郑建伟
- 作品数：66 被引量：225H指数：9
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划湖北省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 携带人MDA-7/IL-24基因溶瘤腺病毒和干扰素联合治疗裸鼠肝癌实验研究被引量：3
- 2019年
- 目的溶瘤腺病毒成为近年研究肿瘤靶向治疗的热点之一,目前鲜见溶瘤腺病毒SG600-IL24应用于裸鼠移植瘤的报道。本研究利用携带人黑色素瘤分化相关基因7/白介素24(melanoma differentiation associated gene-7/interleukin-24,MDA-7/IL-24)基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24与干扰素联合治疗肝癌裸鼠移植瘤,旨在探讨溶瘤腺病毒基因和新辅助联合治疗肝癌的作用机制。方法构建携带人MDA-7/IL-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24,单独使用该病毒或干扰素以及两者联合治疗裸鼠肝癌模型,观察其抗肿瘤效应。裸鼠随机分为对照组、新辅助治疗组(IFN组)、基因治疗组(SG600-IL24组)和基因治疗+新辅助治疗组(SG600-IL24+INF组)。采用免疫组化方法检测各组肿瘤组织中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达情况。结果成功构建携带人MDA-7/IL-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24载体,溶瘤腺病毒SG600-IL24介导的外源基因MDA-7/IL-24在SG600-IL24组和SG600-IL24+INF组裸鼠体内表达明显增高;对照组、IFN组、SG600-IL24组裸鼠平均生存时间分别为(35.2±1.53)、(67.6±2.10)和(59.2±1.16)d,SG600-IL24+IFN联合治疗组有3只裸鼠生存时间超过120d,达到长期生存,与其他3组比较生存期明显延长,F=68.20,P=0.000 1;SG600-IL24+IFN组裸鼠肝癌体积也明显小于SG600-IL24组(P=0.000 9)或IFN组(P=0.000 4);SG600-IL24联合干扰素能明显降低MMP-2[表达率为(2.0±1.9)%]和VEGF表达[MMP-2表达率为(0.8±1.1)%],作用优于SG600-IL24组、IFN组及对照组,差异有统计学意义,均P<0.001。结论溶瘤腺病毒SG600-IL24联合干扰素对裸鼠人肝癌种植模型有很好的协同抗肿瘤作用,其作用机制可能与抗肿瘤侵袭、转移有关。
- 肖朝文郑小林蔡常春郑建伟申铭
- 关键词：MDA-7/IL-24溶瘤腺病毒基因治疗干扰素
- SATB1在甲状腺癌启动PI3K/Akt信号通路中的作用研究被引量：9
- 2016年
- 目的研究甲状腺癌细胞在发生、发展、侵袭及转移过程中富含AT序列的特异结合蛋白1(SATB1)所起的作用,探讨SATB1在启动PI3K/Akt信号通路中的作用。方法将甲状腺癌细胞随机分成4组:未处理组:除DMEM外不加任何处理;LY294002抑制组:DMEM培养集中加LY294002抑制剂10μmol/L;SATB1诱导剂组:DMEM培养集中加SATB1抗体200μg/L;TSATB1诱导抑制组:DMEM培养集中加SATB1L抗体200μg/L,加LY294002抑制剂10μmol/L。培养24 h后采集培养基中甲状腺癌细胞中血清采用酶联免疫(ELASE)法检测基质金属蛋白酶9(MMP9)、白细胞介素1(IL-1)和IL-6的表达情况,对甲状腺细胞裂解使用Western blotting方法测定PI3K、Akt、P-Akt及PIP3的表达情况,使用免疫组化方法检测甲状腺癌细胞中SATB1的表达。结果免疫组化方法可以看出:在甲状腺癌细胞胞核中SATB1表达为黄色,黄色越深表明表达越重,而在胞浆中无任何表达。不同实验组中SATB1的表达的深浅不一致且差异有统计学意义(P<0.05);其中SATB1诱导剂组蛋白SATB1的表达最高,表达最低的LY294002抑制组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot研究证实,各组中PI3K、Akt、P-Akt及PIP3的表达不同且差异有统计学意义(P<0.05);其中SATB1诱导剂组PI3K、Akt、P-Akt及PIP3的表达最高,而LY294002抑制组最低(P<0.05)。ELASE法结果表明各组中MMP9、IL-1和IL-6的表达不同且差异有统计学意义(P<0.05);SATB1诱导剂组MMP9、IL-1和IL-6的表达最高,而LY294002抑制组最低(P<0.05)。结论 SATB1与甲状腺癌侵袭转移有关;SATB1在PI3 K/Akt信号通路具有启动的作用,同时SATB1可能参与肿瘤的微环境和炎性因子的表达。
- 龚龙许颖温飒飒黄伟易春华童彦初陈文奎郑建伟
- 关键词：甲状腺癌SATB1PI3K/AKT
