张合亮
- 作品数：2 被引量：15H指数：2
- 供职机构：天津市第五中心医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 叶酸／聚酰胺-胺介导miR-7抑制胶质瘤U251恶性表型的研究被引量：4
- 2011年
- 目的研究叶酸／聚酰胺-胺（FA／PAMAM）作为miR-7载体治疗胶质瘤U251的效果。方法将FA／PAMAM／miR-7络合物转染胶质瘤细胞株U251，绘制细胞生长曲线，检测细胞周期和细胞凋亡情况，Transwell体系检测瘤细胞迁移能力，软琼脂克隆实验检测细胞致瘤性；qRT—PCR方法检测miR-7水平，Western blot方法检测EGFR、P13K和AKT2的蛋白表达。结果获得稳定转染的U251细胞增殖速度减慢，细胞周期延长，凋亡细胞比例增多，细胞迁移能力、软琼脂克隆形成能力均有明显降低（P〈0．05）；miR-7水平明显提高，EGFR、P13K和AKT2蛋白水平均有一定程度降低（P〈0．05）。结论FA／PAMAM能够高效投递miR-7基因至胶质瘤细胞，发挥肿瘤生长抑制作用。
- 刘振林刘晓智赵玉军史万超姜忠敏李罡张合亮胆迎
- 关键词：神经胶质瘤微小RNA
- miR-7沉默EGFR/PI3K通路逆转脑胶质瘤U251细胞的恶性表型被引量：11
- 2011年
- 目的:探讨利用微RNA(microRNA-7,miR-7)靶向沉默表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol kinase-3,PI3K)通路途径逆转脑胶质瘤的恶性表型。方法:利用脂质体转染法将带有miR-7基因序列的表达质粒转入人脑胶质瘤细胞株U251中;采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)方法检测转染细胞中miR-7的表达水平;免疫细胞化学法和蛋白质印迹法检测EGFR、PI3K和AKT2蛋白的表达情况;绘制细胞生长曲线,FCM法检测细胞周期变化,Transwell小室法检测瘤细胞迁移能力,软琼脂克隆形成实验检测肿瘤细胞致瘤性。结果:RFQ-PCR结果显示,miR-7基因转染组细胞中miR-7水平明显高于对照组和无义序列组;蛋白质印迹法检测结果显示,转染组U251细胞中EGFR、PI3K和AKT2蛋白的水平较对照组均有明显降低(P<0.05);U251细胞增殖速度减慢,处于S期的细胞所占比例减少,细胞迁移及软琼脂克隆形成能力均有明显降低(P<0.05)。结论:转染miR-7可有效沉默胶质瘤U251细胞中EGFR/PI3K通路主要成员蛋白的表达,进而逆转其恶性表型,有望成为一种新的胶质瘤基因治疗方法。
- 刘晓智姜忠敏陈镭刘洪良史万超张合亮刘振林
- 关键词：神经胶质瘤U251细胞
