娄雅欣 作品数:25 被引量:59 H指数:4 供职机构: 北京大学医药卫生分析中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 一般工业技术 更多>>
大鼠趋化素样因子1对主动脉平滑肌细胞的趋化作用和增殖促进作用 被引量:6 2006年 目的:探讨大鼠趋化素样因子1(rat chemokine-like factor 1,rCklf1)对大鼠主动脉平滑肌细胞(aortic smooth muscle cells,ASMC)的趋化作用和促增殖作用。方法:将rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染293T细胞,收获培养上清液,分析rCklf1对大鼠ASMC的趋化作用。同时,用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑 (MTT)实验分析rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染细胞上清液以及rCklf1在细胞内瞬时超表达对ASMC增殖的影响。结果:rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染的293T细胞培养上清液对大鼠ASMC具有趋化作用,10倍稀释的转染上清液所趋化的细胞数是对照组的2.2倍,这种趋化作用可以被浓度为10μg/L的百日咳毒素(pertussis toxin, PTX)抑制。同时,rCklf1对ASMC有促增殖作用,10倍稀释的rCklf1真核细胞表达质粒瞬时转染上清液和rCklf1 在细胞内瞬时超表达均可以促进ASMC的增殖,光密度值分别为对照组的1.3和1.5倍。结论:rCklf1对大鼠 ASMC具有促增殖作用和依赖于Gi蛋白偶联受体(Gi protein coupled receptor,GiPCR)的趋化作用,可能参与动脉粥样硬化的病理过程。 娄雅欣 刘雅楠 宋泉声 张颖妹关键词:趋化因子类 肌细胞 平滑肌 消化性溃疡、胃炎与胃癌患者幽门螺杆菌蛋白质组的差异分析 被引量:24 2006年 目的初步确定胃癌和消化性溃疡、胃炎幽门螺杆菌(Hp)的差异蛋白质。方法通过从胃镜活检胃黏膜组织中分离培养 Hp,应用裂解液、超声破碎法提取 Hp 菌体蛋白质后经 Bradford法进行菌体蛋白质定量,采用双向电泳方法获得 Hp 菌体蛋白质图像,运用 ImageMaster5.0版图像分析软件找到胃癌与消化性溃疡、胃炎 Hp 的差异蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)和四极杆飞行时间电喷雾串联质谱(Q-TOF)鉴定差异蛋白质。最后,通过WWW.matrixscience.com,从 mascot 数据库检索差异蛋白质。结果选择胃癌、消化性溃疡和胃炎 Hp各3例进行双向电泳,与胃溃疡和胃炎相比,胃癌 Hp 中有4个蛋白质点高表达,质潜鉴定结果为硫氧还蛋白、腺苷酸激酶、单链 DNA 结合蛋白和核糖体蛋白,50 S,L7/L12,其 Mowse 分值分别为94、286、139和132,序列覆盖率分别为77%、33%、33%和28%。结论硫氧还蛋白具有抗氧化和抑制细胞凋亡的功能,可能与 Hp 的致癌作用相关,蛋白质组学研究在 Hp 与胃癌关系的研究领域有广泛的应用前景。 张静 丁士刚 钟丽君 林三仁 杨彬 彭嘉柔 娄雅欣关键词:螺杆菌 蛋白质组 免疫电泳 光谱分析 纳米壳聚糖衍生物及制备方法和它的应用 本发明公开了一种属于生物医学纳米材料技术领域的纳米壳聚糖衍生物及其制备方法,该衍生物的制备方法为将壳聚糖溶于稀酸后,与甲基丙烯酸环氧丙酯或丙烯酸环氧丙酯混合,进行自聚接枝反应,得到带有活性环氧基团的中间体,该中间体与氨基... 邹霞娟 娄雅欣 钟丽君 刘丹 杨彬 彭嘉柔文献传递 一种纳米壳聚糖衍生物,其制备方法和用途 本发明涉及生物医学纳米材料技术领域。具体而言,本发明提供一种纳米壳聚糖衍生物,其制备方法以及利用该纳米壳聚糖衍生物高选择性和特异性富集和纯化磷酸化多肽的方法。所述制备方法包括将壳聚糖溶于稀酸后,与甲基丙烯酸环氧丙酯或丙烯... 邹霞娟 刘丹 钟丽君 娄雅欣 杨彬 彭嘉柔文献传递 表面不同修饰的两种多壁碳纳米管引起RAW264.7细胞蛋白质差异表达 被引量:3 2010年 目的:比较表面不同修饰的两种多壁碳纳米管[经酸化处理的多壁碳纳米管(acid-treated multi-walled carbon nanotubes,aci-MWNTs)和牛磺酸表面修饰的多壁碳纳米管(taurine-modified multi-walled carbon nanotubes,tau-MWNTs)]引起小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞蛋白质表达的差异。