焦倩
- 作品数：13 被引量：40H指数：3
- 供职机构：西安交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 移植的大鼠神经干细胞与正常培养器官型脑组织片相互整合及相关分子机制
- 目的神经干细胞(neural stem cell,NSCs)移植为脑损伤及神经退行性疾病的治疗带来希望。然而,移植后NSCs的生物学行为以及功能发挥受到体内复杂信号的影响,为了提高NSCs移植效果、更好的促进神经功能重建...
- 吕海侠焦倩王丽马辉王媛媛张志超刘勇
- 关键词：神经干细胞细胞移植
- 文献传递
- 一种调控STAT3磷酸化的融合肽及其应用
- 本发明公开了一种调控磷酸化STAT3表达的融合肽。所述的融合肽，是基于穿膜肽TAT序列和细胞因子信号转导抑制因子3激酶抑制区(KIR)序列的融合肽，并以异硫氰酸荧光素(FITC)对融合肽进行氨基端标记。其核苷酸序列如SE...
- 吕海侠王丽马辉焦倩燕晗祺马雯张智超刘勇
- 文献传递
- 一种调控STAT3磷酸化的融合肽及其应用
- 本发明公开了一种调控磷酸化STAT3表达的融合肽。所述的融合肽，是基于穿膜肽TAT序列和细胞因子信号转导抑制因子3激酶抑制区(KIR)序列的融合肽，并以异硫氰酸荧光素(FITC)对融合肽进行氨基端标记。其核苷酸序列如SE...
- 吕海侠王丽马辉焦倩燕晗祺马雯张智超刘勇
- 文献传递
- 新生大鼠器官型脑组织片培养和诱导神经干细胞分化的观察
- 2011年
- 目的建立在改良条件下新生大鼠器官型脑组织片培养方法,初步探索空间信号对神经干细胞增殖分化的诱导作用。方法选取新生SD大鼠,以振荡切片机切取200μm脑组织片,以改良的Stoppini方法进行培养,培养不同时间在倒置相差显微镜下对脑组织片进行观察;采用本实验室改良后神经干细胞培养方法分离培养SD大鼠胚胎第14～15天大脑皮质神经干细胞,以CM-DiI对培养第3代细胞进行标记,并移植于体外培养2周后的脑组织片;对移植后CM-DiI阳性标记细胞的存活和分化情况进行观察。结果器官型脑组织片在体外培养体系中存活良好,脑片周围细胞向外迁移;培养2周后,组织片厚度由原来的200μm减小至130μm,原有的细胞构筑发生变化;接受细胞移植后的脑片上可见大量DiI标记细胞,继续培养7 d后,部分标记细胞分化为GFAP阳性星形胶质细胞和β-tubulin III阳性神经元。结论新生大鼠器官型脑组织片体外培养成功,可以作为研究空间信号诱导神经干细胞增殖分化的模型。
- 焦倩章海霞吕海侠刘勇
- 关键词：神经干细胞分化
- 米非司酮对大鼠胚胎神经干细胞存活、增殖及分化的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察米非司酮处理后大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)增殖、凋亡和分化变化,分析其对神经发育的可能影响。方法以不同浓度米非司酮处理体外培养的NSCs,通过活细胞计数、流式细胞仪检测细胞周期及线粒体膜电位、免疫细胞化学染色等方法检测NSCs存活、增殖、凋亡及分化情况。结果 10-5mol/L米非司酮处理后NSCs存活和增殖明显下降(P<0.05),10-6和10-8mol/L对细胞无明显影响,而10-7mol/L处理第4天后细胞增殖明显,但其对NSCs线粒体膜电位及增殖指数影响不大;处理后NSCs仍保持多向分化能力,神经元和胶质细胞分化比例与对照组相比无差异。结论大剂量米非司酮抑制NSCs增殖,小剂量则促进细胞增殖、不影响NSCs命运决定。
- 冯敏娟王媛媛焦倩杨志倩邢兰英吕海侠刘勇
- 关键词：米非司酮神经干细胞分化
- 缺氧对成年大鼠SVZ组织分离培养神经干细胞的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨缺氧对体外培养的大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖、分化和细胞凋亡的影响。方法分离成体SD大鼠室管膜室下区(subventricular zone,SVZ)组织,NSCs在常氧和低氧培养箱培养,光镜观察细胞形态;采用NSCs标记物(nestin)免疫荧光染色鉴定细胞,未成熟神经元标记物(β-tubulinⅢ/Tju-1)、星形胶质细胞标记物(GFAP)和少突胶质细胞标记物(O4)免疫荧光染色和细胞计数观察细胞的分化能力;WST-1检测细胞增殖能力;流式细胞仪和TUNEL法检测细胞凋亡。结果从成体SVZ组织中成功分离培养出NSCs;无血清诱导下细胞培养至第4代有部分细胞分化,多为胶质细胞;血清诱导后NSCs可以向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化,大部分干细胞分化为Tju-1阳性细胞(53.8%±6.8%),部分为GFAP阳性细胞(21.6%±5.4%),少部分为O4阳性细胞(11.4%±4.5%)。一定时间(<24h)的低氧(3mL/L氧浓度)可以促进NSCs增殖(P<0.05),但长时间缺氧(>24h),细胞增殖能力减弱而细胞凋亡比例增加(P<0.01)。结论正常成体组织中存在NSCs;体外培养条件下分离培养的NSCs可以分化为多种类型细胞;短时间低氧可促进NSCs的增殖,而长时间缺氧导致细胞凋亡比例增加。
