殷桂香
- 作品数:31 被引量:146H指数:7
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- 一种植物表达载体
- 本发明公开了一种植物表达载体及其应用。该载体按照包括如下步骤的方法得到:在出发表达载体pZP201的HindIII和EcoRI酶切位点间插入SEQ ID NO:4所示DNA片段,得到中间载体I;再向中间载体I中的ScaI...
- 叶兴国佘茂云杜丽璞冯晨徐惠君王新敏殷桂香李欣别晓敏
- 文献传递
- 一种小麦组织培养的方法
- 本发明公开了一种小麦组织培养的方法。该方法包括如下步骤:先将小麦胚诱导培养成胚性愈伤组织;再将所述胚性愈伤组织分化培养成小麦再生植株;所述诱导培养的方法包括如下步骤:将所述小麦胚依次用含有生长素的培养基进行诱导培养、用不...
- 叶兴国殷桂香佘茂云陈朵朵杜丽璞徐惠君别晓敏孙伟珊李欣
- 小麦大龄幼胚再生性能改进与农杆菌转化被引量:11
- 2011年
- 【目的】小麦幼胚再生率与幼胚大小关系密切,改进小麦大龄幼胚再生性能促进小麦转基因研究。【方法】以18个普通小麦基因型和5个硬粒小麦基因型为材料,对其开花授粉后15—17 d的大龄幼胚进行破碎处理、组织培养和农杆菌转化,对转化后的幼胚组织和获得的抗性再生植株分别进行组织化学染色检测和PCR检测。【结果】大龄幼胚培养2 d后破碎处理的再生率为18.2%,显著高于完整胚对照(1.7%),培养2 d后进行破碎处理的再生效果高于4和6 d后破碎处理;不同基因型小麦大龄幼胚破碎处理后再生率为16.9%—46.7%,其中,Bobwhite和中8423大龄幼胚再生率达到了40%以上;大龄幼胚破碎后在弱光条件下培养,再生率进一步提高,较对照(完整胚黑暗培养)提高5.4%—47.4%;农杆菌侵染后GUS瞬时表达率为0—76.7%,其中科农199高达76.7%,其次为Verry(64.4%)和Alondra(47.2%);经PCR检测,农杆菌转化小麦大龄破碎幼胚获得了候选转基因植株。【结论】破碎处理和弱光培养显著提高了小麦大龄幼胚再生率,比对照提高5—10倍;科农199、Verry和Alondra大龄幼胚对农杆菌侵染比较敏感,适宜作为农杆菌转化的受体材料;农杆菌转化小麦大龄幼胚可以获得转基因植株。
- 石珍源殷桂香杜丽璞陶莉丽徐惠君叶兴国
- 关键词:小麦植株再生农杆菌转化
- 非生物胁迫处理对植物离体组织培养再生效果影响研究进展被引量:4
- 2014年
- 植物离体组织培养再生性能受多种因素影响。早期关于提高植物组织培养和植株再生效率的策略往往侧重于基因型筛选、培养基改良和植物生长调节剂搭配等方面,忽略了环境胁迫条件对植物离体培养再生效果的影响。据此,综述了不同胁迫诱导对植物离体组织培养再生的影响,主要包括氧化、渗透、水分、伤害和温度等胁迫。氧化胁迫对植物细胞的再生过程具有双重作用,即氧化胁迫引发植物体内相关抗氧化胁迫酶类合成,从而促进再生,但是发生氧化胁迫的细胞因其细胞膜通透性发生改变,易导致细胞死亡;短期渗透胁迫对植物胚性愈伤组织再生能力具有明显的促进作用;伤害通过影响相关基因表达而对体细胞胚胎产生积极作用;温度对植物体细胞胚胎发生的影响具有发育阶段的特异性以及处理强度的依赖性,适度的温度处理可诱导出较多的胚性愈伤组织。因此,对用于组织培养的外植体进行适当的逆境胁迫前处理,有助于植物组织培养过程胚性愈伤组织的产生,并最终促进植物离体组织培养再生性能的提升。
- 佘茂云殷桂香杜丽璞张平治叶兴国
- 关键词:胁迫植株再生
- 十二个小麦新品种成熟胚再生性能与农杆菌侵染敏感性评价被引量:5
- 2012年
- 小麦成熟胚培养再生率比较低,尤其对优良小麦品种成熟胚再生性和农杆菌侵染敏感性还缺乏研究,一定程度阻碍了转基因小麦有效开展和产业化进程。以扬麦18、扬麦15、扬麦16、新冬18、小偃166和周麦22等12个优良小麦新品种为材料,研究了其成熟胚再生率及其对农杆菌侵染的敏感性。结果表明,12个小麦新品种成熟胚再生率0~35.3%,周麦27最高,扬麦19次之(27.9%),新冬18、石麦B07-4056分别为21.1%和20.0%,其余品种再生率均低于20.0%;12个小麦品种成熟胚愈伤组织农杆菌侵染后GUS基因瞬间表达率0~33.3%,周麦18最高,扬麦15次之(23.8%),扬麦18、周麦22、周麦27和石麦B07-4056虽有表达但频率较低(6.7%~9.1%),其余品种没有观察到GUS基因瞬间表达。认为周麦27、扬麦19等品种适合进行成熟胚培养,周麦18、扬麦15等品种成熟胚适合进行农杆菌转化。优良小麦品种成熟胚再生性能和农杆菌敏感性评价为进一步利用细胞工程和基因工程途径改良小麦奠定了基础。
