丁巧灵
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生核科学技术更多>>
- 成纤维生长因子(FGF)23基因沉默对甲状旁腺激素(PTH)促成骨细胞分化作用的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究内源性成纤维生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)对甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,应用小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术(RNAi)沉默成骨细胞FGF23表达,应用MTT法和PNPP法检测细胞增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)活性,应用real-time RT-PCR法检测其FGF23、ALP和骨钙素(osteocalcin,OCN)等基因mRNA水平,研究PTH对培养成骨细胞和FGF23基因沉默细胞的作用。结果 rhPTH1-34对培养成骨细胞增殖促进作用明显,分化促进作用弱。1×10-10～1×10-8mol/L rhPTH1-34作用3天,细胞增殖率增加31.6%～50.5%(P<0.05),而细胞比活性未见明显改变。同时其ALP和OCN转录水平轻度上调,分别较对照组增加35%(P<0.05)和16%(P>0.05)。rhPTH1-34上调成骨细胞FGF23mRNA水平(4倍),该作用可被针对FGF23特异的shRNA转染所抑制。FGF23基因沉默后PTH促分化作用明显增强,其ALP和OCN mRNA水平分别较对照组增加1.8倍(P<0.05)和5.8倍(P<0.05),显示内源性FGF23对PTH促分化的干扰作用。结论内源性FGF23可能参与PTH促分化作用的调节,FGF23上调可干扰PTH的促成骨细胞分化作用。
- 王金凤徐小雅丁巧灵周轶金慰芳王洪复高建军
- 关键词：RNA干扰(RNAI)
- 辐照骨髓淋巴细胞对成骨细胞的影响被引量：1
- 2014年
- 探索辐照后骨髓淋巴细胞对成骨细胞增殖分化的影响。采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,密度梯度离心法获取大鼠骨髓淋巴系细胞,137Csγ-射线辐照淋巴细胞和成骨细胞,剂量6 Gy,分组为0 Gy成骨细胞+0 Gy淋巴细胞(0OB0L),0 Gy成骨细胞+6 Gy淋巴细胞(0OB6L),6 Gy成骨细胞+6 Gy淋巴细胞(6OB6L),共培养6 h后,取各组淋巴细胞与正常成骨细胞共培养,MTT和PNPP法观察其对成骨细胞增殖和分化的影响,Real time PCR方法观察成骨细胞ALP、OCN、RANKL和OPG的基因表达变化。结果显示,辐照骨髓淋巴细胞抑制成骨细胞分化,成骨细胞ALP和OCN的表达显著降低,RANKL的表达增高,RANKL/OPG的比值则显著升高。辐照后的骨髓淋巴细胞抑制成骨细胞分化并且可能通过改变RANKL/OPG的比值进而影响破骨细胞的功能。
- 邹琼丁巧灵徐小雅周轶金慰芳高建军
- 关键词：淋巴细胞成骨细胞增殖分化共培养电离辐射
- 雌激素水平对大豆苷原(DAI)促成大鼠骨细胞分化作用的影响
- 2015年
- 目的 观察基础雌激素（estrogen）水平对大豆苷原（daizein,DAI）促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,通过培养液中添加17β-雌二醇改变培养微环境（包括空白对照）雌激素水平,应用MTT法和对硝基苯磷酸盐（p-nitropheny-phosate,PNPP）法检测细胞增殖率和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,应用real-time PCR法检测其雌激素受体α（ERa）、雌激素受体β（ERβ）和过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR）γ的mRNA水平变化,研究雌激素基础水平变化对DAI促成骨细胞分化作用的影响。