张航
- 作品数：20 被引量：15H指数：2
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
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- 高效液相色谱-串联质谱检测基因组DNA甲基化方法的建立被引量：2
- 2014年
- 目的：建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-ESI-MS/MS）检测基因组DNA甲基化水平的方法。方法：以5-mdC和dG为标准品，采用全自动高效液相色谱系统进行分离，串联电喷雾质谱检测，选择多反应监测模式（MRM）测定标准品，绘制标准工作曲线。结果：在MRM模式下选取5-mdC（m/z 241.9→126.3）和dG（m/z 268.1→152.3）分别作为定量检测的母子离子对，各化合物能实现良好的基线分离；5-mdC和dG碰撞能均为15 eV，去簇电压分别为40和45 V，最低定量限分别为1.65和2.47 fmol；标准品的响应值比为90%~110%；5-mdC含量的天内相对标准偏差和天间相对标准偏差均小于8%。结论：HPLC-ESI-MS/MS是能应用于检测基因组DNA甲基化的一种高通量、高准确率、高分辨率、高灵敏度且重复性好的方法。
- 张航胡俊杰汤瑞华叶金波任晓虎胡韬黄培武杨细飞黄海燕刘建军
- 关键词：高效液相色谱串联质谱DNA甲基化
- SET缺陷对三氯乙烯诱导L-02细胞增殖和凋亡及组蛋白去乙酰化酶的影响
- 2016年
- 目的比较三氯乙烯（trichloroethylene，TCE）诱导人正常肝细胞（L-02细胞）和SET基因缺陷L02细胞（SET缺陷细胞）中细胞增殖、凋亡、组蛋白去乙酰化酶活力及表达水平的变化，探讨TCE染毒对组蛋白修饰的影响及SET在表观遗传调控中的作用。方法选用前期建立的SET缺陷细胞为研究对象，以未经TCE处理的L-02细胞和SET缺陷细胞作为各自的对照组，用2．00和8．00mmol／LTCE染毒两种细胞24h，用CCK．8法和Hoechst 33342染色法检测细胞的增殖水平和凋亡率。用0．25、0．50、1．00、2．00、4．00、8．00mmol／LTCE染毒两种细胞，检测细胞的组蛋白去乙酰化酶活力和蛋白去乙酰化酶的蛋白表达水平。结果TCE8．00mm01]L染毒组SET缺陷细胞与L-02肝细胞比较，增殖水平呈下降趋势，凋亡率呈上升趋势，且差异均有统计学意义（t值分别为-4．362和23．950，P〈0．05）。TCE处理L-02肝细胞和SET缺陷细胞后均引起细胞增殖水平的下降和凋亡率的升高，当TCE浓度达到8．00mmol／L时，两组细胞间的增殖水平和凋亡率的差异有统计学意义（t值分别为-4．362，和23．950，P值均小于0．05）。使用0，0．25，0．50，1．00，2．00，4．00和8．00mmol／L TCE处理L-02细胞和SET缺陷细胞24h后，两种细胞的组蛋白去乙酰化酶活力水平均呈现上升趋势。其中，当TCE染毒浓度到达0．50mmol／L时，与L-02细胞对照组比较，L-02细胞组组蛋白去乙酰化酶活力明显升高，差异有统计学意义（F值为403．26，P〈0．01）；TCE为1．00mmol/L时酶活力最高。与SET缺陷细胞对照组比较，当TCE达到1．00mmol/L时，SET缺陷细胞组蛋白去乙酰化酶活力明显升高，差异有统计学意义（F值为44．01，P〈0．01）。与同染毒剂量的L-02细胞比较，当TCE染毒剂量到达0．50mmol／L时，SET缺陷细胞的组蛋白去乙酰化酶活力均低于L-02细胞，差异有统计学意义（P〈
- 谢光珊刘建军洪文旭张航孙烨朱卫国
- 关键词：三氯乙烯组蛋白脱乙酰基酶人正常肝细胞
- 三氯乙烯致肝细胞毒性中SET启动子区甲基化水平的改变
- 2018年
