施伟民
- 作品数:98 被引量:333H指数:11
- 供职机构:上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市卫生局青年科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- Rev依赖性人类免疫缺陷病毒检测结构的合成与表达
- 2003年
- 目的 利用人类免疫缺陷病毒 (HIV)低变异的调节蛋白Rev与Rev反应区 (RRE)的高亲和性 ,尝试合成一种不受变异影响的特异性病毒表达检测结构。方法 采用分子克隆技术合成含有RRE和增强的绿荧光蛋白 (EGFP)的Rev依赖性荧光表达质粒 ,采用流式细胞仪检测新质粒的表达功能。结果 新合成的质粒pDM 12 8 EGFP (pE12 8)含氨苄青霉素受体 (AmpR)选择子、SV40 启动子、EGFP基因及HIV 1 RRE片段 ,BssSI酶切后产生 3 .6、1.9和 1.5kb片断 ,HindⅢ酶切后产生 3 470、2 72 5和 879bp 3个片断 ,PCR扩增提示EGFP基因完整插入。pE12 8在Hela细胞中显示Rev依赖性表达 ,pRev不存在时 ,几乎没有EGFP表达 ;pRev存在时 ,EGFP显著表达 (P <0 .0 1)。绿荧光Hela细胞百分比随pRev比例的增加而渐次增加。结论 pE12 8能特异、敏感、快速和直观地检测HIV的表达 ,对反映HIV的感染性及病情的转归及对获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)
- 施伟民Paul U CameronDamian JF Purcell
- 关键词:RNA结合蛋白分子克隆流式细胞仪
- 五环三萜类柴胡皂苷单体抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性研究
- 目的:对柴胡进行有效成分分离,并对其抗菌作用明确的成分进行结构测定,确定其分子结构,得到结构明确的五环三萜类活性单体Bp3(Saikosaponines,Bp3)。进一步深入研究该单体的抗耐甲氧西林
- 沈亮亮施伟民叶元康潘胜利武济民
- 文献传递
- SLE患者DNA甲基转移酶1单核苷酸多态性分析被引量:1
- 2009年
- 目的比较SLE患者DNMT1基因的单核苷酸多态性,探讨DNMT表达异常在SLE发病中的意义。方法选取SLE患者11例,正常人对照12例。外周血单一核细胞DNA提取后应用PCR结合测序方法检测并分析DNMT1基因的部分外显子exon1~exon7及相应的内含子的单核苷酸多态性,并做进一步基因型分析。结果SLE患者中DNMTl外显子7与8之间内含子7存在21397位T→C(胸腺嘧啶→胞嘧啶)的改变,CC的纯合子较正常人对照组明显增加(r=4.10,P〈0.05)。结论SLE患者DNMT1基因存在单核苷酸多态性,可能是DNMT1基因表达异常的遗传成分之一。
- 徐金华朱小华施伟民
- 关键词:甲基转移酶类
- 0.05%丙酸氟替卡松乳膏治疗皮炎、湿疹临床疗效观察被引量:11
- 2005年
- 郭志丽顾军温海袁定芬施伟民陈仁贵徐慧珍陈美娟汤依晨吴瑞勤周群
- 关键词:湿疹丙酸氟替卡松
- 白念珠菌三重保守基因微卫星快速分型被引量:1
- 2005年
- 目的建立高效、快速、简便的白念珠菌三重保守基因微卫星分型技术。方法煮沸法处理71株白念珠菌野生株为模板,三色荧光分别标记保守基因CDC3、EF3和HIS3微卫星序列引物,PCR扩增,产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳。GeneScan软件扫描获取片段精确长度,Genotype软件基因分型。结果71株白念珠菌野生株行CDC3、EF3和HIS3基因分型分别获得5、10、8种等位基因,7、8、9种基因型,三位点联合分析获得14种菌株基因型。结论白念珠菌多重保守基因微卫星分型能够从基因水平快速、精确地鉴定和区分临床分离株,对白念珠菌的流行病学和致病性研究有重要价值。
