吕杰 作品数:81 被引量:403 H指数:12 供职机构: 新疆大学生命科学与技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术产业化示范工程 新疆维吾尔自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 理学 更多>>
硅胶干燥罗布麻叶片DNA提取及RAPD反应体系建立 被引量:4 2013年 【目的】得到适用于罗布麻RAPD的最优体系。【方法】以伊犁地区新源县罗布麻硅胶干燥叶片为材料,采用TIANGEN试剂盒提取罗布麻基因组DNA,得到满足RAPD(Random amplified polymorphic DNA)分析的罗布麻基因组DNA。【结果】通过单因素优化实验,得到罗布麻RAPD分析的最佳反应体系为:Mg2+(2.0mmol/L)、dNTPs(0.5 mmol/L)、primer(0.4 mmol/L)、DNA(1μL)、Taq酶取1μL、10×buffer取1μL,总反应体系为10μL;扩增程序为:在94℃下预变性,然后进行42个循环(94℃变性30 s、38℃退火30 s、72℃延伸2min),最后在72℃延伸7 min。【结论】提取的罗布麻总DNA均有较高的质量,适合RAPD分析;Tiangen植物基因组DNA提取试剂盒对罗布麻基因组DNA有着良好的提取效果;对罗布麻RAPD-PCR中Mg2+、dNTPs、DNA聚合酶和引物浓度进行优化,较为理想的各因子用量和扩增程序为:Mg2+(2.0 mmol/L)、dNTPs(0.5mmol/L)、primer(0.4 mmol/L)、Taq酶(0.5 U/μL)、DNA(40 ng),总反应体系为10μL;扩增程序为:在94℃下预变性5 min,然后进行42个循环(94℃变性30 s、38℃退火30 s、72℃延伸2 min),最后在72℃延伸7 min。 苏前 吕杰 任曼丽 冉启洋 张雪妮 吕光辉关键词:罗布麻 RAPD体系 DNA提取 离子束诱变育种研究及应用进展 被引量:13 2005年 阐述了离子束诱变的生物效应,研究中有待解决的问题,介绍了离子束诱变在农业、工业育种上的研究进展及成果,并展望了今后的研究前景。 陈恒雷 吕杰 曾宪贤关键词:离子束诱变 育种研究 生物效应 氮离子注入介导麻黄基因组DNA转化酵母菌 被引量:9 2008年 目的以麻黄碱为目标产物,探讨氮离子(N+)注入介导麻黄基因组DNA在酵母菌中的转化。方法通过N+注入介导蓝麻黄基因组DNA分别在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae和异常汉逊酵母Hansenula anomala中随机转化,转化后的酵母菌经BTB指示性辅助筛选、斜面传代和液体培养后,用铜铬盐定性检识和RP-HPLC方法,检测重组酵母菌胞外和胞内麻黄碱的量。结果获得了遗传稳定的以葡萄糖为碳源、NaNO3为氮源生物合成麻黄碱和(或)伪麻黄碱的重组酵母菌9株。液体培养72 h,RP-HPLC测试胞外麻黄碱和伪麻黄碱的最高量分别为18.85和2.88 mg/L;胞内麻黄碱和伪麻黄碱最高量分别为4.29和22.16 mg/g干细胞。结论采用离子注入介导麻黄基因组DNA大分子转化技术,通过适当的筛选方法,可获得易于人工培养的产生麻黄碱等次生代谢产物的微生物工程菌株。 吕杰 金湘 毛培宏 凌海秋 樊永红 武宝山 欧阳平凯关键词:氮离子注入 麻黄碱 激光诱变技术在生物育种中的应用 被引量:25 2007年 阐述了激光诱变技术的机理,介绍了激光诱变技术在农业育种、微生物育种和其他生物育种方面的应用成果,提出了激光诱变技术在生物育种应用中存在的问题并展望其发展方向。 冯光文 成浩 徐辉 吕长武 吕杰 曾宪贤关键词:激光诱变 生物育种 一种二氢鞘氨醇羟化酶基因及编码的多肽 本发明公开一种二氢鞘氨醇羟化酶基因及编码的多肽。所述的二氢鞘氨醇羟化酶基因片段的碱基序列,全长为438bp,其氨基酸序列中101个氨基酸组成的蛋白质。本发明克隆分离了一种在酵母中可催化二氢鞘氨醇在C4位羟基化生成植物鞘氨... 吕杰 毛培宏 金湘 马媛食(药)用真菌多糖研究进展 被引量:18 2005年 综述了食(药)用真菌多糖的提取工艺、化学结构、生物活性以及食(药)用真菌多糖产品的开发现状,展望了 食(药)用真菌多糖的研发前景。 