柯跃斌
- 作品数：100 被引量：222H指数：9
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程理学更多>>
- 饮食业四类人群DNA氧化损伤的尿8-羟基脱氧鸟苷水平分析
- 为了解特定人群DNA氧化损伤情况,比较研究肉类烧烤师、煎炸烹调师、面点师和一般服务员尿中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平.用8-OHdG的酶联免疫试剂盒检测尿中8-OHdG水平,用苦味酸法测定尿中的肌酐,计算8-OH...
- 柯跃斌徐苑苑谭春荣吴丽明
- 关键词：饮食业烹调技术DNA氧化损伤
- 文献传递
- 甲醛对人Ⅱ型肺泡上皮细胞DNA氧化和甲基化水平的影响被引量：4
- 2014年
- 目的：分析甲醛染毒对体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞（A549）内8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷（8-oxo-dG）水平、DNA 5-甲基胞嘧啶（5-mC）含量的影响及其时间-效应和剂量-效应关系，探讨甲醛所致的细胞DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法：用5～20μmol/L甲醛作用于A549细胞，用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平，用免疫荧光和高效毛细管电泳法检测细胞全基因组DNA 5-mC含量改变。结果：甲醛染毒提高了细胞8-oxo-dG水平，但是降低了细胞的DNA 5-mC含量。甲醛致细胞DNA氧化与DNA甲基化呈现不同特点，A549细胞暴露于20μmol/L甲醛后，DNA氧化水平在1周甚至更早时间就已显著增高，而相同条件下DNA甲基化水平的改变需要6周以上的时间，DNA甲基化的改变滞后于DNA氧化。A549细胞经5～20μmol/L甲醛染毒8周后，DNA氧化水平与甲醛剂量呈正相关关系，而同样条件下DNA甲基化水平与甲醛剂量呈负相关关系。结论：甲醛染毒可提高DNA氧化水平，降低细胞DNA甲基化水平。在甲醛的毒作用效应中，细胞DNA氧化损伤可能是早于其DNA甲基化的一个重要分子事件。
- 柯跃斌黄娟朱舟吴双陶功华
- 关键词：甲醛DNA甲基化
- 代表性环境化学污染物致DNA损伤修复机制及相关基因多态性研究
- 庄志雄程锦泉柯跃斌纪卫东刘起展杨淋清任泽舫张文娟陶功华刘建军周丽蒋友胜方道奎李习艺唐焕文
- 主要技术的简要说明：1、表观遗传学技术手段主要包括应用于整体基因组DNA甲基化模式检测的5mC免疫荧光法、高效毛细管电泳法、液闪计数法，应用于特定基因启动子区CpG岛甲基化模式检测的甲基化特异性PCR、甲基化特异性定量P...
- 关键词：
- 关键词：分子生物学方法
- 三氯乙烯所致职业病的发病机制与防治技术研究
- 李智民徐新云张健杰柯跃斌刘国红王金林毛侃琅邱少宏李辉毛吉炎司徒洁刘璐刘健林辉郭妍
- 所属科学技术领域：预防医学与卫生学。主要技术内容：该项目重点开展了三氯乙烯（简称TCE）发病机制研究、临床治疗技术和现场干预措施研究三方面。三氯乙烯发病机制研究：率先开展免疫相关基因、肝代谢酶基因、基因多态性、分子克隆、...