结果 培养环境中雌二醇水平升高致DAI的促分化作用减弱。其中100nmol/L DAI组ALP比活性较对照组的增幅由雌激素补充前的23%分别降至8%（17β-雌二醇为100pmol/L）和-11%（17β-雌二醇为1 000pmol/L）,显示基础雌激素水平对DAI促分化的拮抗作用。为避免培养液中血清雌激素的可能影响,进一步采用去激素血清培养（含2%去激素胎牛血清）。此时补充17β-雌二醇至100pmol/L,DAI各剂量组细胞ALP比活性较对照组明显增加（16%~21%,P〈0.05）。继续补充雌激素至1 000和10 000pmol/L时,其作用反而减弱。该结果显示,DAI促成骨细胞分化作用与雌激素基础水平有关,低雌激素状态（≤100pmol/L）可增强其作用。为进一步探索其作用机制,我们初步观察了雌激素（100pmol/L）和DAI（100nmol/L）单独或联合作用下成骨细胞ERa、ERβ和PPARγ受体表达变化。结果显示,100pmol/L 17β-雌二醇明显上调ERβ表达,并部分抵抗DAI下调ERβ的作用。结论 DAI的促成骨分化作用与基础雌激素水平有关,低雌激素（≤100pmol/L）状态有利于DAI的促分化作用,而雌激素水平升高可减弱其促分化作用。
- 丁巧灵王金凤徐小雅周轶金慰芳王洪复高建军
- 关键词：雌激素
- 局部辐照大鼠血清对成骨细胞增殖分化的影响
- 2014年
- SD大鼠胫骨部位30 Gy照射2周和12周后处死,取血离心得血清;酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞。采用MTT和PNPP法观察不同血清对成骨细胞增殖和分化的影响;用流式细胞仪观察成骨细胞周期变化;用Realtime PCR方法观察成骨细胞CyclinD、CyclinE、p21和p53的表达。结果显示:辐照2周和12周的大鼠血清抑制成骨细胞增殖,对成骨细胞ALP的表达无明显影响;辐照2周和12周的大鼠血清增加G1期成骨细胞比例,减少S期和G2期细胞比例;辐照2周大鼠血清抑制成骨细胞CyclinD和CyclinE的表达;12周大鼠血清促进成骨细胞p21和p53的表达,抑制成骨细胞CyclinE的表达。局部辐照大鼠血清通过抑制成骨细胞CyclinD和CyclinE表达,上调p21和p53的表达持续阻滞细胞于G1期抑制成骨细胞增殖。
- 周轶邹琼丁巧灵高建军金慰芳徐小雅
- 关键词：电离辐射大鼠血清成骨细胞
- 上海市徐汇区社区就诊患者H7N9禽流感知信行调查被引量：3
- 2014年
- 目的了解上海市徐汇区就诊患者对于H7N9禽流感的认知、态度与行为,为相关部门有针对性地预防控制H7N9禽流感提供科学依据。方法在上海市徐汇区随机抽取3个社区卫生服务中心,将随机抽取的某一时间段内所有就诊患者作为调查对象,共抽取就诊患者194例,采用自行设计的问卷对其进行H7N9相关知信行的调查,录入数据后,使用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果 194名调查对象H7N9禽流感相关知识平均得分为（5.23±0.15）分,其中大学及以上文化程度得分[（5.28±1.79）分]高于高中及以下[（4.34±1.76）分]调查对象;调查对象恐慌程度平均得分为（2.65±1.07）分,信心程度平均分为（4.42±0.70）分。35~59岁调查对象对H7N9禽流感的恐慌最高,分数为（2.98±1.02）分,≤34岁对其信心程度最低,分数为（4.09±0.77）分。大学及以上文化程度、本市户籍的调查对象对政府防控H7N9禽流感的信心程度分别比高中及以下文化程度、非本市户籍的调查对象高。与H7N9禽流感发生之前相比,有23.4%的调查对象在生活中增加了体育锻炼的次数,有52.6%的调查对象禽肉食用量有所减少,并且感冒后不去医疗机构就诊的调查对象占36.2%。不同户籍和不同年龄的调查对象感冒后去医疗机构就诊率差异有统计学意义（χ^2=5.8,P=0.02;χ^2=14.7,P〈0.01）。传统媒体是调查对象了解H7N9禽流感的首要途径。结论就诊患者在部分H7N9禽流感知识、态度与行为方面存在一定欠缺,要根据不同需求的就诊患者进行针对性的健康教育,构筑家庭、社区医疗机构、社会三位一体的H7N9禽流感联防联控体系。
- 吕姝丁巧灵徐蔚琦刘景壹沈红蒋露芳
- 关键词：KAP