- 李欣刘凌云杜丽璞殷桂香徐惠君叶兴国
- 关键词:小麦成熟胚愈伤组织植株再生农杆菌转化
- 几个小麦基因型苗期抗旱性鉴定及相关生理指标分析被引量:17
- 2009年
- 为了明确小麦抗旱性与果聚糖含量和叶绿素荧光特性间的关系,选用扬麦6号、扬麦12、新春9号、Bobwhite、宁春27、CB9945、03S58、8139等8个小麦基因型,从分蘖期开始进行干旱胁迫处理,每隔一定时期取叶片测定果聚糖含量,36d后复水,统计存活率,抽穗期测定旗叶叶绿素荧光参数。结果表明,扬麦6号干旱胁迫处理后植株存活率(60.71%)显著高于其他几个基因型(1.19%~28.57%),表现出较强的抗旱性;干旱胁迫期间,扬麦6号叶片中果聚糖含量明显增加,而其他基因型叶片中果聚糖含量几乎没有变化;扬麦6号PSⅡ原初光能转换效率(Fv/Fm)最高(0.7977),显著高于03S58(0.6932)、Bobwhite(0.6879)和宁春27号(0.6285);PSⅡ潜在活性(Fu/Fo)也以扬麦6号最高(3.9484),显著高于Bobwhite(2.7303)、新春9号(2.7187)、03S58(2.4034)和宁春27号(2.1619)。这说明小麦苗期抗旱性与果聚糖含量和叶绿素荧光特性间有一定的关系,抗旱性强的基因型干旱胁迫期间果聚糖含量、叶绿素荧光参数Fv/Fm均较高。
- 殷桂香王瑾徐惠君陶丽莉杜丽璞毛新国田小海叶兴国
- 关键词:小麦抗旱性果聚糖叶绿素荧光参数
- 植物果聚糖合成酶基因克隆及特性分析被引量:4
- 2009年
- 果聚糖(fructan)是蔗糖来源的果糖多聚体,其类型常因聚合度的多寡、分支结构有无、相邻果糖基成键差异及葡萄糖位置不同而多种多样。果聚糖不仅是植物储存非结构性碳水化合物的形式之一,而且在干旱、低温等非生物胁迫中具有保护植物细胞免受伤害的作用。果聚糖作为一种益生素,对人体健康具有保健作用,有效减少或避免结肠癌、心血管疾病及骨质疏松等发病机率。就果聚糖的存在形式、生物合成代谢途径、果聚糖合成酶(fructan biosynthetic enzymes,FBEs)基因克隆和转化等研究做一介绍,并对植物中FBEs结构特点进行了讨论,同时对小麦中FBEs基因的拷贝数、染色体定位及亚细胞定位等研究进行了讨论,为从更多植物中分离FBEs基因,研究FBEs基因的作用方式和表达特性,以及利用转基因技术提高重要作物抗逆性奠定基础。
- 殷桂香佘茂云高翔王瑾叶兴国
- 关键词:果聚糖非生物胁迫基因工程
- 三种适用于作物遗传转化的载体构建与验证
- 为满足植物功能基因组学研究及转基因安全性需要,本研究根据一些国内外引进或商业化的植物表达载体及其相关元件,构建了3个适合于植物,尤其是单子叶植物转化的表达载体,即pAH006、pWMB022和pWMB025.pAH006...
- 佘茂云殷桂香张平治叶兴国
- 关键词:农作物植物表达载体标记基因生物安全
- 文献传递
- 植物组织培养过程中器官发生途径再生植株分子机制研究进展被引量:6
- 2015年
- 综述了植物组织离体培养过程器官发生途径所经历的3个阶段的分子机制,包括已分化器官脱分化、根器官再生和芽器官再生。重点概述了禾谷类作物组织培养再生途径中的细胞遗传学机理。分析了当前植物再生性状分子基础研究存在的3个主要问题,即具有稳定表现的高再生性能植物品种有限,再生性状相关主效基因发掘不足,已鉴定的再生相关基因功能不明显。提出应加强高再生性能植物品种选育,为发掘、控制植物离体组织培养再生关键基因提供丰富的基因资源,推动植物再生性状的分子机制研究。
- 佘茂云殷桂香赵佩杜丽璞张平治叶兴国
- 关键词:离体培养植株再生
- 一种提高小麦成熟胚再生率的培养基及其根癌农杆菌转化方法
- 本发明公开了一种提高小麦成熟胚再生率的根癌农杆菌介导的转化方法及其专用培养基。本发明所提供的提高小麦成熟胚再生率的根癌农杆菌介导的转化方法,包括下述步骤:1)将小麦种子灭菌后在无菌水中浸泡15-18小时,将浸泡后的小麦种...
- 叶兴国殷桂香王艳丽陶丽莉徐明星徐惠君杜丽璞王道文辛志勇
- 文献传递