丁海雷
- 作品数：13 被引量：28H指数：3
- 供职机构：湖州师范学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖州市自然科学基金国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 细胞因子与激素对山羊卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响被引量：1
- 2008年
- 研究了在培养液中添加细胞因子和不同激素对山羊卵母细胞体外成熟和胚胎体外发育的影响。结果表明:添加不同浓度激素组合能促进早期胚胎的发育(P<0.05),1μg/ml雌二醇(E2)、200μg/ml促黄体素(LH)和10μg/ml垂体促卵泡素(FSH)的浓度组合效果最好(P<0.05);胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、白血病抑制因子(LIF)、干细胞因子(SCF)对山羊卵母细胞体外成熟和胚胎体外发育有极显著影响(P<0.01),但不同浓度间无显著影响(P>0.05),添加10 IU/ml LIF、15 IU/ml GDNF和15 IU/ml SCF对山羊胚胎体外发育最好;GDNF+LIF+SCF组和GDNF+LIF组卵母细胞成熟率极显著高于LIF+SCF和GDNF+SCF组(P<0.01),GDNF+SCF和LIF+SCF组间对卵母细胞体外成熟无差异(P>0.05),早期胚胎发育上GDNF+LIF+SCF组高于GDNF+LIF和LIF+SCF组,也高于GDNF+SCF组,均能提高桑椹胚率,但试验组间差异不显著(P>0.05)。可见GDNF、LIF和SCF能提高卵母细胞的成熟率和桑椹胚率,LIF和GDNF对卵母细胞体外成熟有协同作用。
- 赵振华周敏敏钱红娟丁海雷熊伟王杏龙
- 关键词：胚胎体外生产细胞因子激素山羊
- LIF对小鼠卵母细胞体外成熟和体外受精效果的影响被引量：3
- 2008年
- 周敏敏丁海雷钱红娟赵振华王杏龙
- 关键词：卵母细胞体外成熟受精效果LIF卵母细胞成熟早期胚胎
- 细胞因子与激素对山羊卵母细胞体外成熟及卵裂的影响被引量：3
- 2008年
- 本试验研究了在培养液中添加不同浓度的GDNF、LIF、SCF及其不同组合对山羊卵母细胞体外成熟与卵裂的影响。结果表明:GDNF、LIF、SCF对山羊卵母细胞体外成熟有极显著影响(P<0.01),不同浓度间无显著影响(P>0.05),添加LIF卵母细胞体外成熟率极显著高于GDNF、SCF(P<0.01),添加GDNF、LIF对卵裂率有显著影响(P<0.05),添加SCF对卵裂率无影响(P>0.05);GDN+LIF+SCF组和GD-NF+LIF组卵母细胞成熟率极显著高于LIF+SCF和GDNF+SCF组(P<0.01),添加GDNF+SCF和LIF+SCF对卵母细胞体外成熟率无显著差异,可见,LIF和GDNF对山羊卵母细胞体外成熟有协同作用。胚胎的早期发育上GDNF+LIF+SCF组优于GDNF+LIF组优于LIF+SCF也优于GDNF+SCF,均能显著提高卵裂率。
- 赵振华钱红娟周敏敏丁海雷熊伟王杏龙
- 关键词：卵母细胞体外成熟GDNFLIFSCF山羊
- 鸡胚睾丸支持细胞的传代培养与鉴定被引量：2
- 2009年
- 以孵化18d的广西土鸡鸡胚为实验材料,采用两步酶消化法分离鸡胚睾丸支持细胞,置于37℃、5%CO2的培养箱中培养,用低渗的磷酸缓冲液(PBS)处理进行纯化,并对原代和传代支持细胞进行了鉴定。结果显示,睾丸支持细胞生长良好,已传至第4代;经低渗处理,可去除绝大部分的生精细胞,获得的支持细胞纯度可达95%;鉴定结果显示,支持细胞为碱性磷酸酶(AKP)阴性;油红O染色显示,支持细胞胞质内含有大量的脂肪滴,核内有双极小体;丫啶橙染色证明支持细胞的细胞质中富含RNA,细胞核内的DNA含量也较高;罗丹明123染色证明支持细胞含有丰富的线粒体。结论:经两步酶消化法以及低渗处理后能得到纯度较高的鸡胚睾丸支持细胞;37℃、5%CO2的培养条件适宜支持细胞的生长;AKP染色、油红O、丫啶橙和罗丹明123等方法简单易行,适用于鸡胚睾丸支持细胞的鉴定。
- 丁海雷刘莉张易祥王杏龙采克俊
- 关键词：睾丸支持细胞
- 鸡精原干细胞分离与体外培养的初步研究
- 精原干细胞(SSCs)是指既能自我更,又能定向分化,最终形成精子的一类成体干细胞。由于其在转基因动物生产、种质资源保存及治疗不育症等方面有着诱人的前景,已经成为干细胞研究领域的一个热点。不过,目前对 SSCs 的研究主要...
