洪斌
- 作品数:144 被引量:220H指数:8
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- Herbicidin生物合成基因簇及其应用
- 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种用于提高发酵herbicidin F及其类似物产量的方法,所述方法为:在发酵生产herbicidin F及其类似物的宿主菌株中过表达HcdR2基因。所述的宿主菌株为链霉菌,优选为S...
- 洪斌解云英侍媛媛谷仁杰李怡宏王新位任卫聪李星星王丽非张丛
- 文献传递
- 球孢链霉菌质粒pSGL1的性质研究被引量:4
- 1998年
- 链霉菌质粒pSGL1是本实验室在球孢链霉菌(Streptomycelglobisporus)中发现的新的质粒,它可以在变铅青链霉菌中复制。用缺失分析确定了pSGL1的基本复制区位于一个2.0kb的片段上。pSGL1能够与pIJ101相容。pSGL1是一个高拷贝质粒,拷贝数约为70~250。在对质粒进行分析的过程中得到的一些衍生质粒如pSGLN和pSGLS3等可以作为新的链霉菌基因克隆载体,并可用于构建新的高效分泌表达的链霉菌载体。
- 洪斌李元
- 关键词:链霉菌相容性拷贝数
- 抗肿瘤基因工程单链抗体导向药物被引量:6
- 2005年
- 过去30年肿瘤治疗取得了极大的进步,基因工程技术推动了肿瘤免疫治疗的发展,以基因工程为基础的单链抗体导向药物成为肿瘤免疫治疗的新热点,其用于治疗肿瘤的药物研究取得了重大进展。研究表明,基因工程单链抗体导向药物能特异性结合肿瘤相关靶点,对肿瘤细胞有选择性的杀伤作用,并在动物实验中有显著的疗效。基因工程单链抗体导向药物在肿瘤治疗中将发挥重要作用,具有广阔的应用前景。综述了这一领域的发展,并对其前景进行了预测。
- 胡云峰洪斌邵荣光
- 关键词:肿瘤免疫治疗基因工程
- 以Apo A-I为靶点的基因表达上调剂筛选模型的建立被引量:3
- 2011年
- 目的建立靶向人ApoA-I转录调控序列的高通量药物筛选模型,用于筛选ApoA-I基因表达上调剂。方法以人基因组DNA为模板,PCR扩增ApoA-I上游的启动子序列,克隆至荧光素酶报告基因质粒pGL4.17上游,采用脂质体介导的方法将重组质粒转染人肝癌细胞HepG2,在G418抗性存在的条件下,通过有限稀释法筛选稳定转染细胞株。对溶剂浓度和药物作用时间进行条件优化,应用阳性化合物染料木素评价模型有效性,通过检测荧光素酶的表达活性变化来筛选人ApoA-I基因表达上调剂。结果通过PCR成功扩增了人ApoA-I基因上游的启动子序列,构建了相应的重组荧光素酶报告基因质粒pGL4-ApoP,并建立稳定转染细胞株ApoP-LucHepG2。对筛选条件优化后,应用阳性化合物进行评价,筛选窗相关系数Z’因子为0.68,大于0.5,适于进行高通量筛选。应用该筛选模型对5000余种化合物进行筛选,4个黄酮类化合物和白藜芦醇显示出较好的活性,半数有效浓度均小于10μg/ml。结论成功建立了人ApoA-I基因表达上调剂筛选模型,并利用该模型筛选到5个活性化合物。
- 杜郁王丽王丽非司书毅杨媛洪斌
- 关键词:载脂蛋白A-I转录启动子荧光素酶类
- 结核菌核糖体蛋白L12和L10相互作用阻断剂筛选模型及应用
- 本发明属于生物学和药学领域,涉及结核菌核糖体蛋白L12和L10相互作用阻断剂筛选模型及应用。具体地,本发明涉及一种细胞,其表达结核杆菌的L12蛋白和L10蛋白,其中,L12的编码基因与转录因子的转录激活结构域位于一个表达...
