沈卓坚
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经丝蛋白轻链多肽在肺癌组织中的表达及其意义被引量：2
- 2012年
- 目的探讨肺癌细胞株及肺癌组织中神经丝蛋白轻链多肽（NEFL）的表达与肺癌患者临床病理特征和生存期之间的相关性。方法链菌素抗生物素蛋白一过氧化物酶（SP）免疫组织化学法检测108例肺癌组织中NEFL的表达，并对108例肺癌患者进行随访观察。非参数秩和检验检测两个独立样本的NEFL的表达差异；Cox比例风险模型分析预后，应用SPSS13．0软件进行统计学分析。结果NEFL的阳性表达率在淋巴结转移阳性和阴性的肺癌患者中，分别为9．4％和32．7％，差异有统计学意义（x20.25.t=8．74，P〈0．01），而与性别、吸烟、组织类型、分化程度、肿瘤分期、肿瘤大小无相关。Cox比例风险模型多因素预后分析显示，肿瘤患者的性别[相对危险度（RR）：-1．030，P〈0．01]、肿瘤分期（RR：0．474，P〈0．01）、淋巴结转移（RR=0．675，P〈0．05）和NEFL表达（RR=-1．147，P〈0．05）与死亡有关（P〈0．05）。结论NEFL的表达与肺癌淋巴结转移有关系，其阳性表达与患者预后呈正相关。
- 沈卓坚黄志权陈柏深胡伟成李海刚陈炬
- 关键词：肺癌神经丝蛋白
- 微小RNA-21通过调控肌球家族蛋白1对食管鳞癌迁移和侵袭的作用
- 2016年
- 目的 观察微小RNA-21（miRNA-21）通过调控肌球家族蛋白1（TPM1）对食管鳞癌侵袭转移的影响.方法 40例食管鳞癌组织及对应癌旁组织标本,聚合酶链反应（PCR）检测miRNA-21表达;随机抽取其中8例,PCR检测miRNA-21表达,Western blot检测TPM1表达.对食管癌细胞株EC109转染,利用反义miRNA-21核苷酸下调miRNA-21、miRNA-21核苷酸前体上调miRNA-21,分别以无义核苷酸转染作为对照组,检测miRNA-21和TPM1表达水平变化,并进行细胞迁移、侵袭功能实验.利用反义miRNA-21核苷酸和TPM1小干扰RNA作共转染,反义miRNA-21核苷酸和TPM1对照双链无义RNA共转染作为对照组,检测miRNA-21和TPM1表达水平变化,并进行细胞迁移、侵袭功能实验.结果 40例食管鳞癌组织中miRNA-21相对表达量为4.02 ±0.12,癌旁组织为0.60±0.11;其中随机8例患者癌组织中TPM1相对表达量为0.09±0.06,癌旁组织为0.87±0.34,与其miRNA-21表达呈负相关.在EC109中miRNA-21表达量为2.55±0.11;与对照组比较,下调miRNA-21表达后（0.30±0.12/2.35±0.32,P＜0.05）,TPM1表达上调（0.74±0.21/0.14±0.05,P＜0.05）,迁移、侵袭能力减弱（P＜0.05）;上调miRNA-21表达后（6.73±0.55/2.45±0.33,P＜0.05）,TPM1表达缺失（0.01 ±0.00/0.17±0.03,P＜0.05）,迁移、侵袭能力增强（P＜0.05）.共转染处理后,实验组较对照组TPM1 mRNA表达下降（0.15±0.03/3.55±1.25,P＜0.05）,miRNA-21表达被抑制（0.24±0.03/0.26±0.04,P＞0.05）,TPM1蛋白出现表达缺失（0.01 ±0.01/0.80 ±0.11,P＜0.05）,EC109侵袭、迁移能力增强（P＜0.05）.结论 在食管鳞癌中,miRNA-21可能通过抑制TPM1表达介导肿瘤侵袭与转移.
- 徐夏陈柏深沈卓坚谢绚陈炬
- 关键词：食管鳞癌微小RNA-21
- AMSS-PCR在肺癌突变基因检测中的价值研究被引量：1
- 2018年
- 背景与目的肺癌驱动基因检测具有重要意义,目前检测方法多样,临床适用性有差异。本研究旨在比较基于扩增阻碍突变系统-聚合酶链反应(Amplification Refractory Mutation System-polymerase chain reaction,ARMS-PCR)技术的试剂盒与一代测序及ARMS-qPCR检测肺癌突变基因的敏感性和特异性,探究突变位点特异扩增法(Amplification Mutation Specific System, AMSS)-PCR技术在肺癌突变基因检测中的应用价值。方法对前期已行ARMS-PCR检测的肿瘤标本进行一代测序及试剂盒检测,比较各种方法的检测结果,并对检测结果进行统计学分析。结果本研究共收集了309例肺癌标本。试剂盒与一代测序符合率97.41%,ARMS-PCR的符合率97.73%。试剂盒与一代测序、试剂盒与实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qPCR)、qPCR与一代测序一致性检验的Kappa值分别为0.946、0.953、0.913。试剂盒以一代测序为参照的受试者工作特征曲线(receiver operatingcharacteristiccurve,ROC)曲线下面积为0.976,以qPCR为参照的ROC曲线下面积为0.975。结论 AMSSqPCR技术能够有效检测肺癌突变基因,具有较好的临床应用价值。
- 金柯谢绚潘越江王科喜陈柏深吴多光沈卓坚王铭辉张惠忠
- 微小RNA-21对食管癌肌球家族蛋白l表达的抑制作用被引量：2
- 2015年
- 目的探讨在食管癌中微小RNA-21（miRNA，miR-21）靶向蒯控肌球家族蛋白1（TPMI）表达的能力。方法对10例食管癌标本、癌旁上皮标本，分别采用定量聚合酶链反臆（（1PCR）和Westernblot检测miR-21（10例）和TPMl表达（6例）；在食管癌细胞株EC109中，采用荧光素酶报道基因实验鉴定miR-21靶向调控TPMI表达的能力；在ECl09中，利用小干扰RNA（siRNA）抑制miR-21，采用Westernblot检测TPM1的表达。结果miR-21在10例食管癌组织中的相对表达量为5．86±1．12，癌旁组织为1．56±0．32；TPM1在6例食管癌组织中的相对表达量为0．42±0．28，癌旁组织为6．58±2．32，miR-21与TPM1表达呈负相关。荧光素酶报道基因实验巾，导入奸生利TPMl后阴性对照组TPM1相对荧光度数为4．36±0．97，而miR-21组为3．06±0．37，两者比较贮译有统计学意义（P〈0．05）；而导人突变型TPM1后，两者比较差异无统计学意义（P〉0．05），说明miR-21靶向抑制TPMI表达。siRNA抑制miR-21后，TPM1从0升到5．68，TPMI表达恢复。结论n食管癌中，miR-21靶向抑制TPM1的表达，可能通过TPM1介导食管癌的侵袭与转移.
- 黎亮陈柏深沈卓坚甘向峰徐夏陈炬
- 关键词：食管癌微小RNA-21靶向
