目的本实验探讨miR-191对人恶性脑膜瘤IOMM-Lee细胞增殖的影响及其可能作用机制。方法采用RealtimePCR法检测恶性脑膜瘤组织、癌旁正常组织和人恶性脑膜瘤细胞系IOMM-Lee及CH157-MN细胞中miR-191的表达。在IOMM-Lee细胞中转染miR-191抑制剂,MTT检测细胞增殖能力。通过生物信息学软件分析miR-191的下游靶基因,用莹光素酶报告基因法进行验证。观察抑制EGR1的表达对细胞增殖能力影响。使用蛋白质相互作用数据库分析可与EGR1作用的蛋白,检测抑制EGR1的表达对TP53蛋白表达的影响,观察抑制miR-191的表达对EGR1和TP53蛋白表达的影响。结果miR-191在恶性脑膜瘤组织中的表达(0.933±0.144),明显高于癌旁正常组织(0.459±0.104,P<0.05)。人恶性脑膜瘤细胞系IOMM-Lee(1.25±0.07)中miR-191的表达明显高于CH157-MN细胞系(0.50±0.14,P<0.05)。抑制miR-191表达后,IOMM-Lee细胞的增殖能力明显降低(0.53±0.02 vs 0.74±0.01,P<0.05)。EGR1是miR-191的靶基因,抑制EGR1表达可促进IOMM-Lee细胞的增殖(0.83±0.02 vs 0.71±0.01,P<0.05)。EGR1可正调控TP53蛋白表达(13758.17±57.22 vs 10239.00±71.30,P<0.001),抑制miR-191后EGR1(14663.00±80.08 vs 11184.33±153.90,P<0.001)及TP53蛋白表达明显下降(15206.17±102.08 vs 11400.17±97.00,P<0.001)。结论沉默miR-191可有效抑制恶性脑膜瘤细胞增殖,其作用机制可能与上调EGR1/TP53信号通路有关。