- 祁存芳张军峰陈新林焦倩张建水刘勇
- 关键词：缺氧神经干细胞凋亡
- 细胞因子信号转导抑制因子3激酶抑制区对STAT3磷酸化的抑制作用被引量：4
- 2014年
- 目的：探讨细胞因子信号转导抑制因子3（SOCS3）的激酶抑制区（KIR）对细胞内STAT3蛋白磷酸化的影响.方法：化学合成穿膜肽TAT与KIR的融合肽（TAT-KIR）,以异硫氰酸荧光素（FITC）进行氨基端标记;不同浓度融合肽加入培养的PC12细胞,荧光显微镜及流式细胞仪检测TAT-KIR的穿膜效果;以白细胞介素-6（IL-6）处理PC12细胞模拟炎症反应,MTT检测细胞活力/增殖情况,免疫印迹检测细胞内磷酸化STAT3 （P-STAT3）蛋白水平;对比阴性对照组（正常培养的细胞）、IL-6刺激组、TAT-KIR处理组及TAT-KIR＋IL-6处理组细胞的P-STAT3水平,分析SOCS3的KIR对STAT3磷酸化的影响.结果：加入不同浓度TAT-KIR后10 min,显微镜下可见细胞内有绿色荧光出现,并随浓度升高胞内绿色荧光强度增强,其中3 μmol/I融合肽30 min时其跨膜转运效率最高,可达99.94％;100 ng/ml IL-6可显著增加PC12细胞活力,并促进胞内STAT3磷酸化水平显著增高;与此相比,TAT-KIR＋IL-6组细胞内P-STAT3水平显著下降,但是TAT-KIR处理组P-STAT3水平与阴性对照组比较差异无统计学意义.结论：KIR可被TAT成功转入细胞内部,并有效抑制IL-6刺激引起的PC12细胞STAT3磷酸化水平的增高,对正常情况细胞STAT3磷酸化的影响不大.
- 王丽马辉焦倩王媛媛张智超杨蓬勃陈新林李昭荣吕海侠刘勇
- 关键词：细胞因子信号转导抑制因子3PC12细胞白细胞介素-6
- PHBHHx膜表面亲水改性及其与神经干细胞生物相容性被引量：6
- 2012年
- 对羟基丁酸-羟基己酸共聚酯(PHBHHx)膜进行表面改性,研究神经干细胞(NSCs)在改性后的PHBHHx膜表面的贴附、增殖及分化情况,为开发新型脑组织工程支架材料奠定基础。采用溶剂挥发法制备PHBHHx膜,扫描电镜观察其表面性状;分别通过脂肪酶处理,NaOH处理的方法对PHBHHx膜进行表面改性,测量接触角以检测膜表面亲水性。分离培养孕14.5 d大鼠胚胎大脑皮质NSCs,接种在表面改性后的PHBHHx膜表面进行体外培养,扫描电镜观察膜表面细胞形态,MTT法检测细胞活力,免疫细胞化学染色观察NSCs存活和分化情况。结果显示,与未处理的PHBHHx膜相比,脂肪酶、NaOH处理能够显著提高PHBHHx膜表面亲水性,增加NSCs在PHBHHx膜表面贴附数量;NSCs在改性后的PHBHHx膜表面能够良好地存活并分化为神经元和胶质细胞。结果提示PHBHHx膜表面碱处理通过提高材料表面亲水性和粗糙程度,增加其与NSCs的生物相容性,改性后的PHBHHx材料是一种非常有潜力的新型脑组织工程支架材料,有望在NSCs移植修复脑损伤中发挥作用。
- 吕海侠杨志倩卢晓云李明川焦倩陈新林王媛媛张雅利
- 关键词：神经干细胞生物相容性
- 红景天苷通过抑制凋亡相关蛋白的表达保护缺氧对培养神经干细胞的损伤被引量：24
- 2013年
- 目的观察红景天苷对缺氧损伤成年大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)组织分离培养神经干细胞凋亡比例和Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白表达的影响。方法原代培养成年大鼠SVZ神经干细胞,不同浓度红景天苷预处理24 h后,干细胞厌氧工作站缺氧损伤48 h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞活力;显微镜下观察各组细胞形态;TUNEL染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞内Bax,Bcl-2和caspase-3蛋白的表达变化。结果红景天苷预处理可显著改善缺氧损伤后的细胞生长状态和活力,降低缺氧引起的细胞凋亡率的升高(P<0.05);拮抗缺氧损伤导致的细胞Bcl-2/Bax蛋白比例的下降,降低活化的caspase-3蛋白的表达(P<0.05)。结论红景天苷通过抑制神经干细胞的凋亡,保护缺氧对神经干细胞的损伤,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2和caspases-3的表达有关。
- 祁存芳张军峰陈新林张建水杨蓬勃焦倩张蓬勃吕海侠刘勇
- 关键词：红景天苷缺氧神经干细胞BAXCASPASE-3
- 基于器官型脑组织片体外构建脑组织缺氧损伤模型
- 目的器官型脑组织片保留了与体内组织相似的神经细胞构筑、复杂的细胞外环境和突触联系,同时具有很强的可操作性,为神经科学研究提供了良好的平台,糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)处理器官型...
- 焦倩王丽马辉王媛媛张志超吕海侠刘勇
- 关键词：缺血缺氧损伤
- 文献传递