- 关键词：
- 关键词：职业病三氯乙烯发病机制
- 少数民族人群hOGG1基因多态性与生活方式及DNA氧化损伤的关系被引量：4
- 2012年
- 目的为评估hOGG1基因自然变异和基因-环境的交互作用,对中国5个民族人群的953个健康个体的hOGG1基因326位多态性分布进行了调查。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法分析hOGG1基因326位密码子多态性,用高效液相色谱-电化学检测（HPLC-ECD）方法分析尿中8-羟基-脱氧鸟嘌呤（8-OHdG）水平,生活方式相关因素（吸烟、饮酒、肉类和水果摄入）资料通过问卷调查获得。结果中国人群中hOGG1基因的等位基因频率分别为0.16（Ser/Ser）,0.49（Ser/Cys）和0.35（Cys/Cys）。5个民族人群中Ser326Cys多态性频率具有显著性差异（P=0.002）。除Ser326Cys与吸烟有关联外（P=0.027）,hOGG1基因多态性与其他的生活方式因素没有关系。Cys326Cys等位基因健康受试者尿中8-OHdG水平显著升高（P=0.033）。结论各民族人群hOGG1基因存在自然变异。吸烟与Cys/Cys多态性频率有关,hOGG1 Cys326Cys基因型个体DNA氧化性损伤的修复水平较低。
- 吴双蒋友胜袁建辉庄志雄柯跃斌
- 关键词：DNA修复
- 结晶型硫化镍诱发细胞恶性转化过程中基因组总体DNA甲基化的改变被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨结晶型硫化镍（NiS）对体外培养细胞基因组总体DNA甲基化水平的影响.方法 分别以0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2结晶型NiS处理人支气管上皮细胞系（16HBE）24 h,隔天再次进行相同处理,共处理3次;以3μmol/L DNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷（DAC）处理72 h的正常细胞为阳性对照.应用免疫荧光法和SssI甲基转移酶法定性、定量分析结晶型NiS处理细胞和恶性转化细胞（NSTC）基因组DNA总体甲基化的变化.结果 结晶型NiS处理细胞DNA甲基化免疫荧光的强度均有不同程度降低,转化细胞DNA甲基化免疫荧光的强度明显降低.定量分析结果显示,对照组基因组总体甲基化率（mCpG%）为（81.9±7.3）%,0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2的结晶型NiS处理3次的细胞（NiS0.25、NiS0.50、NiS1.00、NiS2.00）基因组总体mCpG%则分别为（77.9±6.2）%、（75.3±6.8）%、（59.5±4.9）%、（67.4±5.1）%.经单因素方差分析显示,不同组间总体mCpG%差异有统计学意义（F=124.95,P＜0.01）,两两比较发现NiS1.00和NiS2.00组与对照组相比,差异均有统计学意义（t值分别为7.64、4.89,P值均＜0.01）;恶性转化细胞（NSTC1、NSTC2）基因组总体mCpG%分别为（46.2 ±4.1）%、（43.6±4.3）%,低于对照组,差异有统计学意义（t值分别为12.79、13.56,P值均＜0.01）.结论 结晶型NiS诱发细胞恶性转化过程中,整体基因组DNA甲基化水平降低.
- 杨淋清纪卫东陶功华张文娟龚春梅周丽刘建军柯跃斌庄志雄
- 关键词：DNA甲基化荧光免疫测定细胞转化硫化物
- 氯化镉对大鼠肾上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶表达及其磷酸化的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 探讨氯化镉染毒大鼠正常肾上皮（normal rat kidney epithelial,NRK）细胞对丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）表达及其磷酸化水平的影响.方法 应用不同剂量（0、1、5、10、20、40 μmol/L）氯化镉染毒NRK细胞24 h和同一剂量氯化镉（10 μmol/L）于不同时间（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h）染毒NRK肾细胞.采用蛋白免疫印迹法检测氯化镉染毒后NRK细胞中MAPK表达水平,并用磷酸化抗体检测MAPK磷酸化水平.