吴人亮
- 作品数：117 被引量：630H指数：12
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原位细胞凋亡TUNEL法的改进及其应用被引量：25
- 2004年
- 目的 :寻找一种能快速、准确检测以石蜡切片、冰冻切片与细胞爬片或涂片等为实验材料的原位细胞凋亡的 TUNEL法。方法 :在原已建立的 TUNEL技术基础上作了如下改进 :1石蜡切片用微波修复技术替代蛋白酶 K的消化作用 ;冰冻切片与细胞爬片或涂片用含 0 .1 % Triton X- 1 0 0和 0 .1 %枸橼酸三钠混合液作穿透处理。 2在滴加反应混合物前 ,切片用 0 .1 %焦碳酸二乙酯 ( DEPC)浸泡 ,抑制内源性核酸内切酶活性。 3在 POD转换剂前 ,切片用 3% H2 O2 -甲醇液阻断内源性过氧化物酶活性 ,并用正常山羊血清封闭非特异结合位点。4苏木素套染细胞核。结果 :改进后的 TUNEL法能特异地显示凋亡细胞为棕黄色 ,其他细胞核为蓝色 ,且对比明显 ,背景浅 ,组织结构完整清晰 ,便于显微照相等特点。结论 :改进后的 TUNEL法是一种快速、准确检测以石蜡切片、冰冻切片与细胞爬片或涂片等为实验材料细胞凋亡的有效方法。
- 袁永辉吴人亮王曦陈多恩
- 关键词：细胞凋亡TUNEL法原位缺口末端标记
- 小鼠原核表达载体pQE30/FGFR-1的构建及表达鉴定
- 2006年
- 目的构建小鼠FGFR-1胞外段基因重组原核表达载体pQE30/FGFR-1,并在大肠杆菌JM109中表达。方法利用RT-PCR技术,从胚肝中扩增出小鼠的FGFR-1胞外段基因的cDNA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠杆菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠杆菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40kDa的蛋白质条带。结论成功构建小鼠原核表达载体pQE30/FGFR-1并在大肠杆菌中有效表达,纯化后获得具有活性的重组蛋白质。
- 郑少江郑少萍吴人亮焦嫦亮赵霞姜虹
- 关键词：基因重组原核表达
- 急性播散型组织胞浆菌病临床病理分析(附一例尸检报告)
- 1993年
- 组织胞浆菌病（histoplasmosis,HP）在国内仅见少数散在病例,而新生儿 HP 尚未见报道。我们最近尸检一例新生儿,作了光镜、电镜观察,确诊为急性播散型 HP,并着重对该病临床和病理变化进行了分析。1 病史摘要男婴,因出生反应低下,于出生后13h 入院,孕30+8周,顺急产。入院检查:体温不升,呼吸56次/min,脉搏110次/min,血压9.06/6.27kPa,体重1.
- 漆红张毅吴人亮
- 关键词：组织胞浆菌病病理学
- 细胞凋亡、胀亡和坏死——关于细胞死亡的新认识被引量：35
- 2002年
- 吴人亮李娜萍
- 关键词：细胞胀亡细胞坏死细胞凋亡
- 香烟烟雾提取物对小鼠气管环上皮钙粘附素表达的影响被引量：1
- 2000年
- 体外进行器官培养 ,通过免疫组织化学和原位杂交方法检测香烟烟雾提取物 (CSE)作用 48、 72 h,小鼠气管上皮细胞上皮钙粘附素 (E- cd)表达的变化。结果表明 ,正常对照组 E- cd分布于气管假复层纤毛柱状上皮细胞连接处的胞膜上 ,5 0 % CSE作用后 ,膜上 E- cd表达减少 ,随着作用时间延长 ,胞浆内 E- cd表达明显增加 (P<0 .0 5 ) ,而细胞内 E- cd m RNA含量无明显变化。提示 ,CSE对小鼠气管上皮细胞 E- cd表达的调控在翻译后水平 ,胞膜上 E- cd表达的下调与吸烟所致气道上皮细胞的损伤修复过程相关。
- 王曦吴人亮郝天玲郝春荣陈春莲
- 关键词：器官培养烟雾吸入损伤香烟烟雾提取物小鼠钙粘附素
- 鼻部动脉畸形致频发鼻腔大出血一例
- 2004年
- 王志斌崔永华葛新黄志诚吴人亮胡国栋邓仲端
- 关键词：并发症
