刘梦海
- 作品数:2 被引量:20H指数:2
- 供职机构:山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 过量DMSO显著降低低模板浓度PCR扩增的特异性被引量:10
- 2001年
- DMSO通常经验性地用于提高PCR扩增的效率 ,但是过量的DMSO可以显著降低特异序列的扩增效率 ,尤其是导致非特异性扩增的现象却被忽视。在 6 %的DMSO存在时 ,开始出现非特异条带 ,同时特异扩增产物减少。本文首次报道DMSO对PCR产物特异性的影响并确定了克服上述现象产生的途径 ,即通过增加模板 -引物的比例消除非特异条带。而通常提高复性温度只能部分减少非特异产物 ,不能避免非特异扩增。本文结果有助于提高常规PCR ,尤其是分子遗传学分析中经常使用的随机扩增多态性DNA (randomamplifiedpolymorphicDNA ,RAPD)检测的准确度。
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- 关键词:DMSOPCR特异性基因扩增
- 蛋白质定向进化的研究进展被引量:10
- 2001年
- 定向进化是改造蛋白质分子的一种有效的新策略。主要是在实验室里模拟自然进化过程 ,通过由易错PCR、致突变菌株诱变等方法对编码蛋白质的基因进行随机诱变 ,由DNA改组、随机引导重组和交错延伸等方法进行突变基因体外重组 ,设计高通量筛选方法来选出需要的突变株。它不仅可快速产生工业上有用的新酶 ,而且对研究蛋白质的结构与功能的关系具有非常重要的意义。
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- 关键词:定向进化DNA改组蛋白质