- 梅兴宇施伟民霍克克高飞沈亮亮陈德利
- 关键词:白念珠菌基因分型聚丙烯酰胺凝胶电泳等位基因流行病学
- 小鼠骨髓间充质干细胞的体外培养和鉴定被引量:2
- 2012年
- 目的建立一种实用高效的小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外分离培养方法,并进行初步表型鉴定。方法采取贴壁细胞分离法分离和培养MSCs。倒置显微镜观察原代及传代细胞的形态及生长过程,使用免疫细胞化学方法进行MSCs的初步表型鉴定。结果 MSCs贴壁生长,形态均一,呈成纤维缓胞样,生长状态良好。免疫细胞化学检测CD44、CD105、CD34阳性率分别为94.3%、82.3%、3.3%。结论采用贴壁培养法可分离培养出高纯度的MSCs。
- 朱建宇施伟民
- 关键词:骨髓间充质干细胞细胞培养免疫细胞化学小鼠
- 生殖器疱疹及治疗被引量:8
- 2012年
- 生殖器疱疹(genital herpes,GH)是最常见的性传播性疾病之一,大部分由人单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)-2所致、少部分由HSV-1所致,既可感染邻近黏膜细胞、淋巴和(或)血行感染其它部位,也可感染外周神经系统。GH表现为原发性生殖器疱疹、复发性生殖器疱疹和亚临床HSV激活,对精神并发症、宫颈癌发病和艾滋病病毒感染有重要影响。实验室检测对GH的确诊有一定价值,以型特异性血清检测更常用。目前常用的抗HSV药物主要有阿昔洛韦、伐昔洛韦和法昔洛韦,应系统治疗和局部治疗相结合。系统治疗主要以抗病毒治疗为主,可分为间歇疗法和长期抑制疗法。
- 施伟民
- 关键词:生殖器疱疹
- Rev依赖性HIV感染细胞杀伤型质粒的表达
- 目的 检测由HIV调节蛋白Rev与Rev反应区(REE)的高亲和性合成的一种不受变异影响的,能特异地直接使病毒感染细胞转换成免疫原结构的表达与功能。 方法 采用基因枪转导流式细胞仪检测新质粒的表达功能。 结果 新结构pD...
- 施伟民
- 关键词:RNA结合蛋白基因枪流式细胞仪
- 文献传递
- 以5-氨基酮戊酸诱导荧光定位诊断尖锐湿疣的临床研究被引量:3
- 2008年
- 目的探讨5-氨基酮戊酸(ALA)诱导的荧光诊断法在诊断尖锐湿疣(CA)亚临床感染中的价值。方法临床随机选择25例CA患者,在其疣体及周围5cm范围进行外用20%ALA乳膏并封包,在2h和4h时以410nm蓝光观察用药部位红斑面积。并对相同部位进行醋酸白试验,观察结果。结果25例患者中,疣体ALA阳性率为100%,醋酸白试验阳性率为80%;疣体周围ALA阳性率为96%,醋酸白试验阳性率为8%。合适的检测时间为敷药后2h。但黏膜及炎症部位仍存在一定的假阳性。结论ALA在CA的疣体及其周围亚临床感染的诊断中优于传统的醋酸白试验,在CA的诊断和鉴别诊断中具有一定价值。
- 华人意施伟民梅兴宇张文萍
- 关键词:尖锐湿疣氨基酮戊酸光化学疗法
- 朗格汉细胞特异性递呈在巨噬细胞亲和性HIV感染中的作用
- 目的:为了观察巨噬细胞亲和性HIV经皮肤传染的细胞学机制,区别巨噬细胞亲和性及T细胞亲和性HIV传染的差异。方法:以基因枪转染AD8及NL43分子克隆至皮肤,流式细胞仪和荧光显微镜观察病毒在表皮植片中的表达,磁分离术分离...
- 施伟民
- 关键词:基因枪荧光显微镜