李琦
- 作品数：21 被引量：84H指数：6
- 供职机构：西北工业大学生命学院空间生物实验模拟技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 蕹菜45SrDNA染色体定位和核型分析
- 2006年
- 利用荧光原位杂交技术(FISH),定位并分析了45SrDNA在蕹菜中期染色体上的位置,其杂交信号有两个,都位于第4对染色体,一个位于着丝粒附近的长臂上,信号弱;另一个位于离着丝粒较远的长臂上,信号强。核型分析的结果显示,蕹菜的核型为:2n=2x=30=26m(4SAT)+4sm,属于1A型,染色体总长度为12.93μm。
- 吴建桥李俊李琦马璐李立家
- 关键词：蕹菜FISH核型
- 原子力显微镜在染色体研究中的应用被引量：1
- 2009年
- 原子力显微镜(Atomic force microscopy,AFM)是一种具有超高分辨率的显微成像仪器,可在空气、真空和液体环境下对样本的表面结构进行实时观察。文章介绍了AFM的工作原理,AFM相对于其他种类显微镜在观察生物样本方面的显著优势,并综述了AFM在染色体研究中的应用和进展。
- 李琦郑琪丁焰马璐李立家
- 关键词：原子力显微镜染色体超微结构
- 小分子热休克蛋白的结构与功能被引量：7
- 2017年
- 小分子热休克蛋白(small heat shock protein,sHsp)是相对分子质量介于12~43 kDa的热休克蛋白家族成员,广泛存在于生物体内。根据相关报道,该类蛋白在组成上都含有α-晶状体蛋白结构域(α-crystalline domain,ACD)、N端臂和C端延伸结构。sHsp是生命体中一种重要的分子伴侣,对蛋白质的变性过程有很强的保护作用。生物体中sHsp的生物状态发生改变会引起机体发生病变,而sHsp的正常存在则可以延缓细胞衰老,并降低细胞凋亡率。现综述有关sHsp在细胞凋亡中的控制作用,以及与其相关的神经退行性疾病、癌症、白内障等多种病变的发病机制,以期为相关研究提供参考。
- 李艳张国强邵东燕师俊玲黄庆生杨慧李琦靳明亮
- 关键词：小分子热休克蛋白分子伴侣疾病
- 酵母表达肌肉生长抑制素前肽发酵工艺的优化
- 2009年
- 突变型肌肉生长抑制素前肽(MMP)在治疗肌肉萎缩症和培育多肌肉牲畜上有着广泛的应用前景。以重组表达MMP的毕赤酵母工程菌为模式,对该工程菌在30L发酵灌中培养与诱导条件进行优化,建立该表达系统大规模发酵的最佳生产条件,以期获得最短的发酵时间和最低的生产损耗。毕赤酵母发酵过程通常分为3个阶段:分批培养(基础培养)阶段、分批补料培养阶段、诱导阶段。对发酵过程的第2与第3阶段进行了优化。通过分步提高甘油流加速度:以20mL/L·h-1的速度流加5h、以30mL/L·h-1的速度流加5h、以50mL/L·h-1速度流加14h,并通入纯氧气,维持60%的溶氧度,使甘油流加阶段的时间从常规的48h缩短至24h,即只需24h即可达到常规方法48h才能达到的菌体密度。在诱导表达阶段,通过甘油与甲醇的交替流加,同时对发酵液中甲醇含量的实时监测,保持甲醇的浓度不超过0.5%的高限,使诱导的时间从常规的72h缩短至36h,而且表达量提高了约1倍。优化后,整个发酵周期从120～148h缩短至72～80h,显著提高了MMP蛋白的生产效率。
- 黄庆生李琦黄勇商澎张明杰
- 关键词：发酵毕赤酵母肌肉生长抑制素
- K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果
- 2014年
- 目的:评价新建立的K562工程细胞联合IL-2扩增方案对人NK细胞扩增和活化的效果。方法:采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血PBMC并分离NK细胞,采用前期构建的K562工程细胞(将IL-15、4-1BBL和IL-18在白血病K562细胞上进行跨膜表达获取)联合IL-2培养方案对NK细胞进行扩增和活化,以流式细胞术检测NK细胞的扩增效果和NK细胞表面受体表达水平,CCK-8法检测扩增后NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性和ADCC活性,CCK-8法检测在培养方案扩增末期加入TKD多肽对NK细胞的活化效果。结果:对于健康志愿者的NK细胞,新建立扩增培养方案可使NK细胞在PBMC中的比例提高至(93±3)%;使NK细胞中活化性受体NKG2D、CD94、NKp30、NKp44和NKp46的比例分别提高60%、40%、20%、40%和63%,而抑制性受体的表达变化不大;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、肺癌细胞A549、肝癌细胞SMMU-7721和乳腺癌细胞MCF-7的杀伤活性分别提高了19%、29%、26%和28%,其ADCC活性从(33±5.6)%上升至(65±12)%;方案中增加TKD可使NK细胞的杀伤活性从(86±4)%提高至(96±2)%。对于肿瘤患者的NK细胞,新扩增方案使其在PBMC的比例提高至(90.0±8.0)%,其对K562细胞的杀伤活性提高了17%左右。结论:K562工程细胞联合IL-2扩增方案可高效扩增NK细胞,明显激活其杀伤活性,扩增和活化的NK细胞可满足临床治疗的需要。
- 叶琳洁黄庆生李琦张明杰马旭东杨慧师俊玲
- 关键词：细胞毒活性体外扩增活化性受体抑制性受体
- 模拟微重力环境下乳酸菌生物学效应的初步研究
- 据文献报道，空间环境下肠道致病微生物如大肠杆菌、变形杆菌等数量有所增加，而以双歧杆菌和乳杆菌为代表的益生菌数量则显著降低.已有研究显示，空间环境下肠道致病微生物的毒力、致病性等生物学性能均有所提高.因此，益生菌数量的减少...
