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七叶皂苷对体外培养大鼠神经元生长的作用及其与BDNF的关系被引量：2: 2014年; 目的探讨七叶皂苷对体外培养大鼠大脑皮质神经元生长的作用及其与脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体(TrkB)的关系.方法取新生SD大鼠大脑皮质进行神经元原代培养,随机分为正常组、对照组和七叶皂苷组.七叶皂苷组加入20 mg/mL七叶皂苷(生理盐水稀释),对照组加入等量生理盐水,正常组不作任何处理.显微镜下观察各时间点(24 h、48 h)神经元数目、胞体面积、突起长度.采用MTT检测细胞活力.RT-PCR检测BDNF和TrkB mRNA的表达.结果正常组、对照组各时间点神经细胞数、胞体面积、突起长度及细胞活力无明显差异(P>0.05),但随时间点延长,各指标明显增加(P<0.05).七叶皂苷组各指标均明显高于正常组、对照组(P<0.05).BDNF和TrkBmRNA在正常组、对照组各时间点上无明显差异(P>0.05),而七叶皂苷组明显高于正常组、对照组(P<0.05).结论七叶皂苷可促进SD大鼠脑源性神经元的生长,其作用可能与上调BDNF及TrkB的表达有关.; 李俊彦张月宁杨金伟茹金赵楠郭建辉刘俊; 关键词：七叶皂苷神经元脑源性神经营养因子

骨髓单个核细胞移植对大鼠损伤脑组织BDNF表达的调节被引量：1: 2012年; 目的探讨骨髓单个核细胞移植对创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、脑外伤组(TBI组)和TBI+单核细胞移植治疗组。建立自由落体TBI大鼠脑损伤模型,取骨髓分离纯化单个核细胞(5×106/mL),经颈动脉注射移植(单核细胞移植治疗组大鼠每只注射1mL)。各组动物分别于TBI后第1、3、7、10d进行神经功能缺损评分(NSS)。TBI后7d取损伤处脑组织行RT-PCR检测BDNF mRNA表达,TBI后10d取损伤处脑组织行原位杂交和免疫组化染色,确定BDNF mRNA和蛋白的细胞定位,计数BDNF阳性细胞数量变化。结果骨髓单个核细胞移植治疗明显减少TBI大鼠NSS评分,与TBI组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。BDNF主要分布于皮质神经元,移植组BDNF mRNA和蛋白表达水平均明显上调(P均<0.05)。结论单个核细胞移植能改善TBI大鼠神经功能,减少神经功能缺损。其机制可能与BDNF表达上调有关。; 赵楠但齐琴刘俊马钢李俊彦金华习阳彦斌; 关键词：创伤性脑损伤单个核细胞脑源性神经营养因子

儿童颅骨骨折一次性修复的体会: 1996年; 儿童颅骨骨折一次性修复的体会李俊彦，苏平，孙敏颅骨骨折占儿童颅脑损伤的２６％，脑膜破裂多见，癫痫发生率高。对于凹陷及粉碎性骨拆采用编网一次成形复位，避免再次手术、也避免了脑膨出、颅骨缺损综合征的发生。临床资料一、一般资料我院自１９９１年１月～１９９５...; 李俊彦苏平孙敏; 关键词：颅骨骨折修复术儿童

灯盏花素干预体外培养大鼠脑皮质神经元的存活与生长被引量：2: 2014年; 背景:神经生长因子在维持中枢神经系统神经细胞的存活、分化,促进其生长、发育,维持其功能方面具有不可替代的作用。目的:观察灯盏花素对SD大鼠大脑皮质体外培养神经元生长的影响,并初步探讨其机制。方法:取新生SD大鼠胚胎,取其大脑皮质后,对神经元进行原代培养,随机分为3组,其中灯盏花素组加入10 g/L灯盏花素,对照组加入等量生理盐水,正常组不作任何处理,各组又分为24 h、48 h亚组。对24孔板中各组细胞各时间点采集图像,之后采用RT-PCR技术检测神经生长因子、酪氨酸激酶A mRNA的表达变化。对96孔板中各组细胞不同时间点采用MTT检测神经元生长活力。结果与结论:正常组和对照组在各时间点细胞数、胞体面积、突起长度及细胞活力无明显差异(P>0.05),但正常组及对照组均有随时间点延长,3个指标均上调(P<0.05),灯盏花素组细胞数、胞体面积、突起长度及细胞活力均较正常组及对照组升高(P<0.05)。神经生长因子及TrkA mRNA的表达在正常组和对照组在各时间点无明显差异(P>0.05),灯盏花素组各时间点较正常组和对照组上调(P<0.05)。提示灯盏花素促进SD大鼠脑源性神经元的存活、生长,其机制可能是通过上调神经生长因子及其受体TrkA的表达发挥作用。; 李俊彦王东艳杨金伟赵楠李力燕程敬茹茹金郭建辉刘俊; 关键词：灯盏花素神经元神经生长因子酪氨酸激酶国家自然科学基金

人脑胶质瘤中proNGF凋亡前信号的研究: 2011年; 目的探讨proNGF(Nerve growth factor precurso)r凋亡前信号在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义.方法采用RTPCR(Rever Transcription Poly-merase Chain Reaction)技术检测人脑胶质瘤中proNGF凋亡前信号各因子proNGF、Sortilin及P75的表达,以10例瘤周正常脑组织为对照.结果各因子在胶质瘤中均有表达,正常脑组织中低表达,两组之间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 proNGF凋亡前信号所导致的细胞凋亡参与正常人脑组织及胶质瘤的发生、发展过程,可能是一种正常机体的保护性机制.; 李俊彦刘俊孙杰; 关键词：胶质瘤凋亡

