李艳艳 作品数:50 被引量:40 H指数:5 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 云南省技术创新人才培养基金 云南省应用基础研究计划面上项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
人工繁育恒河猴的肺炎链球菌携带状况调查及分析 2021年 目的探究人工繁育的恒河猴群体中肺炎链球菌的自然感染状况,为肺炎链球菌感染的临床诊断和治疗提供参考。方法从恒河猴猴群中随机采集20只婴猴、30只成年猴和30只老年猴的鼻拭子和咽拭子样本,采用细菌培养和实时荧光定量PCR方法同时筛查样本中肺炎链球菌的携带情况,并对筛查结果为阳性的婴猴的亲代母猴进行肺炎链球菌筛查。再结合革兰染色法、奥普托欣药敏试验、胆汁溶解试验、菊糖发酵试验和PCR扩增测序对样本进行进一步鉴定。结果恒河猴婴猴携带肺炎链球菌的检出率为20%(4/20),而这4只阳性婴猴的亲代母猴检测结果均为阴性。成年恒河猴和老年恒河猴中肺炎链球菌的检出率均为0%。细菌培养物在形态学上观测显示,该菌为灰白色凸起状,周围草绿色溶血环,呈脐窝状,为典型肺炎链球菌的菌落特征。革兰染色结果显示为阳性,胆汁溶解试验和菊糖发酵试验结果均呈阳性,并且该菌对奥普托欣敏感;以上结果表明本次从婴猴鼻咽拭子分离到的4株菌落均为肺炎链球菌。结论本调查发现在恒河猴中肺炎链球菌自然感染群体主要为婴猴,婴猴携带率约为20%,其鼻、咽部均为该菌寄住场所,且未发现母婴垂直传播情况。 刘雨 李艳艳 张伟 杨凤梅 刘权 李咏洁 靳玮华 段素琴 王俊斌 陈丽雄 徐鸿界 赵远 和占龙关键词:恒河猴 肺炎链球菌 携带率 野生树鼩与人工饲养树鼩消化道不同部位微生物组成的比较研究 被引量:2 2020年 目的以树鼩为研究模型,探讨野生树鼩与人工繁育树鼩不同肠段的菌群组成。方法分别收集3只健康野生及人工繁育树鼩七个胃肠段样本,提取细菌总DNA,采用高通量测序技术对16S rRNA基因的V3-V4高变区测序,分析比较菌群结构及多样性。结果不同肠段Alpha指数多样性分析显示野生组与人工繁育组树鼩在盲肠和胃Shannon指数存在显著差异(P<0.05)。野生组与人工繁育组各肠段微生物组成存在较大差异,门水平上,野生组直肠、结肠、盲肠及胃四个部位中Firmicutes菌门的平均占比显著高于人工繁育组(P<0.05);人工繁育组直肠、结肠、盲肠及回肠内Spirochaetes菌门的平均占比显著高于野生组(P<0.05);野生组直肠内Bacteroidetes菌门的平均占比显著高于人工繁育组(P<0.05);属水平上,野生组明显高于人工繁育组的主要菌属为:回肠、空肠和胃内的Weissella菌属,直肠内的Bacteroides菌属以及回肠段内的Lactococcus菌属;人工繁育组明显高于野生组的主要菌属为:直肠、结肠、盲肠及回肠内的Brachyspira属,盲肠和胃内的Prevotella9菌属,盲肠和空肠内的Streptococcus属以及回肠中的Lactobacillus菌属。不同肠段菌群功能基因预测显示两组共有5个解剖部位17个基因类别之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论野生树鼩与人工繁育树鼩各肠段菌群组成差异较大;各肠段细菌功能差异较大,且与其生理功能、饮食结构有一定关联;在肠道菌群研究中,应充分考虑粪便样品微生物的组成是否能够完全代表肠道微生物的组成。 李艳艳 杨凤梅 王俊斌 陈丽雄 段素琴 杨亚平 刘雨 和占龙 马进 赵远关键词:肠道菌群 树鼩 肠段 恒河猴婴猴离乳阶段行为观察及分析 2014年 目的了解婴猴离乳期的行为特点及规律,初步探讨婴猴早期断奶后心理和行为的变化。方法采用随意取样和时间记录法对2012年出生的290只婴猴离乳后的行为进行6个月的观察记录。结果离乳后1个月内出现团抱、吸手指、吸同伴身体3种行为,团抱、吸手指行为在第2、3月显著上升(P<0.05),吸同伴身体行为在第2月显著上升(P<0.05);第2个月,新增的踱步、吸生殖器的行为于第3个月显著上升(P<0.05),爬跨行为随时间的延长无明显变化;第3个月新增吸脚趾行为的比例未随时间的变化而发生改变。