刘康
- 作品数：33 被引量：236H指数：10
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学经济管理生物学理学更多>>
- 玉米TRV-VIGS的优化与顶腐病抗病基因的鉴定被引量：6
- 2019年
- 烟草脆裂病毒(TRV)介导的基因沉默方法简便易行,但在常规试验条件下按照报道的方法操作沉默玉米基因的效率较低,难以实际应用。为了优化TRV-VIGS体系,并鉴定顶腐病抗病基因,本研究以玉米八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因为靶基因,构建沉默载体pTRV2-ZmPDS,从浸种处理、农杆菌菌株、真空辅助渗入和共培养时间4个试验因素优化玉米TRV-VIGS体系,提高基因沉默效率。结果表明,无菌水浸泡种子24 h,剥去种皮后用LB4404农杆菌菌株真空渗入处理60 min,再共培养10 h时,全株白化苗占出苗植株总数的25. 1%~29. 3%,较优化前沉默比率(3. 0%)提高了8~10倍。半定量RTPCR分析表明,与对照和未白化植株相比,白化植株的ZmPDS基因转录水平显著降低。应用优化的TRV-VIGS体系沉默ZmMAC3基因,高抗顶腐病的玉米杂交种先玉335在接种亚粘团镰孢菌后表现出典型的顶腐病病症,表明,与双子叶植物相似,MAC3蛋白是玉米内生免疫和抗病所必需的关键调控因子。综上所述,优化后的TRV-VIGS体系可以应用于玉米基因功能的鉴定。
- 李聪聪安晓晖张中起刘康孙敬
- 关键词：玉米PDS
- 财税体制改革对地方政府土地财政行为影响研究
- 毋庸置疑，分税制财税体制改革以来的近20年是我国地方政府土地财政行为产生和扩张的阶段，也是地区经济发展高度依赖土地财政的时期。然而，地方政府土地财政行为是一种不可持续的短期行为，对社会经济发展产生了显著的扭曲效应，饱受学...
- 刘康
- 关键词：财税体制改革财政分权税收制度预算制度
- 文献传递
- 内源及外源植物激素对陆地棉无絮突变体胚珠纤维初始发育诱导效应的研究(英文)被引量：21
- 1999年
- 采用陆地棉徐州１４２无絮突变体（ＦＬ）与其正常品种（ＷＴ）比较，研究了外源激素对离体胚珠纤维的诱导作用以及纤维初始发育过程中胚珠内源激素（ＩＡＡ，ＧＡ，ＡＢＡ和ｉＰＡ）含量的变化。结果表明，ＧＡ能够诱导离体的正常和突变体未受精和受精胚珠产生出纤维，开花前２ｄ～３ｄ的胚珠培养到天然开花日之后纤维方才突起。开花当天内源ＩＡＡ含量的急剧上升可能是胚珠表皮细胞迅速伸长的一个重要原因。开花前４ｄ到开花后４ｄ突变体胚珠内高水平的ｉＰＡ阻碍其纤维发生。
- 刘康孙敬张天真潘家驹
- 关键词：陆地棉内源激素
- 梅果实特征香气的鉴定及储藏条件对香气物质的影响
- 梅是蔷薇科李属植物,其果实含有大量人体所需的营养成分以及生物活性物质,具有多种生理功能,有利于人体健康,在抑菌、抗氧化、促消化等方面有显著作用,具有很高的食用和药用价值。香气是园艺产品重要的品质指标之一,在果实当中香气有...
- 刘康
- 关键词：气质联用特征香气果梅
- 文献传递
- 一种广谱高效提取植物RNA的试剂盒
- 本发明公开了一种广谱、高效从各种植物组织中提取RNA的方法，属生物化学技术领域。以硼酸缓冲液为缓冲体系首先有效分离和富集植物组织RNA，再以三羟甲基氨基甲烷Tris-盐酸HCl-乙二胺四乙酸钠EDTA-Na<Sub>2<...