- 目的研究三氯乙烯（Trichlorethylene，TCE）致肝细胞毒性中SET基因启动子区甲基化水平的改变。方法培养L—02肝细胞，使用0、1、2、4、8mmol／L浓度的TCE处理24h，提取细胞基因组DNA，进行亚硫酸氢盐修饰，用PCR扩增目标序列，重亚硫酸氢盐测序法（t3sP）分析TCE作用下肝细胞中SET基因启动子区甲基化状态。结果与对照组比较，TCE处理后L-02肝细胞中SET基因启动子区甲基化水平下降，且随着TCE染毒浓度的增加，SET基因启动子区甲基化水平递减。对SET启动子区甲基化差异位点进行分析发现，差异有统计学意义的甲基化位点有73个，已知转录因子结合位点9个。结论TCE致L-02肝细胞毒性中SET基因启动子区甲基化水平下降，影响转录因子的结合，继而使SET蛋白表达升高。
- 阮嘉雯陈志鸿陈志鸿张航张航任晓虎黄新凤袁建辉刘云岗
- 关键词：三氯乙烯L-02肝细胞DNA甲基化
- 姜黄素对纳米二氧化硅诱导HaCaT细胞氧化损伤的保护作用被引量：2
- 2013年
- 目的研究姜黄素对纳米二氧化硅诱导HaCaT细胞损伤的保护作用。方法建立15-nm二氧化硅致HaCaT细胞损伤的体外研究模型,通过CCK-8法检测细胞活力水平;测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和细胞内丙二醛(MDA)含量,评价细胞的损伤程度。结果姜黄素能明显改善15-nm二氧化硅诱导HaCaT细胞的损伤,与二氧化硅组相比,姜黄素干预组能提高细胞存活率,细胞培养液中的LDH漏出量明显减少(P<0.05),细胞内的MDA明显降低(P<0.05)。结论姜黄素对15-nm二氧化硅诱导的HaCaT的细胞损伤具有一定的保护作用。
- 洪文旭洪文旭周桂凤胡韬叶金波陈晓丹张航
- 关键词：姜黄素纳米二氧化硅HACAT细胞细胞损伤
- 一种温度循环箱及其温度循环控制方法
- 本发明提供了一种温度循环箱及其温度循环控制方法，通过设置在箱体侧壁的温控设备对箱体内的温度进行控制调节，并且在箱体内部设置了均匀分布有进气孔隔板，使温控设备输入到上箱体内的气流可以均匀的输入到下箱体内，在实现了对箱体内温...
- 崔宏志朱国飞张航邢锋
- 文献传递
- 膜蛋白质组学技术在毒理学研究中的进展
- 2014年
- 膜蛋白是细胞膜的重要组成部分,执行着细胞内外物质交换、细胞识别与免疫应答、信号转导和调控,以及能量传递等重要功能。随着蛋白质组学技术的发展,膜蛋白质组学成为毒理蛋白质组学研究的重要组成部分,为在膜蛋白水平阐明毒理机制和建立毒理评估模型提供了新的途径。本文综述了近年来膜蛋白质组学的技术进展以及其在毒理学研究中的应用。
- 黄爱博张航许华刘建军洪文旭
- 关键词：膜蛋白毒理学
- 姜黄素对纳米二氧化硅诱导HaCaT细胞氧化应激损伤保护作用研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究姜黄素对纳米二氧化硅(nm-SiO2)诱导人永生化表皮(HaCaT)细胞氧化损伤相关指标的改变及保护作用。方法通过CCK-8法检测HaCaT细胞在15 nm SiO2和姜黄素作用下的细胞活力水平,测定在姜黄素干预下HaCaT细胞内活性氧簇(ROS)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的酶活力水平。结果姜黄素的干预能明显改善15 nm SiO2处理引起的HaCaT细胞的氧化损伤。与SiO2组相比,姜黄素干预组能有效提高细胞存活率、降低细胞内ROS的积累;另外,姜黄素干预可以降低两个氧化应激相关的酶SOD和CAT的酶活力水平。结论姜黄素干预对由于nm-SiO2引起的HaCaT细胞的氧化应激损伤具有一定的保护作用。
- 洪文旭陈晓丹彭圣明张航杨细飞刘建军
- 关键词：纳米二氧化硅姜黄素氧化应激HACAT细胞
- 一种相变储能混凝土及其制造方法
- 本发明提供了一种相变储能混凝土及其制造方法，采用中空的金属材料装置作为相变储能材料的载体，其外围密封，只在顶部设置了一个进料口，仅需对其进行密封即可，封装工艺简便，而且所述金属材料装置为中空，复合量高，并且金属材料的导热...
