张兆威
- 作品数:143 被引量:181H指数:9
- 供职机构:中国农业科学院油料作物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程医药卫生理学更多>>
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫分析核心试剂特异性单克隆抗体的研制与特性研究被引量:1
- 2012年
- 采用1,1'-羰基二咪唑(CDI)活化法成功将脱氧雪腐镰刀菌烯醇分子上C-3和C-15位羟基与载体蛋白赖氨酸的氨基共价偶联得到免疫原DON-BSA和包被原DON-OVA,并用三硝基苯磺酸法对合成结果进行鉴定。以人工抗原免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/O鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和多次亚克隆,得到了1株能稳定分泌脱氧雪腐镰刀菌烯醇抗体的单克隆细胞株1D5,并制备单克隆抗体腹水。经检测该抗体亚型为IgG1,亲和力常数Ka为8.33×107L/mol,交叉反应的试验结果显示该抗体与其他真菌毒素无交叉反应率,稳定性良好,为粮油食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫快速检测技术建立及产品研发提供了关键试剂材料。
- 王海彬李培武张奇张文丁小霞张兆威
- 关键词:呕吐毒素人工抗原单克隆抗体
- 量子点标记荧光免疫法检测花生中黄曲霉毒素B_1被引量:16
- 2012年
- 建立了基于量子点标记二抗的间接竞争荧光免疫吸附测定方法(indirect competitive fluorescence-linked immunosorbent assay,cFLISA),并研究检测花生中黄曲霉毒素B1的可行性。采用谷胱甘肽为稳定剂,在水相中直接合成碲化镉(CdTe)量子点,并利用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)与兔抗鼠二抗进行共价偶联,以黄曲霉毒素B1的单克隆抗体建立cFLISA方法。结果表明,该方法的灵敏度和最低检测限值分别为0.023ng/mL和0.001ng/mL,与传统的有机染料FITC-二抗法比较,灵敏度提高了30倍,花生样品加标0.1、0.05和0.025ng/g,回收率范围在88%~116%之间,变异系数均小于10%。建立的cFLISA方法可以较好的检测花生中黄曲霉毒素B1,并为其它真菌毒素的检测提供参考。
- 李园园李培武张奇张文丁小霞张兆威
- 关键词:荧光免疫测定黄曲霉毒素B1花生
- 液相芯片及其在粮油主要真菌毒素同步检测中的应用被引量:3
- 2012年
- 液相芯片整合了分子生物学、免疫学、高分子材料、微流控技术、高速数字信号处理、计算机分析等多方面技术,可实现少量样本高通量定性定量检测。本文主要阐述液相芯片定性与定量分析的基本原理、特点及其在分析领域的应用现状,探讨液相芯片在小分子高通量分析中的工作模式及其当前技术难点,分析黄曲霉毒素等粮油主要真菌毒素免疫分析研究进展,指出液相芯片在粮油主要真菌毒素检测中将有广泛的应用前景。
- 李鑫李培武张奇张文张兆威
- 关键词:液相芯片真菌毒素高通量同步检测
- 快速检测环匹阿尼酸的胶体金免疫分析试纸条、制备及其应用
- 本发明公开了一种快速检测环匹阿尼酸的胶体金免疫分析纸条、制备及其应用。其包括底板,底板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫,相邻各垫在连接处交叠连接,所述检测垫以硝酸纤维素膜为基垫,硝酸纤维素膜上自上而下...
- 李培武张兆威王督张奇张文
- 文献传递
- 一种具有多检测尺度的免疫检测试剂盒的应用
- 本发明涉及一种具有多检测尺度的免疫检测试剂盒及其应用。它包括层析试纸条和二氧化锰纳米材料标记的识别待检测物的单克隆抗体反应试剂,其中:所述的层析试纸条包括纸板,纸板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫和样品垫,相邻各垫在...