一种高纯度原代神经元培养和高效率转染的方法被引量：5: 2018年; 背景:神经元的培养和细胞转染技术是在体外研究神经元生长发育及生理病理机制的重要手段,但目前原代培养的皮质神经元往往纯度不高、转染效率不高。目的:建立一种简单、高效、稳定的原代神经元培养及转染方法。方法:无菌条件下分离新生1 d SD大鼠大脑皮质,经0.25%的胰蛋白酶消化后离心,制备成单细胞悬液,以5×10~9L^(-1)细胞浓度接种至含神经元专用培养基的24孔细胞培养板进行原代培养,并于倒置显微镜下观察神经元形态的变化,使用神经元特异性标志物Tuj1和MAP2对培养的细胞进行鉴定;利用人工脂质体转染神经元,观察神经元转染效率。结果与结论:(1)体外培养的原代神经元具有较高的纯度,在培养第7天神经元特征明显,突起相互接触形成神经元网络,并表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP2;利用人工脂质体转染神经元,转染效率较高;(2)采用该方法进行原代神经元培养,能够获得稳定的、高纯度的原代神经元;人工脂质体亦可高效率转染原代神经元。; 李兴统汤红艳马微杨金伟王先斌代云飞李俊彦郭建辉李力燕; 关键词：神经元形态学鉴定转染纯度神经元细胞培养技术转染

铜绿假单胞菌制剂对大鼠C6胶质瘤细胞作用的实验研究被引量：1: 2010年; 目的研究铜绿假单胞菌注射液(PA-MSHA)对体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞的增殖抑制机制.方法体外培养大鼠C6胶质瘤细胞,测定细胞活力、细胞贴壁率,绘制生长曲线,计算细胞倍增时间,确定最佳细胞接种浓度及药物干预区间.倒置显微镜观察药物作用后细胞形态学变化,MTT比色法测定不同时间、不同浓度PA-MSHA对C6胶质瘤细胞的增殖抑制率,计算细胞存活率及半数抑制浓度(IC50).结果 C6细胞在常规培养条件下呈贴壁生长,生长状态良好,每次传代前活力测定,存活率均>95%.于2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h测定贴壁率分别为20%、68%、82%、85%、92%、98%,符合本实验要求.细胞生长曲线提示5×103/孔的浓度为96孔板内最佳接种浓度.细胞接种后24～72 h为细胞倍增时间.倒置显微镜下观察药物作用后细胞形态学变化明显.MTT比色法结果提示,细胞生长抑制率与药物作用时间和剂量正相关.计算24 h和48 h IC50值分别为(5.80±1.79)×108 cfu/mL和(3.90±2.14)×108 cfu/mL.结论铜绿假单胞菌(PA-MSHA)制剂对体外培养的C6胶质瘤细胞具有增殖抑制作用,且呈时间剂量依赖性.; 孙杰马钢李俊彦刘俊高鸿宋晓斌; 关键词：C6胶质瘤细胞铜绿假单胞菌制剂 MTT

血管内栓塞与显微外科手术联合治疗巨大脑动静脉畸形被引量：1: 1999年; 目的为了提高巨大脑动静脉畸形（ＡＶＭ）的治疗效果，降低致残率及死亡率。方法术前用α－氰基丙烯酸正丁酯（ＮＢＣＡ）或丝线段行一次或多次血管内栓塞治疗，使脑动静脉畸形的血管床缩小到５０％～８０％，于栓塞后３～１５天行手术全切除。结果２６例巨大脑动静脉畸形栓塞后手术全切除，无术后死亡及术后手术区再发血肿发生，２６例病例中４例有神经功能障碍，７例术中皮质脑电图监测后行软膜下病灶切除术的病人未再发生癫痫。结论血管内栓塞与手术联合是治疗巨大脑ＡＶＭ的有效方法，术中皮质脑电图监测下切除痫灶是消除术后癫痫再发的手段。; 高鸿苏平孙敏彭远惠金明谷震张明刘俊马钢李俊彦; 关键词：脑动静脉畸形血管内栓塞显微外科手术

晚期妊娠合并脑出血二例报告被引量：2: 2003年; 高鸿苏平李俊彦谷震金丽昆; 关键词：晚期妊娠合并症脑出血

血管内栓塞结合显微手术治疗颅内动脉瘤临床研究被引量：2: 2007年; 目的应用显微手术夹闭、血管内栓塞和栓塞后手术夹闭3种治疗方法,探讨治疗颅内破裂动脉瘤的安全有效方案。方法显微手术瘤颈夹闭30个动脉瘤,栓塞34个动脉瘤。栓塞后夹闭15个动脉瘤。结果夹闭组30个完全夹闭,无复发,死亡率6%(2/30)。栓塞组完全闭塞率70.6%(24/34),复发率17.6%(6/34),死亡率11.8%(4/34)。栓塞后手术组15个完全夹闭,尤复发,死亡率6.7%(1/15)。治疗结束用GOS评价,1个月后3组良好率分别为80.0%、79.4%和80.0%;半年后良好率分别为90.0%、88.2%和86.7%。结论显微手术瘤颈夹闭术仍然是治疗破裂动脉瘤的有效方法,具有1次治疗彻底和复发率低的优势,并可作为栓塞失败的补救手段。; 苏平高鸿谷震马钢刘俊常谦孙敏刘杰李俊彦彭远岑键昌; 关键词：动脉瘤显微手术血管栓塞

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