- 崔宏志张航朱国飞柴苗
- 文献传递
- SET基因缺陷对三氯乙烯诱导人正常肝细胞DNA甲基化水平改变的影响被引量：2
- 2015年
- 目的比较三氯乙烯（trichloroethylene）诱导人正常肝细胞（L-02细胞）和SET基因缺陷L-02细胞（SET缺陷细胞）中DNA甲基化相关指标的变化，探讨SET与三氯乙烯诱导的表观遗传调控作用之间的关系。方法选用前期建立的SET缺陷细胞为研究对象，使用三氯乙烯分别对L一02细胞和SET缺陷细胞进行处理，检测细胞增殖水平、细胞DNA甲基化水平和DNA甲基转移酶（DNAmethvltrans伯rases，DNMTs）活性的变化，通过Westernblot法从蛋白水平分析DNMTs（DNMT1、DNMT3a、DNMT3b）的表达变化。结果三氯乙烯处理L-02细胞和SET缺陷细胞24h后，两种细胞的增殖水平均呈现下降趋势。使用0、1．0、2．0、4．0和8．0mmol／L的三氯乙烯处理细胞后，L-02细胞的相对增殖水平分别为100．00±2．70、83．34±2．38、75．56±4．51、71．67±2．77、66．67±1．63（F=58．29，P〈0．001）；SET缺陷细胞的相对增殖水平分别为101．12±1．67、85．01±2．33、79．44±1．67、78．337±3．89、76．11±3．33（F=42．41，P〈0．001）。0、1．0、2．0、4．0和8．0mmol／L的三氯乙烯处理L-02细胞和SET缺陷细胞24h后，L-02细胞的DNA甲基化水平分别为3．77±0．08、3．48±0．08、3．38±0．10、3．14±0．15、2．91±0．07，呈下降趋势（F=212．87，P〈0．001）；SET缺陷细胞DNA甲基化水平分别为3．77±0．15、3．57±0．15、3．30±0．11、3．35±0．13呈下降趋势（F=79．32，P〈0．001）。L-02细胞经0、1．0、2、0、4．0、8．0mmol／L的三氯乙烯处理24h后，DNMTI蛋白的相对表达量分别为1．00±0．03、1．28±0．04、1．20±0．04、1．62±0．05、1．43±0．04，表达升高（F=103．00，P〈0．001）；而在SET缺陷细胞中DNMT1的相对表达量分别为1．00±0．04、0．96±0．02、1．19±0．05、0．85±0．03、0．83±0．03，出现下降（F=44．18，P〈0．001）。结论SET缺陷可以明显抑制三氯乙烯暴露引起的L-02�
- 洪文旭黄爱博许华张航王宏菊赵琼晖叶金波刘建军
- 关键词：人正常肝细胞DNA甲基转移酶
- Pri-miRNA21/23a重组病毒载体的构建及其在肝细胞中的表达鉴定
- 2017年
- 目的:构建Pri-miRNA-21/23A基因的重组病毒载体,并在L-02肝细胞中获得表达。方法:设计并合成Pri-miRNA-21/23a的基因产物,插入含绿色荧光蛋白Zsgreen基因的真核表达载体pCI Mamma Lian中,以重组质粒为模板,设计扩增含Zsgreen基因的Pri-miRNA序列产物,并将其与pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro病毒载体连接,将Pri-miRNA重组病毒载体转染293T细胞后进行病毒包装,病毒上清转染L-02肝细胞后用荧光显微镜及实时荧光定量PCR确认转染效果。结果:荧光定量PCR结果显示重组病毒上清转染L-02肝细胞感染效果良好,经荧光显微镜观察,证实重组病毒载体能在细胞中表达蛋白。结论:构建了Pri-miRNA21/23a重组病毒表达载体并在L-02肝细胞中表达,奠定了miRNA进一步功能研究的基础。
- 钟佳成张航任晓虎卢维雪胡盼盼刘建军
- 关键词：MICRORNAMIR-21慢病毒表达载体