- 喻理李培武梁美娟蔡新发姜俊王督张兆威唐晓倩张奇白艺珍
- 抗黄曲霉毒素单克隆抗体F(ab')2片段的制备与活性被引量:2
- 2013年
- 为剧毒靶标(黄曲霉毒素)绿色分析提供高效抗体,在已有抗黄曲霉毒素杂交瘤细胞株1C11的基础上,通过小鼠腹水法制备单克隆抗体,经胃蛋白酶酶解,制备F(ab')2片段,发现在优化条件37℃、pH4.1柠檬酸缓冲液中酶解4.5h,可高效制备F(ab')2片段。通过酶联免疫吸附法(ELISA)比较了抗体片段与原始抗体的识别活性,发现F(ab')2片段效价达到1∶320 000,是原抗体效价的1.5倍;灵敏度(IC50)为8.7pg/mL,保持了原抗体的抗原结合能力。
- 雷佳文李培武张奇张兆威丁小霞张文
- 关键词:黄曲霉毒素单克隆抗体活性
- 农产品中黄曲霉毒素的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究被引量:30
- 2014年
- 【目的】黄曲霉毒素严重污染农产品,威胁人畜生命健康,是政府重视、社会关注的一大焦点问题,因此亟需研究建立黄曲霉毒素高灵敏高快速检测方法。目前已研制出高特异性高灵敏度黄曲霉毒素单克隆抗体,本研究旨在应用该抗体,建立黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析快速检测技术,为农产品质量监管、风险评估提供技术支持。【方法】本研究通过将黄曲霉毒素抗体与乳胶铕进行偶联标记,利用自主研制的黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条进行黄曲霉毒素检测,通过检测线T信号值与质控线C信号值的比值和标准溶液浓度的自然对数值实现定量。针对花生、稻米、植物油等不同农产品,研究建立样品粉碎均质提取一体化技术。对铕标记时间分辨荧光免疫层析检测技术进行方法学考核,以花生、稻米、植物油等为例,进行实际样品检测,并与HPLC法进行结果比对。【结果】在花生、稻米、植物油等农产品实际样品检测中,本研究建立的时间分辨荧光免疫层析检测技术检测黄曲霉毒素B1得到检测限均为0.3μg·kg-1,线性范围分别为0.8—25、0.8—15和0.8—30μg·kg-1。上述3种农产品对应的标准曲线的线性方程分别为y=0.238x+0.654(R2=0.992)、y=0.321x+0.811(R2=0.990)和y=0.146x+0.173(R 2=0.993),标准偏差分别为0.024、0.039和0.021。该方法的批内准确度和精密度添加回收试验结果表明,添加回收率在81.0%—113.0%,变异系数在7.2%—14.2%;批间准确度和精密度试验结果显示,添加回收率在75.8%—114.9%,变异系数在7.7%—15.3%。说明该检测技术批内、批间均具有良好的准确度和精密度。该方法与HPLC法检测结果相比,相对误差小于10%,说明黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析技术与行业标准方法检测结果具有良好的一致性。【结论】时间分辨荧光免疫层析检测技术灵敏度高、线性范围宽,重复性和稳
- 张兆威李培武张奇丁小霞
- 关键词:黄曲霉毒素农产品
- 铁基多孔碳免疫层析试纸条及其应用
- 本发明涉及铁基多孔碳免疫层析试纸条及其应用。铁基多孔碳免疫层析试纸条,包括层析试纸条、OPD显色试剂和铁基多孔碳标记的抗识别待检测物的单克隆抗体反应试剂,其中:所述的层析试纸条包括纸板,纸板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、...
- 喻理李培武王督张兆威
- 同步检测黄曲霉毒素B1等五种真菌毒素混合污染的免疫层析时间分辨荧光试剂盒及应用
- 本发明涉及同步检测黄曲霉毒素B1等五种真菌毒素混合污染的免疫层析时间分辨荧光试剂盒及应用。其包括免疫层析时间分辨荧光试纸条和含有铕标记的各单克隆抗体冻干品的样品反应瓶;其中荧光试纸条包括PVC衬底,衬底的一面从上到下依次...
- 张兆威李培武张奇王督张文
- 杂交瘤细胞株Fm7A11及其产生的抗伏马毒素B<Sub>1</Sub>单克隆抗体
- 本发明涉及杂交瘤细胞株Fm7A11及其产生的抗伏马毒素B<Sub>1</Sub>单克隆抗体。本发明提供的杂交瘤细胞株Fm7A11(CCTCC NO:C201636)可以用于制备高效价抗伏马毒素B<Sub>1</Sub>单...
- 李培武唐晓倩张奇张兆威喻理张文
- 文献传递