其中,雌性同笼发生团抱的比率显著高于异性及雄性同笼(P<0.05);雄性婴猴较雌性婴猴更易发生踱步行为;雄性婴猴吸手指及吸同伴身体的行为发生率显著低于雌性(P<0.05);吸脚趾行为雌、雄发生率无显著差异。结论通过观察婴猴离乳后的行为,观察到团抱、踱步、吸脚趾、吸手指、吸生殖器、吸同伴身体和爬跨7种行为,且各行为均随时间的变化而递增。团抱行为反映了恐惧心理;吮吸行为代表了生理需求及防卫心理;踱步行为初期是无目的,逐渐变成焦虑心理的体现。为研究人类婴幼儿早期断奶后心理和行为的变化,开展心理学、行为学等方面的评估实验提供研究思路和模型。 李艳艳 陈丽雄 乞素冬 王俊斌 杨凤梅 赵远 鲁帅尧 禹文海 和占龙关键词:离乳 恒河猴 食蟹猴奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:3 2020年 目的通过对引进食蟹猴肠道微生物检测分离到的奇异变形杆菌进行鉴定和药敏实验,为引进的实验猴微生物检测和如何开展饲养管理、疾病防控提供理论和技术支撑。方法肛拭子采集食蟹猴粪样,进行细菌分离培养、生化鉴定、药敏试验和小鼠致病性试验。结果 60只食蟹猴中有8只分离到可疑细菌,经鉴定为奇异变形杆菌,表明该群体食蟹猴奇异变形杆菌感染率为13. 3%;药敏试验结果显示该菌对头孢曲松、头孢赛肟,头孢哌酮、头孢唑啉、青霉素等高度敏感,对阿米卡星、庆大霉素、氨苄西林钠、呋喃妥因等中度敏感,对诺氟沙星、四环素、低度敏感、对杆菌肽、环丙沙星、卡那霉素、林可霉素和呋喃唑酮产生耐药性;小鼠致病性试验表明分离到的菌株对小鼠有较强的致病性。结论食蟹猴奇异变形杆菌感染相对较高,该菌对头孢菌素类抗生素较敏感,可在临床中作为首选药物来进行疾病的治疗。该菌有较强的致病性,对食蟹猴群体有潜在的危害性,在平时饲养管理工作中应引起重视。 刘权 刘雨 李艳艳 杨凤梅 马进 和占龙 禹文海 赵远关键词:食蟹猴 奇异变形杆菌 药敏试验 柯萨奇病毒B组2型SYBR GreenⅠRT-PCR检测方法的建立 2020年 目的:建立一种简单快速、灵敏、特异检测柯萨奇病毒B组2型(CVB2)的SYBR Green I逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法。方法:根据CVB2病毒衣壳蛋白1(VP1)的基因保守序列设计带有T7启动子的特异性引物,构建CVB2-T载体的重组质粒,以体外转录获得的RNA为标准品,绘制标准曲线;建立检测CVB2的SYBR Green I RT-PCR方法,对该方法特异性、灵敏性及重复性进行评价。结果:该方法在102~109拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,最低检测限度为102拷贝/μL,标准曲线中R^2为0.996,扩增效率为102.2%;且该方法对肠道病毒71型(EVA71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)、柯萨奇病毒A组10型(CVA10)和柯萨奇病毒A组6型(CVA6)均无交叉反应;组间和组内重复性实验中变异系数(CV)均小于1%。结论:本研究建立的检测CVB2的SYBR Green I RT-PCR方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性,可用于CVB2病毒的快速检测和定量分析。 杨亚平 段素琴 杨凤梅 李艳艳 刘权 刘雨 赵远 马绍辉 和占龙关键词:手足口病 逆转录聚合酶链反应 柯萨奇病毒感染 一例实验猕猴会阴疝的诊治 2023年 在本饲养场发现一只雌性猕猴肛门下方有一约6 cm×6 cm肿大凸起,饮食正常、体温正常、精神状况良好。对其凸起物进行触诊,质地坚硬,用针管刺入抽取有淡黄色液体流出,随着液体的抽取凸起物体积变小,血液生理生化检测,红细胞、血红蛋白、红细胞压积低于参考值,血小板、血小板压积、平均血红蛋白浓度、单核细胞比率、中性粒细胞数、单核细胞高于参考值。白蛋白与球蛋白比值、总蛋白、白蛋白、γ-谷氨酸转肽酶、尿酸、铁低于参考值。