结果 不同氯化镉剂量和不同染毒时间染毒NRK细胞,发现MAPK表达无明显改变,但MAPK磷酸化蛋白表达量较对照组升高.氯化镉浓度在10 μmol/L时p-ERK1/2表达明显,表达量为1. 00±0.06;20 μmol/L和40 μmol/L剂量组表达量分别为2.58±0.11、2.76±0.23,比10 μmol/L组高1.58倍和1.76倍,差异有统计学意义（F=827.70,P＜0.01）;氯化镉浓度为20 μmol/L（2.47±0.20）和40 μmol/L（3.73±0.25）时p-p38MAPK表达量比对照组（1.00±0.02）高1.47倍和2.73倍,差异有统计学意义（F=280.06,P＜0.01）.p-ERK1/2和p-p38MAPK表达量与氯化镉浓度存在剂量-效应关系（p-ERK1/2相关系数为r=0.919,t=4.69,P=0.009;p-p38MAPK相关系数为r=0.945,t=5.79,P=0.004）.MAPK磷酸化蛋白表达水平也与染毒时间相关,p-ERK1/2在染毒1 h（1.26±0.11）时表达明显,染毒4 h（1.51±0.07）和8 h（3.53±0.23）时表达量是对照组（1.00±0.02）的1.5倍和3.5倍,差异有统计学意义（F=427.82,P＜0.001）;p-p38MAPK在染毒1 h（1.31±0.07）时表达也明显增加,染毒4 h（3.53±0.32）和8 h（4.41±0.38）时表达水平是对照组（1.00±0.03）的3.5倍和4.4倍,差异有统计学意义（F=280.06,P＜0.001）.结论 氯化镉染毒NRK细胞可引起MAPK蛋白磷酸化水平明显升高,可能与MAPK的激活有关.
- 徐新云柯跃斌丁利平袁建辉周丽李学余刘月峰
- 关键词：氯化镉P38丝裂原活化蛋白激酶类JNK丝裂原活化蛋白激酶类氧化磷酸化
- 慢病毒介导的RNA干扰技术构建hOGG1和hMTH1基因缺陷细胞模型
- 2011年
- 目的:分别建立8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(human 8-hydroxyguanine glycosylase,hOGG1)基因和8-羟基鸟嘌呤核苷酸酶(human Mut T homlogue,hMTH1)基因缺陷细胞模型,为进一步研究两个基因的相互关系提供理想的研究平台。方法:利用慢病毒载体介导的小发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA)转入人胚胎肾细胞(293FT)包装慢病毒,用所得到的慢病毒感染人胚肺成纤维细胞(HFL),杀稻瘟菌素筛选稳定表达的细胞株,荧光显微镜下观察慢病毒的包装效率和感染效率,Real-time RT-PCR鉴定基因干扰效果。结果:得到了滴度较高的慢病毒,感染靶细胞后得到hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型,hOGG1 mRNA和hMTH1mRNA表达水平分别比正常HFL细胞下降了90%和60%。结论:通过慢病毒包装技术,成功构建hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型。
- 黄娟袁建辉杨淋清柯跃斌
- 关键词：慢病毒RNA干扰HOGG1
- 塑化剂邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）通过中枢与外周信号通路诱导c3H小鼠肥胖与甲状腺功能减退的分子机制研究
- 【目的】既往研究表明塑化剂DEHP可诱导人类和啮齿动物出现肥胖和甲状腺功能减退,但其内在分子机制不明。本研究的主要目的是探明DEHP诱导肥胖症和甲状腺功能减退的内在分子机制,并尝试探索两种健康风险之间的内在关联。【材料和...
- 吕子全程锦泉黄素丽张艳炜吴双张倩耿艺介柯跃斌
- 关键词：肥胖甲状腺功能减退瘦素抵抗
- 文献传递
- 邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯长期低剂量染毒对HepG2细胞DNA甲基化的影响
- 【目的】探索塑化剂邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）长期低剂量染毒对HepG2细胞全基因组DNA甲基化和细胞毒性的影响。【材料和方法】用1.5、15、150μg/mL DEHP对HepG2细胞进行24 h持续染毒,...
- 吕子全谢杏柯跃斌
- 关键词：DNA甲基转移酶1DNA甲基化HEPG2细胞
- 文献传递
