刘学武
- 作品数：9 被引量：13H指数：3
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 生物化学实验教学的体会被引量：1
- 2010年
- 总结了生物化学实验课的教学经验,提倡在实验教学过程中,以学生为主体、教师为主导的教学理念,注重各实验环节的配置,灵活运用多媒体和示教的教学手段。
- 茹懿刘学武王秦豪
- 关键词：生物化学实验教学教学方法
- 腺病毒介导NDRG2在体外对人食管鳞癌细胞系Eca-109增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:研究抑癌候选基因NDRG2在体外对人食管鳞癌细胞系Eca-109增殖和凋亡的影响。方法:腺病毒介导NDRG2转染人食管鳞癌细胞系Eca-109,逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测NDRG2基因的mRNA和蛋白表达水平,甲基噻唑基四唑法(MTT法)绘制细胞生长曲线,流式细胞仪(FCM)分别分析细胞周期和细胞凋亡。结果:腺病毒介导NDRG2转染人食管鳞癌细胞系Eca-109后,NDRG2的mRNA和蛋白表达水平明显上调,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪检测显示,与对照组相比,感染后48小时Eca-109细胞G2期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞明显增多(P<0.01);转染后的Eca-109细胞中凋亡细胞明显增多,感染48h后达16.0%。结论:过表达NDRG2可明显抑制人食管鳞癌细胞Eca-109的增殖并诱导细胞凋亡。
- 江宁刘文超刘学武王江刘新平药立波
- 关键词：NDRG2食管鳞癌凋亡腺病毒
- 基于生物信息学的抑癌基因NDRG2相互作用蛋白预测及验证被引量：1
- 2013年
- NDRG2(N-Myc downstream regulator gene 2)是NDRG家族成员之一.以往研究表明,该家族与细胞的增殖和分化有关.而该分子参与的细胞信号通路及调节机制尚未阐明.本研究利用保守蛋白间相互作用(interologs)的生物信息学方法预测NDRG2相互作用分子,并通过免疫共沉淀(Co-IP)及His pull-down蛋白体外结合实验方法对预测结果进行验证.生物信息学软件预测和分析结果表明,细胞中存在多个可能与NDRG2发生相互作用分子.结合文献报道,从中选取了3个候选分子Gnb1、Rgs16及Rgs5进行分子生物学实验验证.Co-IP及His pull-down实验结果表明,3个候选分子中,Rgs5蛋白能够和NDRG2蛋白相互作用,而其它2个候选分子与NDRG2的相互作用未获得实验室方法的验证.研究结果表明,生物信息学分析与实验室验证相结合是一种高效省时的蛋白质相互作用研究策略.通过这种策略证实NDRG2可以与Rgs5蛋白相互作用,为后续NDRG2功能的研究提供了有效的线索.
- 牛天水刘学武李霞茹懿王秦豪张璟
- 关键词：生物信息学NDRG2蛋白质相互作用
- 数据挖掘在NDRG2转录调控和信号转导研究中的应用
- 近年来，高通量技术在生物医学研究中的应用导致了大量生物数据的积累。这些数据涉及基因与蛋白质序列，DNA微阵列和生物医学图像等。为了利用这些数据发现可应用于生物医学研究的信息，数据挖掘技术得以开发和发展。在生物医学研究中，...
