余晓
- 作品数：7 被引量：23H指数：3
- 供职机构：深圳大学更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学建筑科学经济管理更多>>
- 缢蛏过敏原的分离、鉴定与纯化被引量：3
- 2007年
- 以磷酸盐缓冲液提取蛋白,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其抗原成分进行分析,选用缢蛏过敏患者的阳性血清进行免疫印迹,鉴定出主要与次要过敏原.用高压液相色谱(HPLC)纯化主要过敏原蛋白,鉴定其免疫活性,结果表明,缢蛏粗提液SDS-PAGE显示有18条蛋白条带,含量高的蛋白有6条,其分子量分别为110kD、55kD、42kD、38kD、35kD和28kD,其中以35kD处最为富集.经Western-Blotting鉴定,58kD蛋白为缢蛏的主要过敏原,38kD、28kD和12kD蛋白为缢蛏的次要过敏原.HPLC体积排阻纯化后得9个峰,以SDS-PAGE检测,58kD的蛋白位于第4峰,其中有一条明显的蛋白条带.将该蛋白条带用HPLC反相纯化,得到两个峰.经Western-Blotting鉴定,58kD的主要过敏原位于反相纯化的第2峰.
- 李荔李启沅刘志刚余晓
- 关键词：缢蛏聚丙烯酰胺凝胶电泳免疫印迹高压液相色谱
- 食品过敏原指纹图谱快速检测研究(一)——鲫鱼、鲢鱼总蛋白2-DE指纹图谱分析被引量：12
- 2006年
- 目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法。分析鲫鱼和鲢鱼总蛋白2-DE(2- dimension electrophoresis)指纹图谱,确定食品过敏原指纹图谱快速检测的可行性。方法取新鲜鲫鱼和鲢鱼,去内脏和鱼鳞,在预冷的丙酮中搅碎,用丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,PBS透析,冻干得初提样品。用Clean—up Kit 试剂盒对两种鱼的总蛋白初提样品进行精提。双向电泳第一向IEF选择13 cm非线性胶条(pH=3-10),采用溶胀方法上样,达到平衡后转移胶条进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10％),银染,脱色后扫描图像进行计算机分析处理。结果 2-DE图像显示鲫鱼和鲢鱼总蛋白主要是中等分子量蛋白,呈弱酸性和弱碱性,其蛋白点既有相同点也有差异点。结论通过2-DE指纹图谱分析完全可以区分这两种不同的鱼类,对于差异性蛋白点可以给出明确的判定。
- 吴海强余晓刘志刚
- 关键词：食品过敏原指纹图谱2-DE
- 食品过敏原指纹图谱快速检测研究(二)——河虾总蛋白2-DE指纹图谱重现性分析被引量：8
- 2006年
- 目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法。分析河虾总蛋白2-DE(2-DimensionElectrophoresis)指纹图谱的重现性,确定食品过敏原指纹图谱快速检测的可行性。方法新鲜河虾,去头和虾皮,搅碎后丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,冻干后为初提样品,试剂盒精提,双向电泳IEF选择11cm和13cm两种不同厂家、规格的非线性胶条(pH=3～10)溶胀上样,平衡后转移胶条在不同厂家、型号的电泳槽中进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),银染和考染后扫描图像进行计算机分析处理。结果2-DE谱图显示河虾总蛋白分布较广,其高丰度蛋白主要是一些大分子量酸性蛋白。不同电泳系统,选用不同规格的IPG胶条所得河虾总蛋白2-DE指纹谱图具有良好的重现性。银染灵敏度较高,更适合食品过敏原指纹图谱的快速检测。结论食品过敏原总蛋白2-DE指纹图谱具有良好的重现性和稳定性,可以用于食品过敏原的快速检测。
- 吴海强余晓刘志刚
- 关键词：食品过敏原指纹图谱2-DE重现性
- 跨国公司FDI技术溢出效应研究--以深圳为例
- 余晓
- 关键词：技术溢出效应
- 食品过敏原指纹图谱快速检测研究(三)——花生总蛋白 2- DE 指纹图谱和蛋白点 MALDI- TOF/MS分析被引量：6
- 2006年
- 目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法。分析花生总蛋白2-DE(2-dimensionelectrophoresis)指纹图谱与蛋白点MALDI-TOF/MS分析联用的可行性。方法新鲜生花生去皮搅碎后丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,冻干得初提样品,试剂盒精提,双向电泳IEF选择11cm非线性胶条(pH=3-10)溶胀上样,平衡后转移胶条在电泳槽中进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),考染后扫描图像进行计算机分析处理,同时在胶上任意选择两个蛋白点切胶、脱色、消化后进行MALDI-TOF/MS分析。结果2-DE指纹谱图显示花生总蛋白的分布范围较窄,主要是一些中、小分子量的中性、弱酸和弱碱性蛋白,用PDQuest2-DAnalysis分析软件对此2-DE图谱分析可以发现其中共有178个特征性蛋白点。以花生总蛋白2-DE指纹图谱为基础,进一步对单个蛋白点进行MALDI-TOF/MS指纹图谱分析,结果显示每一个蛋白点都具有自己特征的分子量峰和图谱形状,无需进行肽片段混合物的分析、检索亦可完全区分不同的蛋白点,从而可以对食品过敏原进行更深入、更准确的指纹图谱检测。结论食品过敏原总蛋白2-DE指纹图谱与蛋白点MALDI-TOF/MS指纹图谱分析联用可以更好的进行食品过敏原指纹图谱快速检测研究。
- 吴海强余晓刘志刚
- 关键词：食品过敏原指纹图谱2-DE
- 大豆泛变应原profilin基因的克隆、序列分析和表位预测被引量：3
- 2007年
- 通过生物信息学方法对多种植物性食物和花粉泛变应原proflin基因进行比对,利用其中的高度保守区域设计并合成简并引物,通过RT-PCR克隆得到一个新的大豆profilin基因(396bp,pI为5.21,MW为14,1kD),序列同源性分析发现该基因和已知的多种植物性食物、花粉变应原profilin有较高的同源性(>75%),因此认为其系大豆蛋白泛变应原profilin,命名为Gly m3.02,EMBL/GeneBank数据库登录号为DQ784852,这为进一步重组表达和抗原表位分析等奠定了实验基础。
- 吴凯威余晓刘志刚宋娟娟张红云
- 关键词：大豆PROFILIN基因克隆
- 一种检测食物过敏原的仪器
- 本发明涉及一种检测食物中过敏原的检测仪器。用于对常见的食物过敏原进行定性和定量检测。具体来说，用缓冲液提取食物样品，FITC进行荧光标记后，加样于毛细管分离检测芯片道上样孔。通过结合了不同食物过敏原单抗或多抗的亲和毛细管...
- 刘志刚余晓吴海强
- 文献传递