- 司书毅林媛李妍王彦昶蒋建东肖春玲洪斌高娜娜
- 文献传递
- 重组氨基糖苷类双功能修饰酶体外代谢模型的建立及应用
- 本发明提供了一种重组大肠埃希氏菌CGMCC1667及由其诱导表达得到的重组氨基糖苷类双功能修饰酶,还提供了一种重组氨基糖苷类双功能修饰酶的体外代谢模型,并公开了这种模型在筛选氨基糖苷类双功能修饰酶稳定性抗生素和氨基糖苷类...
- 游雪甫李聪然蒋建东杨信怡洪斌王跃明肖春玲孙承航
- 文献传递
- Sansanmycin生物合成基因簇中ssaX基因体内功能分析
- 侍媛媛蔡强李青连李星星雷璇王丽非陈汝贤解云英洪斌
- Sansanmycin生物合成基因ssaX体内功能研究
- Sansanmycins是一组由Streptomyces sp.CPCC 200442产生的几乎只对铜绿假单胞菌和结核分枝杆菌具有抑制活性的尿苷肽类抗生素.此类抗生素肽链骨架中存在着一个非蛋白质源氨基酸m-Tyr,Pac...
- 侍媛媛蔡强李青连李星星雷璇江志波王丽非陈汝贤解云英洪斌
- 关键词:功能分析
- 链霉菌次级代谢调控机制进展被引量:11
- 2004年
- 链霉菌除具有复杂的形态分化特征外 ,还可以产生多种具有重要应用价值的次级代谢产物 ,这两个过程密切相关。因此 ,链霉菌存在着原核生物中罕见的庞大而复杂的调控网络。链霉菌在遗传水平有三个层次的调控 ,分别是 :途径特异性调控、多效调控和全局调控。阐明这些调控网络将为利用代谢工程手段提高次级代谢产物的产量并对其进行结构改造奠定理论基础 ,还将有助于发现新的有价值的天然产物。
- 张艳娟洪斌
- 关键词:次级代谢产物链霉菌原核生物代谢工程形态分化
- 丹酚酸B在巨噬细胞胆固醇外排中的作用被引量:3
- 2013年
- 目的考察丹酚酸B(SAB)对巨噬细胞胆固醇外排的影响。方法分别采用巨噬细胞RAW264.7和PMA诱导的THP-1细胞,利用流式细胞仪检测丹酚酸B对已摄取DiI-acLDL的细胞外排脂质作用的影响,对RAW264.7细胞表面ABCA1蛋白表达水平的影响。采用ABCA1的抑制剂DIDS及小分子干扰RNA的方法检测ABCA1在丹酚酸B诱导的促进脂质外排过程中的作用。进而利用靶向CD36的小分子干扰RNA,通过抑制CD36的表达,检测CD36在丹酚酸B促进载脂巨噬细胞脂质外排过程中的作用。结果采用DiI荧光标记的脂质检测巨噬细胞对脂质的外排作用,结果显示SAB显著增加了荷脂细胞对DiI-acLDL的外排作用。对脂代谢相关转运蛋白表达的检测结果显示,在荷脂的RAW264.7细胞中,SAB能够以一定剂量依赖的方式增加细胞表面ABCA1蛋白水平的表达。进一步研究显示,上述SAB促进外排的作用可被ABCA1的抑制剂或者siRNA的作用消除,确证了ABCA1在SAB介导的脂质外排过程中的重要作用。同样利用CD36小分子干扰RNA将CD36表达抑制后,SAB促进外排的作用消失,说明SAB介导的细胞脂质的外排作用同样依赖于CD36。结论丹酚酸B通过上调ABCA1的表达,促进巨噬细胞胆固醇或脂质的外排,且该作用依赖于ABCA1及CD36,为SAB抗动脉粥样硬化作用新机制的研究提供了重要依据。
- 王丽姜华军杨帆杜郁贾晓健司书毅洪斌
- 关键词:动脉粥样硬化丹酚酸B抗原CD36胆固醇逆转运