顾栋桦 作品数:61 被引量:114 H指数:6 供职机构: 湖州市中心医院 更多>> 发文基金: 湖州市科技计划项目 国家自然科学基金 湖州市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
RNAi沉默Fascin基因表达对HEp2细胞株生物学特性的影响 2013年 目的通过RNA干扰HEp2细胞,研究Fascin基因表达对鳞癌细胞生物学特性的影响。方法用脂质体转染法把特异针对HEp2基因的双链小RNA干扰片段导入HEp2细胞中,Fascin mRNA及蛋白水平分别用RT-PCR和免疫印迹法检测,细胞增殖活性采用MTT法检测,细胞周期和凋亡水平采用流式细胞仪检测,肿瘤细胞的侵袭能力采用Matrigel体外细胞侵袭实验进行检测。结果 RNA干扰能显著抑制Fascin mRNA及蛋白表达水平;RNA干扰Fascin基因的表达能使HEp2细胞增殖活性明显减低,更多的HEp2细胞处于G_0/G_1静止期,细胞凋亡明显增加,同时抑制了肿瘤细胞的侵袭能力。结论 Fascin基因沉默能抑制HEp2细胞的生长和侵袭能力,并诱导细胞凋亡。 孔静萍 顾栋桦关键词:鳞癌 RNA干扰 膀胱血管周上皮样细胞瘤临床病理观察 被引量:3 2013年 血管周上皮样细胞瘤(perivascular epithelioidcell differention,PEComa)特指由单形性血管周上皮样细胞构成的一种间叶源性肿瘤,其多见于子宫、阔韧带等部位,在由一组少见肿瘤构成的PEComas家族中属罕见类型,而发生于膀胱则更为罕见,目前英文[1]及中文[2-3]文献有关发生在膀胱的报道仅10例。2012年我院诊断膀胱PEComa 1例,现报道如下,并结合相关文献进行复习,以探讨其病理学特征、诊断、鉴别诊断和生物学行为,以期进一步提高对该病的认识。 宋鹏涛 平金良 顾栋桦关键词:膀胱 血管周上皮样细胞瘤 病理学 乳腺导管内增生性病变的克隆性分析 2008年 目的检测乳腺导管内增生性病变的克隆性起源。方法采用激光捕获显微切割技术精确分离增生组织和周围正常组织中的导管上皮细胞,抽提其基因组DNA。以限制性内切酶HpaⅡ消化前后的基因组DNA为模板,荧光PCR法扩增人雄激素受体(HUMARA)外显子1,在DNA测序仪上毛细管电泳,并分析HUMARA两个位点的荧光强度。结果101例组织标本中,有68例PCR扩增HUMARA外显子1成功,并且该位点为杂合性,其中9例普通导管内增生(UDH)和5例导管上皮内肿瘤(DIN)1A在HpaⅡ消化前后的PCR产物均有2条,且荧光强度相近,即它们的X染色体失活是随机的,呈多克隆性。3例UDH、13例DIN1A、28例DIN1B和10例原位癌在HpaⅡ消化前后扩增出1条或2条强度差别较大的条带,提示它们为单克隆起源。结论DIN1A、1B和原位癌为单克隆起源,属于肿瘤性增生。 李华 陈琦 朱荣 顾栋桦 朱虹光关键词:导管内增生性病变 克隆性 腹腔内韧带样型纤维瘤病的CT表现与病理特点 被引量:10 2013年 目的探讨腹腔内韧带样型纤维瘤病的CT表现和病理特点,提高对该病的诊断水平。方法回顾分析12例经手术病理确诊的腹腔内韧带样型纤维瘤病的CT表现,并与病理结果对照。结果 12例腹腔内韧带样型纤维瘤病表现为腹腔内软组织肿块影,主要以膨胀性生长,局部侵犯周围组织、器官。CT平扫呈低密度、混杂密度和等密度影,增强后病变实质成分中度、持续强化;低密度区呈轻度强化或不强化;除1例外其余均无囊变、坏死;病理特点低密度病灶和混杂密度病灶内出现不同程度粘液变性,镜下肿瘤由分布于大量胶原纤维背景中的梭形纤维母细胞和肌纤维母细胞组成,细胞无异型性,核分裂少。结论腹腔内韧带样型纤维瘤具有特征性CT表现,CT对该病的诊断及鉴别诊断具有重要价值。 毛新峰 沈健 黄小燕 赵育英 顾栋桦关键词:纤维瘤病 caveolin-1脚手架样结构域多肽对HEp2细胞迁移和侵袭能力的影响 2016年 目的研究caveolin-1脚手架样结构域(caveolin-scaffolding domain,CSD)多肽对HEp2细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨其分子机制。方法 CSD多肽和乱序多肽由人工合成得到,并在N'末端用生物素标记。用免疫细胞化学法检测CSD多肽在HEp2细胞中的渗透情况,划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell细胞体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力;免疫印迹法检测HEp2细胞中FAK蛋白的表达水平及磷酸化程度。结果免疫细胞化学检测显示CSD多肽能够较好地进入HEp2细胞内;CSD多肽组HEp2细胞迁移能力明显低于乱序组和空白对照组(P均<0.01),而乱序肽组与空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);CSD多肽组发生侵袭的细胞数明显低于乱序组和空白对照组(P均<0.01),而乱序肽组与空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);免疫印迹法检测结果显示,CSD多肽组FAK相对磷酸化程度明显低于乱序组与空白对照组(P均<0.01)。