李威
- 作品数：6 被引量：4H指数：2
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- 苔藓合剂促进大鼠颊黏膜成纤维细胞增殖的实验研究
- 2013年
- 目的:观察苔藓合剂对大鼠颊黏膜成纤维细胞增殖的影响,探讨该合剂治疗扁平苔藓的作用机理。方法:将第4代大鼠颊黏膜成纤维细胞分别于含药血清、无药血清和胎牛血清中培养,用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞增殖活性。结果:含药血清组细胞增加显著,与其他2组差异有统计学意义。结论:苔藓合剂作用于大鼠颊黏膜成纤维细胞,可以促进该细胞增殖,大大增加了该细胞对病变区域的修复能力,加速了病变的愈合。
- 张子建高毅李威王竞超
- 关键词：口腔扁平苔藓增殖
- 活血化瘀补肾壮骨中药促进BMP基因克隆转染犬牙髓细胞增殖的实验研究
- 2012年
- 目的观察活血化瘀补肾壮骨含药血清对骨形成蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)绿色荧光融合蛋白(green-fluorescent protein,GFP)真核表达质粒(pEGFP-N1-BMP2)在体外转染的犬牙髓细胞(dogdental pulp cells,DDPCs)增殖情况的影响,探讨活血化瘀补肾壮骨中药在牙本质改建形成中的作用机制。方法将BMP2-DDPCs分别于活血化瘀补肾壮骨含药血清组(A组)、无药血清组(B组)和胎牛血清组(C组)中培养。分别于24、48、72h用溴化-3-(4,5-二甲基噻唑基-2)-2,5二苯基四氮唑[3-(4,5-dimethythiazol-2-y1)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测BMP2-IDDPCs增殖活性。结果 BMP2-DDPCs分别在A、B、C 3组中培养后,细胞的形态相同。3组细胞随着培养时间的延长,细胞数量逐渐增加,A组增加更为显著,与其他2组差异有统计学意义(P<0.05)。结论活血化瘀补肾壮骨中药含药血清作用于BMP2-DDPCs,促进了该细胞增殖活性,血化瘀补肾壮骨中药含药血清大大增加了组织工程重要环节的种子细胞的数量。
- 刁志虹高毅李威
- 关键词：细胞增殖活血祛瘀剂
- BMP2基因转染犬牙髓成纤维细胞与异种烧结骨复合组织工程的实验研究被引量：3
- 2011年
- 目的构建骨形成蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)绿色荧光融合蛋白pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,用其在体外转染犬牙髓细胞(dog dental pulp cells,DDPCs),利用构建的种子细胞BMP2-DDPCs与异种烧结骨(xenogeneicbone ceramice,XBC)复合,检测BMP2-DDPCs增殖活性,扫描电镜观察BMP2-DDPCs在异种烧结骨中的生长情况,评价异种烧结骨作为支架材料的可行性,为将人BMP2基因转染的牙髓成纤维细胞与异种烧结骨复合进行牙体修复的研究奠定基础。方法构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,采用阳离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的犬牙髓细胞,将构建的种子细胞BMP2-DDPCs与异种烧结骨复合,MTT法检测BMP2-DDPCs增殖活性以及应用扫描电镜观察BMP2-DDPCs在异种烧结骨中的生长情况。结果成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,并成功转染犬牙髓细胞。BMP2-DDPCs复合异种烧结骨组的细胞增殖活性与单层贴壁培养BMP2-DDPCs组的细胞增殖情况差异无统计学意义(P>0.05)。说明异种烧结骨上黏附的牙髓细胞增殖情况良好。扫描电镜观察异种烧结骨上BMP2-DDPCs黏附、生长的情况,可见支架材料的孔径为100～600μm,材料表面粗糙,利于细胞的黏附生长;孔隙中可见大量BMP2-DDPCs贴附于材料上,生长旺盛、伸展良好。结论 BMP2-DDPC_s可在异种烧结骨表面及孔隙中生长、增殖,异种烧结骨可以作为牙组织工程的支架材料。
- 冯艳红刁志虹高毅李威
- 关键词：骨形态发生蛋白质类牙髓
