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限制性内切酶介导的粉红粘帚霉67-1转化体系构建被引量：2: 2013年; 本文将含有潮霉素抗性基因(hph)的质粒pAN7-1通过限制性内切酶介导法转入植病生防真菌粉红粘帚霉Clonostachys rosea 67-1中,并由此建立该生防真菌的遗传转化体系。研究结果表明,PEG介质含量、限制性内切酶种类和浓度、质粒形态和反应时间对转化效率具有显著的影响。当质粒经线性化后加入40%PEG3350和20 U HindⅢ,室温下转化10 min时,转化效率可达到30～40 CFU.μg 1质粒DNA。PDA平板上连续培养3代,再转接到潮霉素抗性平板中,获得遗传稳定的转化子。PCR检测、Southern杂交和Real-time PCR检测等证明hph基因已整合到基因组中,且多为单拷贝插入。对随机挑取的50个转化子生长性状的测定结果表明,20%的转化子在PDA培养基中生长较快,12%的转化子产孢水平较高;另有16%～20%的转化子生长缓慢、产孢量减少;还有4%的转化子生长微弱,且无明显产孢现象。上述方法可以成功用于在粉红粘帚霉中引入外源基因,为今后生防粘帚霉高效工程菌株的构建提供了依据。; 许梦秋姜杰孙漫红谢响明李世东; 关键词：原生质体转化潮霉素抗性

木素过氧化物酶的研究进展被引量：6: 2009年; 木素过氧化物酶是一种能降解木素,由微生物分泌的胞外酶,广泛应用于生物制浆、纸浆的酶法漂白、有机污染物的降解和环境的生物修复等方面。介绍了木素过氧化物酶的来源、结构与性质、催化机理以及基因工程方面的研究成果,并对其可能带来的工业应用前景以及今后的研究方向进行了展望。; 姜杰杨暖丁梦旋汪文静王子元谢响明; 关键词：木素过氧化物酶放线菌基因克隆与表达

菌寄生相关基因对粉红粘帚霉的转化及高效转化子特性研究: 粘帚霉(Clonostachys spp.)是一类分布广泛的土壤习居菌,也是目前己知的颇具应用前景的植物生防因子之一。粉红粘帚霉(C. rosea)67-1菌株是由中国农业科学院植物保所土传病害实验室分离筛选得到的一株高...; 姜杰; 关键词：几丁质酶基因原生质体转化生物防治; 文献传递

粉红粘帚霉67-1转几丁质酶基因转化子生物学特性及高效工程菌株的筛选被引量：2: 2012年; 通过原生质体转化法,制备粉红粘帚霉67-1转几丁质酶基因的转化子,通过潮霉素抗性平板初筛及PCR复筛,共获得530个转化子。对其生物学性状测定表明,3株转化子产孢量明显增加,3株转化子生长量显著提高,比色法测定发现40%的转化子几丁质酶活高于野生型菌株,对峙试验发现25%的转化子抑菌效果明显提高。初步筛选出生长快速、产孢量多、几丁质酶高、对菌核抑制效果明显的转化菌株TC-8、TC-64、TC-298、TC-406、TC-514,对其进行抗大豆菌核病防效试验测定,结果表明TC-8、TC-64、TC-298转化子防病效果明显优于67-1原始菌株和化学农药,通过实时荧光定量PCR验证,发现此3株工程菌株几丁质酶表达量明显增加。; 姜杰谢响明李世东; 关键词：几丁质酶基因原生质体转化转化子生物学特性

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姜杰