- 采克俊丁海雷丁志丽张易祥张念慈刘莉
- 关键词：精原干细胞体外培养
- 文献传递
- 鸡胚睾丸支持细胞的分离、纯化与鉴定被引量：3
- 2008年
- 以18天鸡胚睾丸为实验材料,经胶原酶和胰蛋白酶两步酶消化法得到生精上皮细胞悬液。在原代培养过程中经差异贴壁和低渗处理后,获得了纯度约为90%的单层支持细胞。对纯化的培养物染色鉴定,结果显示支持细胞为碱性磷酸酶(AKP)阴性,而混杂在其中的另一种体细胞管周细胞为AKP阳性;油红O染色显示,支持细胞胞质内含有大量的脂肪滴,核内见双极小体;吖啶橙染色证实支持细胞富含RNA;罗丹明123染色显示支持细胞富含线粒体;Hoechst33342染色显示支持细胞细胞核呈长卵圆形,核的长轴与细胞长轴平行;免疫荧光染色显示支持细胞胞质中表达波形蛋白。建立了一套简单、易行的鸡胚睾丸支持细胞分离纯化与鉴定方法。
- 采克俊刘莉丁海雷张易祥丁志丽张念慈
- 关键词：鸡胚睾丸支持细胞纯化
- 鸡精原干细胞分离培养初步研究被引量：4
- 2008年
- [目的]建立禽类精原干细胞(SSCs)体外培养系统。[方法]以25日龄广西土鸡为试材,通过睾丸石蜡切片和HE染色,了解SSCs发育情况,用两步酶消化法分离获得生精上皮细胞,比较不同温度、接种密度对鸡SSCs体外培养的影响,并对SSCs的集落进行染色鉴定。[结果]结果显表明,25日龄时SSCs已经形成,但还未分化。37℃适宜作为鸡SSCs的培养温度,5×105个/ml适宜作为鸡SSCs原代混合培养的接种密度。经碱性磷酸酶和糖原染色鉴定,体外培养的鸡SSCs仍保持未分化的特性。[结论]该研究为禽类SSCs体外培养的基础资料提供参考。
- 采克俊刘莉张易祥于立颖丁海雷丁志丽谢小丹
- 关键词：精原干细胞
- 禽类原始生殖细胞的研究进展被引量：1
- 2008年
- 丁海雷刘莉丁志丽张易祥王杏龙采克俊
- 关键词：原始生殖细胞禽类PGCS生殖腺性细胞鸡胚
- 鸡原始生殖细胞的分离培养研究
- 原始生殖细胞(PGCs)作为一种多能性胚胎细胞,具有与胚胎干细胞相似的特性,在一定条件下能保持未分化状态和多向分化潜能,具有很高的应用价值。本研究以孵化5．5天的广西土鸡鸡胚为实验材料,用胰酶消化法从性腺中分离获得 PG...
- 丁海雷采克俊丁志丽张易祥张念慈刘莉
- 关键词：原始生殖细胞体外培养
- 文献传递
- 精原干细胞的分离纯化方法被引量：10
- 2008年
- 采克俊张易祥丁志丽丁海雷张念慈刘莉
- 关键词：精原干细胞分离纯化方法遗传资源保护精子细胞增殖分化生精细胞