- 骨形成蛋白2基因转染对犬牙髓细胞生物学特性的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)绿色荧融合蛋白pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,然后再用其在体外转染犬牙髓细胞(DDPCs)形成BMP2-DDPCs细胞,观察BMP2基因转染对牙髓细胞生物学特性的影响。方法构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,采用阳离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的DDPCs,检测BMP2-DDPCs碱性磷酸酶(ALP)活性,骨钙素(OC)产量和Ⅰ型胶原合成量等指标的测定,研究BMP2基因转染对牙髓细胞生物学特性的影响。结果成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,对构建的BMP2真核重组质粒用XhoI、HindIII进行双酶切,其产物进行琼脂糖凝胶电泳后,在1.2、4.7kb可见两条特异条带;并进行全基因序列测序,报告100%符合,证明pEGFP-N1-BMP2重组质粒构建成功。BMP2-DDPC中ALP活性,OC产量和Ⅰ型胶原合成量增加,与对照组DDPCs、N1-DDPCs相比差异有统计学意义(P<0.05),通过增强ALP、OC和Ⅰ型胶原等成骨标志物的表达,促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化。结论 pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒转染后的牙髓细胞,具有成牙本质细胞的特征。
- 刁志虹高毅冯艳红李威
- 关键词：骨形成蛋白2基因转染真核表达质粒牙髓细胞
- 骨形态发生蛋白2基因转染犬牙髓细胞被引量：2
- 2012年
- 背景:研究发现骨形态发生蛋白2具有诱导间充质细胞向成骨细胞表型分化以及诱导新骨及修复性牙本质形成的能力。目的:通过对细胞超微结构的分析,探讨骨形态发生蛋白2基因转染的犬牙髓细胞,向成牙本质细胞转化的过程。方法:将培养的性状稳定的第4代犬牙髓细胞分为3组:基因转染组转染pEGFP-N1-BMP-2基因,空白载体转染组转染EGFP-N1空白荧光载体,未转染组不转染。结果与结论:成功构建pEGFP-N1-BMP-2真核表达质粒,并成功将其转染犬牙髓细胞,pEGFP-N1-BMP-2质粒转染促进犬牙髓细胞分泌骨形态发生蛋白2。pEGFP-N1-BMP-2质粒转染有促进牙髓细胞碱性磷酸酶活性的作用。透射电镜观察结果显示:转染后的犬牙髓细胞具有成牙本质细胞的形态特点。说明pEGFP-N1-BMP-2真核表达质粒转染后的牙髓细胞,具有成牙本质细胞的特征。
- 冯艳红刁志虹高毅李威
- 关键词：骨形态发生蛋白2真核表达质粒基因转染牙髓细胞
- BMP2基因转染犬牙髓细胞的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的构建骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)绿色荧光融合蛋白pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,然后再用其在体外转染犬牙髓细胞,探讨BMP2基因转染对牙髓细胞BMP2基因表达的影响,及是否表达BMP2蛋白。方法构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,采用阳离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的犬牙髓细胞,检测转染后细胞的BMP2基因表达及蛋白表达情况。结果成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,对构建的BMP2真核重组质粒用XhoI、HindIII进行双酶切,其产物进行琼脂糖凝胶电泳后,在1.2kb、4.7kb可见2条特异条带;并进行全基因序列测序,报告100%符合,证明pEGFP-N1-BMP2重组质粒构建成功。转染后的细胞可见BMP2基因表达,细胞免疫组织化学检测转染后的细胞中有BMP2蛋白的表达。结论 pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒转染后的牙髓细胞能够表达BMP2基因,BMP2蛋白表达阳性。
- 冯艳红刁志虹高毅李威
- 关键词：骨形态发生蛋白质类牙髓细胞