- 邵东燕师俊玲商澎黄庆生杨慧靳明亮李琦
- 关键词：模拟失重乳杆菌生物学效应抑菌活性
- 白细胞介素对NK细胞的调控作用及其分子机制被引量：6
- 2012年
- 自然杀伤(natural killer,NK)细胞是一种大颗粒淋巴细胞,能够介导非特异性免疫应答,在机体抗肿瘤、抗感染等过程中发挥重要作用。白细胞介素通过影响NK细胞的分化、成熟、增殖和细胞毒作用参与对其免疫功能的调控。本文综述了白细胞介素对NK细胞功能的调控作用及其可能的分子机制。
- 李琦梅其柄张明杰黄庆生
- 关键词：自然杀伤细胞白细胞介素免疫调节
- 人NK细胞体外高效扩增的实验研究被引量：10
- 2008年
- 目的:建立人NK细胞体外大量扩增的方法。方法:采用基因工程方法,在K562细胞上同时表达IL-15、IL-18、4-1BBL3种基因,构建特定的K562工程细胞作为刺激细胞。IL-15、IL-18基因分别与一段特殊的跨膜蛋白基因融合,4-1BBL直接跨膜表达,使这3种蛋白在K562细胞中表达后锚定于细胞膜表面。其次,以照射致死的该K562工程细胞作为刺激细胞,以人外周血单个核细胞(PBMC)为扩增培养对象,通过与IL-2的共刺激作用,使NK细胞在体外培养条件下得到大量的扩增。结果:经过21d的刺激培养后,CD56+CD3-细胞数量扩增了(520±75)倍。CD56+CD3-细胞的纯度从培养前占PBMC的7%±4%到扩增后占总细胞比例的93%±3%。PBMC中的T细胞基本上没有得到扩增,扩增后的细胞中CD3+细胞只占2%±1.2%。扩增的细胞具备了NK细胞的基本特征和生物学特性,除了CD56+CD3-外,还对扩增的NK细胞上NKG2D、NKp46、NKp44、NKp30、CD94、CD158b、CD158a、NKB1、NKAT2等标记进行了验证。细胞毒实验表明,在效应细胞∶靶细胞为5∶1时,扩增的NK细胞的杀伤率达到了95%±4%。结论:建立的NK细胞体外扩增方法,达到了较高的扩增水平,且扩增的细胞活性较好。本方法以PBMC为原始材料,能够实现NK细胞体外的大规模制备,这将为抗病毒与抗肿瘤的NK细胞免疫治疗奠定基础。
- 黄庆生李琦黄勇商澎张明杰
- 关键词：扩增自然杀伤细胞白细胞介素15白细胞介素184-1BB配体
- 模拟失重对人自然杀伤细胞毒活性的影响被引量：4
- 2009年
- 目的研究模拟失重状态下人NK细胞的细胞毒活性并对其活性变化的机制进行初步的探讨。方法采用高均一性的人NK细胞作为模型,以回转细胞培养模拟失重状态。人NK细胞经历48h和72h的模拟失重后,测定其杀伤率,并在mRNA水平检测NK细胞穿孔素基因、激活性受体基因以及抑制性受体基因的表达水平。结果模拟失重48h和72h的人NK细胞,其杀伤率比对照组分别下降了16%(P<0.05)和26%(P<0.05)。通过对模拟失重72hNK细胞mRNA的定量分析,发现激活性受体NKG2D基因表达下调,抑制性受体NKG2A基因表达上调,而穿孔素基因表达没有显著性变化。经历72h模拟失重的人NK细胞,回到正常条件下培养6d后,其细胞毒活性才恢复至正常水平。结论模拟失重可以导致人NK细胞杀伤活性的下降,其原因可能与NKG2A及NKG2D受体表达的变化有关。
- 黄庆生李琦黄勇商澎张明杰
- 关键词：失重模拟NK细胞细胞毒活性NKG2D受体
- 应用原子力显微镜对玉米染色质纤丝及染色体骨架的研究(英文)
- 2010年
- 应用原子力显微镜对经化学方法预处理的玉米染色体超微结构进行了研究。原子力显微镜观察的结果揭示,经30%醋酸处理的玉米染色体表面呈现出不均一的颗粒状结构。当缩小扫描范围后,在染色体表面发现直径分别为30和100 nm的两种染色质纤丝。100 nm的染色质纤丝由30 nm染色质纤丝螺旋缠绕而成。在经25%胰酶处理的玉米染色体上发现了两种类似的螺旋状染色质纤丝结构,其直径分别为30和100～150 nm。较细的染色质纤丝螺旋缠绕成较粗的纤丝,进而构成整个染色体。经低离子浓度溶液抽提,用原子力显微镜观察到了玉米染色体的染色体骨架结构。这种染色体骨架呈不规则的纤维网状,这些网状纤维在染色体中部显得较为紧密,在染色体的边缘则显得较松散。这一结果暗示染色体是由不同级别的染色质纤丝螺旋缠绕构成,为染色体的多级螺旋结构假说提供了新的证据。同时发现染色体骨架并不是呈轴样的结构存在,而是保留了染色体的基本形态,这种骨架形状也许是由分散在染色体中的染色体骨架蛋白在低离子浓度溶液抽提的过程中凝缩形成的。
- 李琦丁焰贾斌黄庆生
- 关键词：原子力显微镜染色体骨架
