小鼠健康状况下降、存活率降低。免疫后30 d,小鼠粪便sIgA水平随CT剂量的增加而升高,1.0、1.5和2.0μg CT组小鼠粪便sIgA水平显著高于无佐剂组（P〈0.05）,3组间差异无统计学意义（P〉0.05）。CT联合ESA鼻内免疫小鼠后MLN、PP和脾淋巴细胞数显著高于无佐剂组（P〈0.05）,并均呈现一定的剂量效应,但较高剂量组（1.0、1.5和2.0μg）之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 1.0μg CT联合ESA鼻内免疫小鼠可诱导较高水平的黏膜和系统免疫应答,且对小鼠的健康无不良影响。
- 李润花孟晓丽王海龙刘红丽申金雁殷国荣
- 关键词：刚地弓形虫霍乱毒素排泄-分泌抗原鼻内免疫黏膜佐剂
- 弓形虫STAg联合IFN-γ佐剂滴鼻免疫小鼠诱导不同黏膜部位抗体水平动态观察被引量：7
- 2011年
- 目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原（soluble tachyzoite antigen,STAg）联合IFN-γ佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后不同黏膜部位抗体水平及其持续时间,为黏膜疫苗研制提供实验依据。方法 84只5~6周龄BALB/c小鼠随机分为免疫组和对照组,每组42只。免疫组以STAg（20μg/只）为抗原加IFN-γ（1 000 U/只）为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS 20μl滴鼻。共滴鼻2次,间隔2周。首次免疫后第0、2、4、6、8、10、12周每组处死6只小鼠,ELISA法测定鼻咽、肺和小肠冲洗液sIgA、IgG水平。结果小鼠用弓形虫STAg联合IFN-γ首次免疫后鼻咽冲洗液sIgA和IgG水平均增高,其中第2、4、6、8周sIgA水平显著高于对照组（P〈0.05）,第2、4、6周IgG水平高于对照组（P〈0.05）;首次免疫后第6、8周小鼠肺冲洗液sIgA水平显著高于对照组（P〈0.05）,第4、6、8周IgG水平高于对照组（P〈0.05）;首次免疫后第2、4、6周小肠冲洗液sIgA水平高于对照组（P〈0.05）,第2、4、6、8周IgG水平高于对照组（P〈0.05）。免疫后不同黏膜部位抗体均以sIgA为主,且以肠道冲洗液最高。结论 STAg联合IFN-γ佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠可诱导鼻咽、肺和小肠黏膜部位产生高水平sIgA和IgG抗体应答,并可持续6~8周。表明滴鼻免疫是弓形虫疫苗的适宜接种途径。
- 刘阳殷丽天孟晓丽王海龙刘红丽殷国荣
- 关键词：刚地弓形虫可溶性速殖子抗原滴鼻免疫黏膜免疫