吕长武 付永前 陈恒雷 吕杰 曾宪贤关键词:化学结构 生物活性 艾比湖原核微生物菌群结构演变与环境因子关系分析 被引量:4 2020年 用非培养法获得新疆维吾尔自治区艾比湖湖底沉积物原核微生物菌群组成,并与已有盐湖原核微生物菌群数据进行比对,分析湖泊由淡水湖向盐湖演替过程中原核微生物群落结构变化规律。实验获得艾比湖原核微生物16S rRNA基因序列,并从NCBI数据库下载赛里木湖、柴窝堡湖和顿巴斯他乌盐湖3个湖泊的非培养原核微生物16S rRNA基因序列数据。用不同盐湖细菌和古菌16S rRNA序列信息构建系统发育树并与其理化指标进行典型性相关分析。同源比对及聚类结果显示,艾比湖湖底沉积物中细菌包括4个门,拟杆菌门(Bacteroidetes)占克隆文库的64%,变形菌门(Proteobacteria)占9.4%,厚壁菌门(Firmicutes)占3.4%,放线菌门(Actinobacteria)占2.6%,此外含有未分类类群20.6%。古菌含有两个门,广古菌门(Euryarchaeota,98.3%)和盐纳古菌门(Nanohaloarchaeota,1.7%)。不同盐湖系统发育树结果显示,随盐度增加,盐湖细菌从变形菌门向拟杆菌门演替;古菌从奇古菌门和泉古菌门向广古菌门和盐纳古菌门演替。RDA结果显示,Na^(+)、Cl^(-)、SO_(4)^(2-)和矿化度对盐湖原核微生物多样性结构起到决定性的作用,K^(+)、Mg^(2+)和Ca^(2+)对艾比湖菌群结构影响作用最为显著。原核微生物群落会随着湖水盐浓度的增加和盐湖化学成分的不同而发生演替。 马雪莉 吕杰 马媛 吕光辉关键词:艾比湖 原核微生物 多样性 系统发育 离子束诱变育种研究及应用进展 被引量:29 2005年 本文阐述了离子束诱变的生物效应,研究中有待解决的问题,介绍了离子束诱变在农业、工业育种上的研究进展及成果,并展望了今后的研究前景。 陈恒雷 吕杰 曾宪贤关键词:离子束诱变 育种研究 生物效应 低能N+束注入阿魏菇菌丝离子束加速能量及诱变剂量的初步研究 对阿魏菇菌丝低能N+束注入离子束加速能量及诱变剂量进行了初步研究.结果表明,菌落数随着离子加速能量的增加呈'先降后升再降'的变化曲线,以曲线波峰处的能量值作为诱变敏感性指标,可初步确定诱变阿魏菇菌丝的离子束加速能量;新生... 陈恒雷 吕长武 吕杰 武宝山 曾宪贤关键词:阿魏菇 菌丝 新疆艾比湖沉积物中免培养放线菌的多样性 被引量:3 2016年 【目的】采用免培养的方法研究新疆艾比湖湖底沉积物放线菌组成及多样性。【方法】采集并混合5份艾比湖湖底沉积物样本,并提取其总DNA,采用放线菌通用引物对其16S r RNA基因序列进行Touchdown PCR,构建放线菌16S r RNA基因文库。蓝白斑筛选后随机挑选白色克隆分析,利用限制性内切酶HhaⅠ进行酶切分型,挑选具有独特限制性片段差异的阳性克隆进行测序分析。序列经Chimera Check检测,BLAST同源比对及构建16S r RNA基因序列系统发育树。【结果】随机挑选192个白色克隆,其中166个为阳性克隆,选取51个具有独特限制性片段差异的克隆进行序列分析。测序结果进行比对以及Chimera Check检测后,共获得36个可操作单元(Operational Taxonomic Units,OTUs),Gen Bank注册号为KR182090-KR182131。文库覆盖度结果表明克隆文库涵盖了本环境中90.4%的放线菌类群。聚类结果显示,艾比湖湖底沉积物中放线菌分为2个类群,第1个类群属于放线菌门(Actinobacteria),放线菌纲(Actinobacteria)中的放线菌目(Actinomycetales)、丙酸杆菌目(Propionibacteriales)、微球菌目(Micrococcales)和棒杆菌目(Corynebacteriales)4个目,该类群占克隆文库18.1%;另外1个类群属于Unclassified Actinobacteria的类群,分为3个不同的group,占整个克隆文库的81.9%。【结论】新疆艾比湖湖底沉积物中存在多种未知的放线菌类群。 吕杰 吕光辉 马媛关键词:艾比湖 放线菌 多样性