孙献莹
- 作品数：10 被引量：16H指数：2
- 供职机构：塔里木大学动物科学学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生产建设兵团博士基金兵团科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 哺乳动物X、Y精子分离研究进展被引量：8
- 2008年
- 哺乳动物性别控制是一项复杂的生物技术。这技术能使动物生产与人类意愿相一致性别的后代，意味着生产资料的高效利用和牧业生产效率的提高。性别控制技术也被用于挽救濒危物种，还可以使我们通过后代性别的选择而避免性连锁疾病的发生。性别控制技术具有非常重要的理论和现实意义。
- 高庆华韩春梅孙献莹
- 关键词：哺乳动物性别控制XY精子
- 奶牛X、Y精子性别差异表达基因筛选
- 本论文旨在研究奶牛X、Y精子间特异性基因差异表达情况,采用本实验自行优化设计的固相消减杂交策略构建奶牛Y精子对X精子消减杂交cDNA质粒库,结合生物信息学分析对筛选出的差异基因进行分析,并通过FISH对筛选出的基因的特异...
- 孙献莹
- 关键词：奶牛X精子Y精子差异表达基因荧光原位杂交
- 文献传递
- 一种筛选非人哺乳动物XY精子差异表达基因的方法
- 本发明公开了一种筛选哺乳动物XY精子差异表达基因的方法，包括下列步骤：流式细胞仪分选X、Y精子；分离纯化X、Y精子mRNA；通过Y精子对X精子扣除杂交获得Y精子对X精子差异表达的mRNA；通过X精子对Y精子扣除杂交获得X...
- 高庆华孙献莹韩春梅
- 文献传递
- 奶牛精子RNA提取被引量：5
- 2011年
- 优选3头公牛细管冻精,采用上游法获得纯化精子,以含体细胞污染的精子作对照,应用离心层析柱方法和Trizol一步法相结合提取总RNA,紫外分光光度计检测总RNA的D260/280值和产量,并对总RNA进行RT-PCR和凝胶电泳。结果显示,纯化的牛精子中不含体细胞,奶牛细管精液总RNA在2 h内完成提取,D260/280值为1.80,大于200 bp的总RNA产量为0.92μg/107个精子,精子总RNA进行RT-PCR,电泳后可得到清晰的SRY、LEP和RPS23基因3条带,不含18S rRNA基因条带。结果表明,离心层析柱法和Trizol一步法相结合可获得高质量的奶牛精子总RNA,且纯度和完整度高,可满足分子生物学研究的要求。
- 王惠娥孙献莹高庆华韩春梅沈波武延风
- 关键词：奶牛精子总RNART-PCR
- 异性孪生不育研究进展被引量：1
- 2012年
- 本文综述了当前的异性孪生不育生物学、诊断和非牛物种发生状况的研究。异性孪生胎儿胎盘间血管发生联系导致XX/XY间性嵌合体,而雌性胎儿生殖器发生雄性化导致不孕。异性孪生不育是最常见的牛间性形式,偶尔其他物种。建立早期诊断异性孪生不育的新的诊断方法的基础上检测Y染色体DNA片段的聚合酶链反应较常规核型分析和临床检查显示灵敏度和效率的改善,异性孪生不育检测有较大的经济重要性。新的异性孪生不育主要在异性孪生嵌合体形成机理、缪勒氏管抑制物(MIS)抗癌应用、移植免疫学和致突变致畸形研究领域。
- 宫昌海马桢韩春梅艾布什胡晓龙沈波孙献莹武延风高庆华
- 关键词：不育
- 奶牛精子原位杂交蛋白酶K浓度的优化被引量：1
- 2011年
- [目的]确定奶牛精子原位杂交中最佳蛋白酶K浓度。[方法]设置6个蛋白酶K浓度(10、20、30、40、60、80μg/ml),奶牛精子在37℃消化处理20 min,以精子尾部颈段和中段的存在作为选定最佳蛋白酶K浓度的标准。[结果]30μg/m l蛋白酶K既能有效去除精子蛋白质,又能保持精子的基本形态。[结论]精子原位杂交的最佳蛋白酶K浓度是30μg/ml。
- 沈波孙献莹孟浩高庆华
- 关键词：精子原位杂交奶牛
- 牛精子原位杂交DTT去凝集条件优化被引量：1
- 2011年
- 【目的】确定牛精子原位杂交DTT去凝集处理的优化浓度及时间。【方法】牛精子解冻后经密度梯度离心优选并制片,采用05、、10、20、40、80和100 mmol/L六个DTT浓度以及15、304、5和60 min 4个时间段的28个组合进行去凝集处理,Motic Images Advanced 3.2软件测量精子解聚后头部面积。【结果】40 mmol/L DTT处理45 min精子头部面积为(52.32±4.68)μm2,浓度<40 mmol/L的16个处理组及浓度≥40 mmol/L、处理时间<45 min的6个处理组,精子头部面积小于(52.32±4.68)μm2(P<0.01);浓度>40 mmol/L、时间≥45 min的5个处理组,精子头部面积与40 mmol/L DTT 45 min组差异不显著(P>0.05),但精子形态不完整。【结论】40mmol/L DTT 45 min为较优处理组合。
- 孙献莹孟浩骆新荣沈波高庆华
- 关键词：精子原位杂交DTT解聚
- 精子RNA的研究进展被引量：1
- 2010年
- 高庆华韩春梅唐纪伟孙献莹
- 关键词：精子RNA基因表达
- 一种筛选哺乳动物XY精子差异表达基因的方法
- 本发明公开了一种筛选哺乳动物XY精子差异表达基因的方法，包括下列步骤：流式细胞仪分选X、Y精子；分离纯化X、Y精子mRNA；通过Y精子对X精子扣除杂交获得Y精子对X精子差异表达的mRNA；通过X精子对Y精子扣除杂交获得X...
- 高庆华孙献莹韩春梅
- Sry基因探针FISH检测奶牛XY精子纯度
- 2013年
- 为探讨荧光原位杂交技术(FISH)在评价奶牛精子纯度方面的应用价值,制备地高辛标记Sry基因探针,对分选X、Y精子及常规精子标本进行RNA水平的精子荧光原位杂交分析。结果显示,荧光原位杂交测定分选X、Y精子及常规精子纯度分别为94.6%、93.3%、50.3%,与对应精子纯度比较差异不显著(P>0.05),杂交信号多出现在精子尾部中段。可见:建立的Sry基因探针FISH方法评价奶牛精子纯度鉴定结果准确可靠,为其他精子纯度评价方法提供可靠的技术支持。
- 孙献莹高庆华
- 关键词：奶牛荧光原位杂交