- 刘康李茂峰王晋惠颖
- 文献传递
- 陆地棉E3泛素连接酶基因GhPUB 19D的克隆与功能分析被引量：1
- 2021年
- [目的]本文旨在克隆陆地棉U-box E3泛素连接酶基因GhPUB 19D并分析其在抵御生物和非生物胁迫中的功能及其作用机制。[方法]利用PCR从棉花cDNA文库中扩增盐胁迫和大丽轮枝菌处理均上调表达的GhPUB 19D全长cDNA;qRT-PCR分析GhPUB 19D的组织表达特征及其对不同非生物胁迫处理的响应;构建pBIN-GhPUB 19D-GFP载体并导入烟草叶片中,分析GhPUB19D的亚细胞定位;利用病毒介导的基因沉默(VIGS)和转基因过表达GhPUB 19D基因分析该基因对植物的耐盐性和抗病性的影响。[结果]GhPUB 19D基因ORF全长2043 bp,编码680个氨基酸,其编码的蛋白质含有1个U-Box和3个ARM结构域,定位于高尔基体。GhPUB 19D基因启动子区存在多种逆境胁迫响应顺式作用元件。GhPUB 19D在棉花根和叶片中优势表达。聚乙二醇(PEG)、NaCl、脱落酸(ABA)、乙烯(ET)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA3)处理后,均可诱导GhPUB 19D在1 h达到表达峰值。VIGS沉默GhPUB 19D棉花在接种大丽轮枝菌Vd991之后,叶片黄化和枯萎较正常植物更为严重,植株发病率和病情指数均极显著增加。转GhPUB 19D基因可以提高拟南芥在ABA处理下的种子萌发率,但不能减轻ABA对幼苗生长的抑制作用;转GhPUB 19D基因可以提高拟南芥幼苗的耐盐性,ABA的SnRK2.3/2.6信号通路下游的AtABF 3和AtABF4对盐胁迫的响应增强,而AtRD26、AtMYB44、AtRAB18、SLAH3等对盐胁迫的响应减弱。转GhPUB19D基因可以显著减轻大丽轮枝菌病症,显著降低拟南芥植株中大丽轮枝菌含量,提高AtPR1、AtPR2、AtPR3、AtPR4、AtPR5、AtNPR1等系统获得抗性相关基因的表达及其对大丽轮枝菌的响应。[结论]过量表达GhPUB 19D可显著提高植物的耐盐性和黄萎病抗性。
- 金姝雯安晓晖葛冬冬刘康
- 关键词：陆地棉耐盐性抗病性
- 棉花GhVLN4基因在抗黄萎病中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及棉花GhVLN4基因在抗黄萎病中的应用。所述GhVLN4基因，与植物的黄萎病抗性相关。发明人发现在植物受到黄萎病菌侵染时，该基因表达量明显的升高，而在采用部分类型的激素处理时，该基因的...
- 刘康张培培葛冬冬张中起韩明亚张晓彤吕芬妮李丽凤
- 棉纤维初始发育过程中过氧化物酶和吲哚乙酸氧化酶的活性被引量：21
- 1998年
- 选用互为近等基因系的陆地棉品种徐州142和无絮棉突变体，比较研究开花前5d至开花后6d，胚珠内可溶性蛋白质含量、POD和IAA氧化酶活性的变化。结果表明，开花前3d至1d蛋白质大量合成可能与纤维发育相关基因的表达有联系，而POD和IAA氧化酶阻碍纤维的初始发育。
- 刘康张天真潘家驹
- 关键词：棉纤维吲哚乙酸氧化酶POD
- 农杆菌介导的体外萌发花粉玉米转基因方法研究
- 2024年
- 目前,玉米转基因方法主要采用农杆菌介导法和基因枪法,但是这两种方法都需要经过组织培养,实验条件要求较高、耗时长,且受转基因受体的基因型限制。选取杂交种苏玉19为材料,在优化玉米花粉离体萌发培养基的基础上,探索通过农杆菌侵染萌发花粉将外源基因导入玉米花粉,再将农杆菌侵染后的花粉给雌穗授粉从而获得转基因玉米。通过对培养基配方、培养温度、萌发时间、农杆菌浸染时间等技术因子的优化,建立农杆菌介导的外源基因导入离体萌发花粉的玉米转基因新方法,转化率最高可达7.27%。Southern杂交试验结果表明,外源基因整合到了玉米基因组中,该方法为外源基因导入,具有操作简单、成本低、快速培育高产新品种等优点,为玉米转基因提供技术支撑。
- 韩雅利焦宏业王磊史明山范子洋刘康
- 关键词：玉米转基因农杆菌介导
- 棉花Gh14-3-3L2基因的分子克隆及其互作蛋白质的初步鉴定被引量：2
- 2012年
- 根据本实验室蛋白质组学研究鉴定的EST序列,克隆了一个可能在棉花纤维起始和伸长发育阶段起调控作用的棉花14-3-3蛋白质的全长cDNA,定名为Gh14-3-3L2。Gh14-3-3L2蛋白毒性大,难以通过酵母双杂交途径鉴定其互作蛋白质组。因此,本研究首先经原核表达并纯化出添加六联组氨酸标签的Gh14-3-3L2蛋白,以此蛋白质为诱饵,以开花前3 d至开花后6 d正常野生型、徐州142无纤维突变体和Li-1无长绒纤维突变体胚珠或纤维混合蛋白质为猎物样品,采用Pull-down技术分离、富集Gh14-3-3L2相互作用蛋白质,再经2-DE和MALDI-MS/MS串联质谱分析,鉴定了7个可能与Gh14-3-3L2相互作用的蛋白,其功能有作为分子伴侣、参与微囊的运输、代谢、信号转导等。为进一步解析Gh14-3-3L2的功能以及棉花纤维发育的分子调控网络奠定了基础。
- 惠颖王晋孙敬刘康唐灿明
- 关键词：棉花蛋白质相互作用