方法:两种碳纳米管均以20mg/L的剂量,24h的时间染毒细胞,并设置空白对照组;运用尿素裂解、冰浴超声的方法破碎细胞,提取细胞全蛋白,运用二向凝胶电泳分离细胞全蛋白,寻找银染凝胶图像上表达差异蛋白点,对差异蛋白行质谱分析鉴定,在蛋白水平上探究两种MWNTs对细胞作用的机制。结果:两种碳纳米管处理的细胞,表达有显著差异的蛋白点共13个,功能包括凋亡相关、钙结合、细胞周期相关、DNA合成、蛋白质折叠和能量代谢等方面,并与本课题组前期研究观察到的MWNTs对细胞凋亡诱导及线粒体损伤等细胞毒性结果相吻合。结论:两种MWNTs均能引起RAW264.7细胞蛋白表达的变化,表面不同修饰的MWNTs作用有差异,高通量蛋白质组学方法有望用于碳纳米管生物学效应及毒性机制研究。 沈臻霖 聂海瑜 王海芳 杨彬 钟丽君 邹霞娟 娄雅欣 刘丹 郭健 贾光关键词:巨噬细胞 蛋白质组学 它莫西芬诱导乳腺癌MCF-7细胞自噬的比较蛋白质组学研究 2007年 The differentially expressed proteins between normal and tamoxifen-induced autophagic MCF-7 cells were studied by 2-DE combining with mass spectrometric analysis.Totally,there were 668±99 and 550±97 protein spots detected in the 2-DE maps from normal and autophagic MCF-7 cells respectively,among which 5 changed protein spots were identified by the Q-TOF MS/MS and database search. 娄雅欣 钟丽君 杨彬 陈丽娜 刘丹 邹霞娟 彭嘉柔关键词:PROTEOMICS AUTOPHAGY 人重组核凋亡诱导因子1截短体在大肠杆菌中的表达及纯化 2006年 目的核凋亡诱导因子1(Nuclearapoptosis-inducingfactor1,NAIF1)是本实验室首次克隆和鉴定的新凋亡基因,为了通过Polldown实验研究其结合蛋白,在大肠杆菌中表达和纯化人重组NAIF1(73-327)的截短体。方法通过PCR方法扩增出NAIF1(73-327)cDNA,并插入pGEX-KG载体,实现插入基因的融合表达,对表达产物进行SDS-PAGE、Westernblot和电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF-MS/MS)检测分析。结果DNA测序结果证实成功构建了重组融合表达质粒pGEX-KG-NAIF1(73-327),并在大肠杆菌中稳定表达,表达产物分子量约为53kD,与预期一致,表达量约占菌体总蛋白的22%,纯化蛋白经Westernblot和二级质谱(MS/MS)分析证明表达蛋白为GST-NAIF1(73-327)融合蛋白。结论获得了重组GST-NAIF1(73-327)融合蛋白的高效表达,为下阶段NAIF1的结构与功能研究打下了基础。 韩普 莫晓宁 钟丽君 杨彬 马大龙 娄雅欣关键词:重组蛋白 蛋白纯化 大肠杆菌 一种纳米壳聚糖衍生物亲和介质,其制备方法和用途 本发明涉及生物医学纳米材料技术领域。具体而言,本发明提供一种纳米壳聚糖衍生物亲和介质,其制备方法,以及利用该亲和介质分离和富集蛋白质分子的方法。所述制备方法包括将壳聚糖溶于稀酸,再与甲基丙烯酸环氧丙酯或丙烯酸环氧丙酯混合... 邹霞娟 钟丽君 刘丹 娄雅欣 杨彬 彭嘉柔PDCD5多肽在肿瘤化疗及器官保护中的用途 提供了PDCD5多肽或编码其的多核苷酸在制备癌症化疗增敏剂中以及保护正常或患病组织器官免受损伤或进一步损伤的用途。还提供了包含化疗药物和增敏有效量的PDCD5多肽或编码其的多核苷酸的药物联合。 王应 马大龙 宋泉声 张颖妹 娄雅欣 克晓燕 史琳 王艳芳文献传递 人重组趋化素样因子1在果蝇S2细胞中的表达和功能研究 被引量:1 2008年 目的在果蝇S2细胞中表达人趋化素样因子1(chemokine-like factor1,CKLF1),并对其分泌形式进行功能研究。方法构建pMT/V5-His—CKLF1表达质粒,转染S2细胞,筛选并鉴定阳性细胞克隆,用兔抗人CKLF1多肽抗体对其培养上清进行Western blot检测,并分析其趋化活性和促C2C12细胞增殖活性。结果RT—PCR证明CKLF1在S2细胞中高效转录;通过Western blot在细胞培养上清中可检测到表达的重组CKLF1蛋白;其对人外周血中性粒细胞和淋巴细胞有较弱的趋化活性,对C2C12细胞具有增殖促进作用。结论在果蝇S2细胞中成功表达了人重组CKLF1,并证实其存在分泌形式且具有趋化活性和促C2C12细胞增殖活性。 张颖妹 李婷 娄雅欣 韩文玲 马大龙关键词:趋化素样因子1 趋化因子 C2C12细胞