目的探讨醒脑静注射液对缺糖缺氧再灌注(oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤诱导SH-SY5Y细胞焦亡的保护作用及机制。方法使用不同浓度醒脑静注射液预处理SH-SY5Y细胞,确定醒脑静注射液给药浓度;将SH-SY5Y细胞随机分为对照组、OGD/R组、醒脑静注射液+OGD/R组(10μL/mL醒脑静注射液)以及醒脑静注射液+OGD/R+核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2 related factor 2,Nrf2)抑制剂组(10μL/mL醒脑静注射液+2μmol/mL ML385)共4组,每组实验进行6次(n=6),采用MTT比色法检测细胞存活率;采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)法测定细胞上清液中白介素18(interleukin 18,IL-18)和白介素-1β(interleukin 1 beta,IL-1β)表达水平;采用Western blot检测GasderminD蛋白(GSDMD-N)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、白介素1β前体(pro-interleukin 1,pro-IL-1β)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)、Nrf2以及凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)表达情况;采用细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒法测定细胞内LDH表达变化情况,采用Hochest/PI染色法观察细胞凋亡情况。结果与对照组比较,OGD/R组细胞存活率[(40.16±3.39)%比(101.3±1.54)%]、Nrf2表达水平[(0.47±0.09)比(1.00±0.00)]明显降低;IL-1β[(46.55±9.59)pg/mL比(9.35±3.33)pg/mL]、IL-18[(35.39±10.63)pg/mL比(7.85±3.04)pg/mL]、LDH渗出率[(0.36±0.04)%比(0.18±0.08)%]、GSDMD-N[(2.24±0.36)比(1.00±0.00)]、NLRP3[(2.15±0.23)比(1.00±0.00)]、pro-IL-1β[(3.08±0.17)比(1.00±0.00)]、caspase-1[(2.20±0.32)比(1.00±0.00)]表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.001);与OGD/R组比较,醒脑静注射液组细胞存活率[(63.69±11.28)%比(40.16±3.39)%]、Nrf2表达水平[(0.89±0.11)比(0.47±0.09)]明显升高,LDH渗出率[(0.25±0.07)%比(0.36±0.04)%]、IL-1β[(33.30±8.60)pg/mL比(46.