谷草转氨酶、尿素、肌酐高于参考值。根据临床症状,初步怀疑该猕猴肛门下方为会阴疝,结合临床血常规、生化指标的检测,建议尽快进行手术修复。通过临床症状、血常规、生化指标的检测,确诊该猕猴所患疾病为会阴疝,通过麻醉外科手术修复治疗及术后护理,患病猕猴痊愈。 陈丽雄 王俊斌 靳玮华 李艳艳 赵远 马进 杨凤梅 徐鸿界 刘权 陈丽玲关键词:猕猴 会阴疝 诊治 恒河猴肺中阴沟肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析 被引量:2 2020年 目的对死亡的恒河猴肺脏炎症组织采样进行病原菌分离、培养、鉴定及药敏试验,确诊病原菌及药物敏感性,指导疾病诊疗、预防和临床用药。方法解剖柜条件下解剖死亡猴,分别采集肉眼病变明显和正常肺组织,用灭菌接种环在肺切面部位采样,接种在SS琼脂培养基进行培养,培养时间24 h观察细菌生长情况,进行生化鉴定和8种药敏试验。结果菌落呈白色或乳白色、圆形、湿润、不透明,进一步分离培养,经梅里埃微生物生化鉴定,确定该细菌为阴沟肠杆菌,ID:99.9%,T:0.71,ID编码:35074753311;药敏试验表明该菌对氨苄西林,头孢呋辛中等敏感;对诺氟沙星、阿米卡星、庆大霉素、头孢曲松、头孢哌酮,头孢噻肟敏感。动物实验表明该分离菌对实验小鼠具有致病性。结论该恒河猴肺部感染阴沟肠杆菌,头孢哌酮,头孢噻肟等药物可作为治疗临床用药。 李艳艳 禹文海 杨凤梅 刘权 陈丽雄 王俊斌 马进 徐鸿界 杨亚平 赵远 和占龙关键词:阴沟肠杆菌 恒河猴 药敏试验 中国西南地区猕猴MHCⅠ类部分等位基因调查 2013年 采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)分型方法对中国西南地区猕猴的MHCⅠ类A*01、A*02、A*08、B*01和NA7等共5个等位基因进行检测。结果显示,在云南猕猴群体中测出了A*01、A*02、A*08、B*01和NA7等位基因,检出率分别为1.27%(2/157)、69.43%(109/157)、11.46%(18/157)、21.02%(33/157)、31.21%(49/157);四川猕猴群检测出了A*02、B*01和NA7等位基因,检出率分别为46.67%(7/15)、13.33%(2/15)、46.67%(7/15);贵州猕猴群检出了A*01、A*02、A*08、B*01和NA7等位基因,其检出率分别为2.5%(2/80)、65%(52/80)、1.25%(1/80)、25%(20/80)、72.5%(58/80);广西猕猴检测出了A*02、B*01和NA7等位基因,检出率分别为60%(6/10)、10%(1/10)、50%(5/10)。中国西南地区猕猴群携带的MHCⅠ类等位基因的频率存在显著性差异(P<0.05)。本研究初步分析了MHCⅠ类等位基因分布情况,为今后开展相关研究奠定了基础。 和占龙 禹文海 杨凤梅 赵远 鲁帅尧 李艳艳 乞素冬 刘龙丁关键词:猕猴 等位基因 CV-B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法和用途 本发明属于动物模型构建技术领域,具体提供了一种CV‑B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法和用途,其构建方法为通过鼻腔滴注的方式对啮齿动物模型感染CV‑B1,建立CV‑B1感染的啮齿动物手足口病模型。本发明建模方法时间短... 杨凤梅 李咏洁 和占龙 李艳艳 张伟 靳玮华 徐鸿界 李明学 刘权 陈丽雄 孙文亭 张凡邦 唐洁 邓自君基于线粒体D-loop基因全序列分析贵州、四川、广西恒河猴群体遗传多样性 目的从分子水平探讨贵州、四川、广西恒河猴群体遗传多样性,为今后开展恒河猴遗传资源的保护及合理开发利用提供借鉴和背景资料。方法采用PCR直接测序法测定贵州、四川、广西恒河猴38份样品的线粒体D-loop基因全序列,用MEG... 禹文海 马进 赵远 鲁帅尧 杨凤梅 李艳艳 王俊斌 陈丽雄 徐鸿界 刘权 和占龙关键词:恒河猴 线粒体DNA 单倍型 遗传多态性 文献传递