- 刘学武
- 关键词：数据挖掘NDRG2转录调控信号转导
- 文献传递
- 腺病毒介导的NDRG2基因对前列腺癌细胞株DU145的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨腺病毒介导的N-myc下游调节基因2(NDRG2)基因对前列腺癌细胞株DU145增殖抑制及诱导其凋亡的作用。方法:以携带人NDRG2基因的腺病毒载体转染体外培养的前列腺癌细胞株DU145。采用Western blot检测目的基因的表达,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测NDRG2对DU145细胞增殖能力的影响。流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡的情况;光镜观察细胞形态学的改变。结果:DU145细胞经腺病毒转染后Western blot检测有NDRG2蛋白(40kD)特异表达。MTT比色及平板克隆实验结果显示NDRG2对DU145细胞生长有明显抑制作用(P<0.05)。流式细胞检测结果显示Ad-NDRG2组凋亡率明显高于对照组及Ad-LacZ组,差异有显著性(P<0.05)。与对照组及Ad-LacZ组比较,光镜下观察可见Ad-NDRG2转染的细胞生长状态明显变差,细胞变圆,边缘模糊。结论:通过腺病毒载体使细胞表达NDRG2基因,可以明显抑制DU145细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡。
- 高磊刘学武刘新平王禾于垂恭赵毅武国军
- 关键词：前列腺肿瘤NDRG2基因腺病毒科凋亡
- 人NDRG2基因截短体在pEGFP-C2真核表达载体中的表达和鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:在pEGFP-C2真核表达载体中表达人NDRG2基因的截短部分并进行鉴定。方法:以含有人NDRG2基因的pGKBT7质粒为模板,通过PCR的方法扩增获得截短的人NDRG2基因,然后克隆入表达载体pEGFP-C2;以荧光显微镜观察和WesternBlotting方法对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中在分子量67kD左右可见与目的蛋白分子量相符的条带,该条带可被Ndrg2单克隆抗体特异性识别。结论:构建了截短的人NDRG2基因真核表达载体,并在真核细胞中(HEK-293)获得成功表达。
- 王健吴琳张健刘学武张璟沈岚刘新平
- 关键词：NDRG2基因PCR
- 用比较基因组学方法分析人NDRG2的生物学功能被引量：3
- 2009年
- 目的:预测NDRG2的功能,为进一步进行实验研究提供线索.方法:用比较基因组学分析ndrg2的转录调控,搜索其同源蛋白以及理解NDRG2的空间结构.结果:人ndrg2有两个转录起始位点,长转录起始位点与牛ndrg2的转录起始点相似;短转录起始点与小鼠ndrg2的转录起始点相似.发现了许多物种中NDRG2的同源蛋白,其中MESK2为NDRG2在果蝇中的同源蛋白.许多NDRG2的结构邻居被找到.NDRG2蛋白中水解酶的关键氨基酸已发生改变.结论:ndrg2在人中有两种不同的转录调节方式,两个转录起始点之间可能存在一个微小启动子;NDRG2同源蛋白只存在于后生生物层,在原核生物层中不存在,这些同源蛋白参与了细胞的分化;NDRG2在空间结构上属于α/β水解酶超家族,但由于关键氨基酸的缺失,其可能没有水解酶活性.
- 江宁刘学武刘文超刘新平
- 关键词：NDRG2基因比较基因组学生物信息学
- NDRG2基因对前列腺癌细胞株PC-3M侵袭转移能力的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 观察NDRG2基因对人前列腺癌细胞株PC-3M侵袭转移能力的影响.方法 以携带人NDRG2基因的腺病毒感染体外培养的PC-3M细胞株,采用Western blot及明胶酶谱实验检测NDRG2、MMP-2、MMP-9蛋白表达情况及相关酶活性的变化.平板克隆实验、细胞生长实验检测NDRG2对PC-3M增殖能力的影响.Transwell实验检测NDRG2对PC-3M细胞体外侵袭能力的影响.结果 Ad-NDRG2感染后,PC-3M细胞中NDRG2表达明显增加,而MMP-2和MMP-9表达水平及活性均降低.噻唑蓝（MTT）比色法（抑制率24 h为16.2%、48 h为24.4%、72 h为43.7%）及平板克隆实验（3组分别为56.3%、55.2%和36.7%）显示NDRG2对PC-3M细胞的生长有明显抑制作用.Transwell显示对照组及Ad-LacZ组穿入下室面的细胞数明显多于Ad-NDRG2组（3组分别为93.0、94.8和50.4）.结论 NDRG2对人前列腺癌PC-3M细胞株侵袭能力有明显抑制作用,提示NDRG2可能在前列腺癌的侵袭及转移中发挥重要作用.
- 高磊刘学武王禾于垂恭袁建林武国军
- 关键词：前列腺癌NDRG2基因
- miz1基因siRNA表达载体的构建及影响HeLa细胞对阿霉素的敏感性
- 2008年
- 目的:构建针对转录因子miz1基因的siRNA表达载体,观察其影响HeLa细胞对阿霉素的敏感性.方法:设计并合成针对miz1基因的siRNA寡核苷酸,克隆入siRNA表达载体,脂质体瞬时转染入HeLa细胞中,用RT-PCR检测miz1基因的mRNA表达水平,用Western Blot检测Miz1蛋白表达水平,用MTT法检测HeLa细胞活力.结果:DNA测序和酶切鉴定证明针对miz1基因的siRNA表达载体构建成功,RT-PCR和Western Blot表明其能降低miz1基因的mRNA表达和蛋白表达.与对照组相比,转染上述干扰载体后的HeLa细胞,在加入阿霉素12h后,细胞活力明显降低(P<0.05),并且干扰质粒与阿霉素存在交互作用(P<0.05),以加入阿霉素12h和24h后最明显.结论:针对miz1基因的siRNA能够抑制人宫颈癌细胞系HeLa中miz1基因的表达并能增强HeLa细胞对阿霉素的敏感性.
- 刘学武沈岚张健刘新平
- 关键词：RNA干涉转染阿霉素
