熊建英
- 作品数:11 被引量:22H指数:3
- 供职机构:南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广州市科技计划项目广东省社会发展领域科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 两种品系小鼠建立登革病毒感染的湿热证模型研究被引量:3
- 2011年
- 目的建立两种不同品系小鼠登革病毒感染的湿热证模型,并比较感染情况差异,确定适合造模的小鼠。方法根据中医温病湿热证的造模方法,采用复合因素:高糖高脂饲料加高温舱加感染因子(登革病毒),分别处理BALB/C和C57BL/6小鼠,同时设正常对照组(对照组)、病毒组(单纯病毒感染造模)、湿热组(单纯湿热条件干预造模),通过观察小鼠的体温、血小板数量、分离血清中病毒、肝脏病理学改变及血清学指标比较模型建立的情况。结果造模后小鼠于高温舱处理时出现低热。与对照组比较,BALB/C模型组血小板降低,两种小鼠模型组和病毒组血清AST均升高,BALB/C模型组、湿热组血清TC、TG升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。各组肝组织均有不同程度的病理改变,以BALB/C模型组病变最严重。用Real-time PCR检测造模后血清病毒滴度,各组无明显差异,病毒含量2.9×104~5.5×104拷贝数/mL。结论初步构建登革病毒感染的湿热证小鼠模型,比较BALB/C和C57BL/6小鼠感染情况,BALB/C更适合造模。
- 马丹娟黄仕营熊建英朱利万成松曹虹林培政赵卫
- 关键词:登革病毒湿热证模型BALB/C小鼠C57BL/6小鼠
- 一种检测登革1型病毒的荧光定量PCR试剂盒
- 本发明属于生物化学领域,提供一种检测登革1型病毒的荧光定量PCR试剂盒,该试剂盒含有特异性扩增登革1型病毒NS2A区域的引物:5’-GATGAGATCCAGATGGAGTAGAAAG-3’(SEQ NO.1),5’-TC...
- 赵卫熊建英曹虹马丹娟朱利万成松
- 文献传递
- 一种检测登革1型病毒的荧光定量PCR试剂盒
- 本发明属于生物化学领域,提供一种检测登革1型病毒的荧光定量PCR试剂盒,该试剂盒含有特异性扩增登革1型病毒NS2A区域的引物:5’-GATGAGATCCAGATGGAGTAGAAAG-3’(SEQ NO.1),5’-TC...
- 赵卫熊建英曹虹马丹娟朱利万成松
- 登革病毒感染湿热证小鼠模型的建立被引量:4
- 2011年
- 目的:根据中医理论建立登革热湿热证动物模型,并对模型加以评价。方法:采用复合因素:高糖高脂饲料+高温仓+感染因子登革病毒(DEN),建立研制登革病毒感染的小鼠模型,观察小鼠一般生物学状态、临床表现及实验室检查指标,并给予中药方剂进行治疗。从病因、症状、体征、实验指标及中药治疗反证等方面评价模型。结果:动物模型符合登革热病的特点,未改变登革热模型的关键指标(湿热毒组病毒测定G值:32.70),同时模型小鼠出现明显湿热证客观指标的变化(P<0.01),经中药复方治疗后,上述指标得到明显的改善。结论:在中医理论指导下采用复合因素接种DEN,可建立小鼠感染模型,为研究中医药治疗登革热的效果和机制提供了较为合适的动物模型。
- 李玉静赵卫张玲熊建英张文炳杨运高文小敏林培政
- 关键词:登革热动物模型
- 一种可连接多片段的重叠延伸PCR方法
- 本发明提供了一种可有效连接多个DNA片段的SOE-PCR方法,该方法通过采用完全互补的拼接区域引物和在重叠链延伸时引入非对称量引物(即位于目的长片度两末端的引物与位于目的长片段拼接区域的引物的摩尔比为40~120∶1),...
- 赵卫钟志成黎诚耀朱利熊建英万成松张玲
- 文献传递
- 荧光定量PCR快速检测登革1型病毒
- 一、研究背景和目的
登革病毒(dengue virus,DEN)属黄病毒科黄病毒属,为单股正链RNA病毒,体积较小,约45~55nm,依抗原性不同分为四个血清型。登革病毒主要通过埃及伊蚊和白纹伊蚊等媒介昆虫传播,引...
- 熊建英
- 关键词:登革病毒荧光定量PCR技术致病机理分子生物学
- 文献传递
- 登革1型病毒荧光定量PCR快速检测被引量:1
- 2012年
- 目的建立登革1型病毒的快速特异的荧光定量PCR检测方法。方法设计登革1型病毒特异的引物和TaqMan探针,制作标准曲线,并检测其特异性、重复性、再现性和敏感性,采用荧光定量PCR和常规PCR对临床标本进行检测比较。结果成功构建了标准曲线,回归方程为Y=-3.410logX+45.10,相关系数R2=0.999,扩增效率Eff=96.5%,灵敏度可达103 copies/mL,此荧光定量PCR方法对登革1型病毒检测高度特异,与其他3型登革病毒和乙型脑炎病毒之间并无交叉反应;采用登革病毒种特异引物探针和本研究建立的登革1型病毒型特异引物探针对166份cDNA样本进行荧光定量PCR检测,均发现126份为阳性,阳性率均为75.9%,Ct值为20.84~36.36,浓度范围为1~1.3×104copy/μL;常规PCR方法检测到其中36份为阳性,阳性率为21.7%。结论荧光定量PCR方法能够快速灵敏地检测登革1型病毒,并能实现对病毒滴度的绝对定量。
- 熊建英张复春马丹娟朱利张玲胡凤玉黎诚耀钟志成万成松赵卫
- 关键词:荧光定量PCR登革病毒TAQMAN探针
- 登革病毒ADE发生机制的研究进展被引量:1
- 2012年
- 在登革病毒致病机理中,抗体依赖增强感染效应(Antibody-dependent enhancement,ADE)占据重要地位,可能在人体二次感染登革病毒后引起严重疾病。对近年来重症登革病毒感染作用机制研究中常用的细胞系、动物模型、ADE对于病毒进入宿主细胞的促进作用以及ADE引起的细胞因子变化等方面的研究进展进行了综述。
- 闫菲菲熊建英赵卫
- 关键词:登革病毒动物模型细胞因子
- 一种可用于多DNA片段连接的新SOE-PCR方法被引量:6
- 2010年
- 目的通过对重叠延伸PCR技术的改进,建立一种可用于多DNA片段连接的SOE-PCR方法。方法扩增获得相互重叠的1.8、1.1、1.3kb的短片段,以之作为亚片段模板。在SOE-PCR反应体系中加入不同数量用于重叠的亚片段模板及延伸所得目的长片段扩增所需的外引物,同时加入了稀释100倍的内引物,使得亚片段模板在扩增过程中能动态达到最佳重叠延伸浓度。结果获得了特异性强、丰度高的两段连接产物,与原有的SOE-PCR方法相比,大大减小了反应的非特异性条带扩增,产物丰度也优于传统的扩增方法。采用同样方法尝试了单管反应对三个片段进行连接,获得了总长度为4.2kb的长片段,且实验重复性、特异性好。结论本研究以相互重叠的多个短片段为模板,实现多片段的连接和扩增,可降低受模板浓度条件的影响的实验操作难度。多片段连接时减少了操作步骤和突变几率,可广泛用于多DNA片段连接操作。
- 钟志成黎诚耀朱利张玲万成松马丹娟杨瑜熊建英赵卫
- 关键词:突变EIAV