张建中
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 供职机构:天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:天津市教委基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 双顺反子翻译偶联表达载体的构建及蚓激酶基因F238在大肠杆菌中的可溶性表达被引量:3
- 2011年
- 为了实现外源蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达,利用硫氧还蛋白作为分子伴侣构建双顺反子翻译偶联表达载体pDICT。将大肠杆菌硫氧还蛋白基因插入到pET22b载体NdeI和EcoR I位点之间,同时在硫氧还蛋白编码基因的终止密码子前加入核糖体结合位点,构建成双顺反子翻译偶联表达载体pDICT。将蚓激酶基因F238克隆到该载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。SDS-PAGE结果表明,所表达的蚓激酶F238是可溶性蛋白。利用血纤维蛋白法对表达产物进行活性测定,重组蚓激酶F238不仅具有纤溶酶活性,而且具有激活纤溶酶原的激酶活性。该双顺反子翻译偶联表达载体的构建,为在大肠杆菌中可溶性表达外源蛋白提供了新方法。
- 黎明宋馨宇王晓娟刘建军张建中刘萌黄云雁
- 关键词:蚓激酶分子伴侣双顺反子可溶性表达
- α-转移葡萄糖苷酶的研究进展
- α-转移葡萄糖苷酶是生产IMO的关键酶制剂,随着其在食品、制药、饲料等其他方面上的开发应用,对α-转移葡萄糖苷酶的需求量也越来越大,而我国用于生产IMO的该酶却依赖于进口。本文对α-转移葡萄糖苷酶的来源、主要酶学性质和催...
- 黎明刘盟宋馨宇张建中黄云雁路福平
- 关键词:Α-转移葡萄糖苷酶酶学特性菌种选育
- 文献传递
- 一步法生产1,5-戊二胺谷氨酸棒杆菌基因工程菌的构建被引量:9
- 2010年
- 1,5-戊二胺是一种重要的化工原料,发酵法生产1,5-戊二胺是一条新颖且具有潜在竞争力的生产途径。以蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)AS1.1009基因组为模板,通过PCR扩增,得到大小约为2.2kb的赖氨酸脱羧酶基因ldc。以大肠杆菌(Escherichia coli)/谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)穿梭质粒pXMJl9为载体,将扩增得到的目的基因片段克隆至谷氨酸棒杆菌C.glutamicum TK260512,获得重组菌株C.glutamicum TK260512/pXMJl9-ldc.在摇瓶发酵水平上,通过IPTG诱导ldc基因的表达,并采用反相高效液相色谱方法测定了发酵液中1,5-戊二胺的含量,结果显示,经36h发酵,工程菌C.glutamicum TK260512/pXMJ19-ldc的1,5-戊二胺产量为0.96g/L。
- 牛涛黎明张俊环宋馨宇张建中
- 关键词:谷氨酸棒杆菌