- 支架蛋白IQGAP1-细胞黏附和迁移的关键纽带被引量：1
- 2007年
- 支架蛋白IQGAP1发现能与许多重要的细胞活动紧密相关,如黏附和迁移。研究发现在损伤修复、组织发展、肿瘤转移等过程中,IQGAP1的表达和功能有明显改变。同时作为Rho GTPase信号的主要效应因子,IQGAP1能传递细胞外信号至黏附素复合体、细胞骨架以及细胞核。通过上述信号通路,IQ-GAP1协助细胞完成一系列重要生理病理活动。
- 汪永平吴人亮
- 关键词：细胞黏附细胞迁移
- 吸烟对呼吸道上皮损伤机制的研究被引量：3
- 2005年
- 目的研究吸烟小鼠不同阶段气道上皮的形态学变化以及上皮γ-连环素(γ-catenin,γ-cat)的表达,探讨γ-cat在吸烟对呼吸道上皮损伤过程中的作用。方法动物实验按时间将段分成5组:S1M、S2M、S4M、S5M、S6M及正常对照组(SC)。以常规苏木素-伊红(HE)染色光镜观察其形态学变化;以免疫组织化学技术研究γ-cat的表达;以原位杂交技术研究γ-catmRNA的表达;以图像分析技术随机检测15个细支气管上皮细胞表达的平均吸光度值。结果随吸烟时间延长,小鼠气道上皮细胞形态依次呈损伤、修复、过度增殖的形态学改变;除S5M组γ-cat染色的平均吸光度值高于SC组外,吸烟组小鼠气道上皮细胞γ-cat染色的平均吸光度值均低于SC组;SC组小气道上皮增殖细胞核抗原(proliferingcellnuclearantigen,PCNA)阳性细胞较少(P<0·001)。S1M组小气道上皮PCNA阳性细胞虽有增加但不明显。其余各吸烟组小鼠小气道上皮PCNA阳性细胞率均明显增高(P<0·01)。结论香烟烟雾对气道上皮存在损伤作用;γ-cat在呼吸道上皮细胞损伤与修复中发挥作用。
- 刘志艳隋少峰王志富高鹏牟坤吴人亮
- 关键词：Γ-连环素气道上皮吸烟
- Sildenafil下调Myocardin基因在低氧诱导的大鼠肺动脉高压中的表达
- Myocardin基因已被证明是平滑肌细胞分化过程中的一个关键调节因子,而平滑肌细胞则在低氧诱导的肺动脉结构重塑和肺动脉高压中扮演重要角色。本研究主要观察myocardin 基因在低氧诱导的重塑肺动脉中的表达情况以及磷酸...
- 朱朋成黄磊葛晓娜晏菲吴人亮敖启林
- 关键词：MYOCARDIN平滑肌细胞肺动脉高压低氧
- 文献传递
- 香烟烟雾提取物对猪气道上皮细胞β-连环素及酪氨酸磷酸化的影响被引量：8
- 2001年
- 目的 观察香烟烟雾提取物 (CSE)和酪氨酸激酶抑制剂 (tyrophostin 2 5 )对气道上皮细胞(AEC)酪氨酸磷酸化程度、细胞Src蛋白 (c Src)及 β 连环素 (β cat)表达的影响 ,探讨细胞酪氨酸磷酸化程度及β cat在吸烟致AEC损伤和修复中的作用及调控机制。方法 体外培养猪AEC ,将培养细胞分成 3组 :N组 :加无血清培养基 ;C组 :在无血清培养基上分别加CSE ;CT组 :加tyrophostin 2 5及CSE。每组随机检测 30 0个AEC中 β cat免疫细胞化学染色的分布规律 ;利用图像分析技术 ,每组随机检测30个AEC的酪氨酸磷酸化程度、c Src、β catmRNA的变化。 结果 C组加入 2 0 %的CSE作用 4h和 2 4h后 ,AEC蛋白质酪氨酸磷酸化程度分别是N组的 1 5 1倍和 3 44倍 (P <0 0 0 0 1) ,胞膜上 β cat阳性表达率分别为 2 6 7%和 38 7% ,较N组 (分别为 83 3%和 81 3 % )明显下降 (P <0 0 0 10 )。与N组比较C组胞质中c Src的浓度分别降低了 47 9%和 5 1 4% (P <0 0 0 0 1) ;CT组酪氨酸磷酸化程度及胞膜上 β cat表达的变化接近N组。而C组和CT组 β catmRNA含量均较N组有明显下降 (P <0 0 0 0 1)。结论 上皮细胞的蛋白质酪氨酸磷酸化程度的变化可能介导了香烟对气道上皮细胞的损伤 ,而 β
- 陈芳吴人亮王曦郝天玲
- 关键词：香烟烟雾提取物气道上皮细胞Β-连环素酪氨酸磷酸化吸入性损伤