结论 caveolin-1脚手架样结构域多肽可顺利进入HEp2细胞内,而且可以抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭能力,FAK磷酸化水平的下调可能是其中重要的分子机制。 顾栋桦 付琳琳 平金良关键词:CAVEOLIN-1 粘着斑激酶 多肽 鳞状细胞癌 肿瘤浸润 Caveolin-1过表达抑制宫颈鳞癌Hela细胞的体外生长研究 2010年 目的 探讨转染caveolin-1基因对宫颈鳞状细胞癌Hela细胞株体外生长的影响.方法 用脂质体法把caveolin-1真核表达质粒导入Hela细胞内,筛选出稳定高表达caveolin-1的细胞克隆,并用RT-PCR、细胞免疫荧光和免疫印迹法鉴定.MMT法检测细胞的生长能力,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡情况,免疫印迹法检测细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,Erk)1/2的磷酸化水平.结果 转染caveolin-1基因后,成功筛选得到稳定高表达caveolin-1的Hela细胞克隆,与未转染对照组相比,转染后的Hela细胞生长速度明显减慢(P〈0.05),更多的细胞阻滞在G0/G1期[(68.04±2.57)%vs(53.41±1.01)%],凋亡细胞比例增高[(19.18±2.20)%vs(5.63±0.55)%,P〈0.05],Erk1/2相对磷酸化水平明显下降(0.28±0.05 vs 0.81±0.07,P〈0.05).结论 caveolin-1基因能够抑制宫颈鳞癌Hela细胞株的生长、促进细胞凋亡;Erk1/2磷酸化水平下降可能在其抑癌机制中发挥重要作用. 郑庆玲 顾栋桦 平金良 朱荣 陈琦甲状腺肿瘤中着丝粒蛋白A和内皮素表达的临床意义 被引量:1 2013年 目的观察甲状腺肿瘤中着丝粒蛋白A(CENP-A)和内皮素(ET)的表达情况,探讨它们在甲状腺肿瘤中的鉴别诊断价值。方法采用免疫组化S-P法,对320例甲状腺外科手术标本进行CENP-A、ET和Ki-67染色观察。结果乳头状癌组与腺瘤组CENP-A阳性率、ET阳性率差异均有统计学意义(均<0.01);乳头状癌组与滤泡状癌组CENP-A阳性率、ET阳性率差异均无统计学意义(均>0.05)结论 CENP-A和ET在甲状腺癌细胞的生长、增殖过程中起重要作用,对良、恶性甲状腺肿瘤的鉴别诊断有重要价值。 孔静萍 顾栋桦关键词:甲状腺肿瘤 着丝粒蛋白 内皮素 免疫组织化学 Snail、Slug在喉鳞状细胞癌中表达与上皮-间质转化及侵袭转移之间的关系 被引量:2 2014年 目的研究Snail、Slug基因在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨其与肿瘤上皮-间质转化及侵袭转移之间的关系及临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测74例喉鳞状细胞癌组织及30例癌旁组织中Snail、Slug及Vimentin、E-cadherin的表达情况,统计分析其表达的相关性及与各临床病理指标之间的关系。结果 Snail、Slug蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率为58.2%和55.4%,高于癌旁组织中阳性率(13.3%和16.7%,P<0.05)。Snail、Slug蛋白表达与E-cadherin呈负相关性(r=-0.567,P<0.001及r=-0.457,P<0.001),与Vimentin的表达呈正相关性(r=0.453,P<0.001及r=0.376,P<0.001)。Snai、Slug蛋白表达与分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。结论转录因子Snail、Slug可能通过参与与调控EMT过程,与喉鳞状细胞癌的发展和侵袭相关。 平金良 顾栋桦 徐炜 顾元忻 张靖华 宋鹏涛 方炜 刘进 戴利成关键词:SNAIL SLUG 鳞状细胞癌 DNA甲基转移酶在肝细胞癌中的表达及其临床意义 被引量:1 2012年 目的探讨DNA甲基转移酶1(DNMTl)、3a(DNMT3a)和3b(DNMT3b)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学检测47例HCC癌组织、42例HCC癌旁肝组织及12例正常肝组织中DNMTl、DNMT3a和DNMT3b的表达情况,分析三者与临床病理特征的关系。结果DNMTl、DNMT3a和DNMT3b在HCC中阳性表达率分别为80.9%、68.1%和78.7%,在癌旁组织内分别为50.0%、52.4%和57.1%,均明显高于正常肝组织内的阳性表达(16.7%、16.7%和25.0%)。而且DNMTl、DNMT3a和DNMT3b与HCC的病理分化类型及乙肝表面抗原阳性显著相关(P〈0.05)。结论DNMTl、DNMT3a和DNMT3b的异常表达与HcC的发生发展有紧密的关系。 沈苑 顾栋桦关键词:肝细胞癌 DNA甲基转移酶 大肠癌的分子生物学介绍 <正>~~ 顾栋桦关键词:大肠癌 甲基化 锯齿状腺瘤 微卫星不稳定 CMS 分子生物学