- G9a特异性siRNA表达载体的构建及在QBC939细胞中对G9a基因表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的构建特异性组蛋白甲基转移酶G9a基因的siRNA表达载体并检测QBC939细胞对G9a表达的抑制作用。方法设计、合成G9a特异性的短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段.克隆到pSilencer neo^TM2.1-U6载体中,构建G9a特异性siRNA的表达载体。EcoRⅠ＋BamHⅠ和EcoRⅠ＋HindⅢ双酶切及测序鉴定重组体,并转染QBC_（939）细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,半定量RT-PCR方法和Western印迹法检测G9a mRNA和蛋白的表达水平。结果双酶切与测序鉴定证实成功构建了G9a-siRNA表达载体,转染人胆管癌细胞株QBC939后,在mRNA和蛋白表达水平对G9a的抑制率分别为55.2%和54.8%。结论运用pSileneer neo^TM2.1-U6载体构建的G9a-siRNA表达载体可有效抑制G9a在胆管癌细胞株QBC939中的表达。
- 陈勇军罗剑郑建伟陈波王剑明邹声泉
- 关键词：胆管肿瘤基因组蛋白甲基转移酶SIRNA
- 携带人黑色素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24选择性促进肝癌细胞凋亡和增殖阻滞被引量：3
- 2017年
- 目的观察携带人黑色素瘤分化相关基因（MDA）-7/白细胞介素（IL）-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24对各种不同转移潜能肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC7721和正常肝细胞L02的作用。方法将携带人MDA-7/IL-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24分别感染人肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC7721和正常肝细胞L02，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、Western blot检测MDA-7/IL-24基因的表达，噻唑蓝（MTT）观察肝癌细胞的生长抑制，Hoechst 33258和流式细胞仪（FCM）检测细胞的凋亡，FCM检测细胞周期。结果RT-PCR和Western blot显示MDA-7/IL-24在肝癌细胞和正常肝细胞中高效表达，ELISA提示细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白也明显增加。MTT和FCM提示MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞的生长[生长抑制率分别为（75.0±2.5）%、（85.0±2.0）%、（86.0±3.5）%，HepG2：F=5.860，Hep3B：F=7.210，SMMC7721：F=7.980，均P=0.000]，促进肝癌细胞凋亡[凋亡抑制率分别为（56.5±4.0）%、（34.4±2.0）%、（43.3±2.5）%，HepG2：F=203.400，Hep3B：F=313.200，SMMC7721：F=130.500，均P=0.000]，阻滞肝癌细胞在G2/M期[G2/M期阻滞分别为（35.4±4.2）%、（47.3±6.2）%、（40.5±5.0）%]，而对正常肝细胞没有明显的促进凋亡和增殖阻滞作用。结论溶瘤腺病毒SG600-IL24能选择性杀伤不同转移潜能人肝癌细胞和诱导凋亡，促进肝癌细胞增殖阻滞，而对正常肝细胞无明显促进凋亡和增殖阻滞作用。
- 肖朝文王从俊李明杰蔡常春郑建伟申铭
- 关键词：溶瘤腺病毒基因治疗
- 纳米磁小体靶向药囊（TM5-FuNC）作用荷人胆管癌裸鼠移植瘤的实验研究
- 研究目的
针对中晚期胆道恶性肿瘤的传统治疗方式,是以胆道支架为主的介入治疗和以氟尿嘧啶为主的区域化疗,邹声泉在国内外研究基础上,提出新的MTDDS模式:采用高新技术研制磁化纳米金属薄膜包覆的支架/(磁化支架/),...
- 郑建伟
- 关键词：胆管癌
- 文献传递
- 携带人mda-7／IL-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24对肝癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察携带人mda-7／IL-24的溶瘤腺病毒SG600IL24对各种不同转移潜能肝癌细胞HepG2、SMMC7721、MHCC97L和正常肝细胞L02的作用。方法将携带人mda-7／IL-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24分别感染人肝癌细胞系HepG2、SMMC7721、MHCC97L和正常肝细胞L02，逆转录．聚合酶链式反应（RT-PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、Westernblot检测mda-7／IL-24基因和蛋白的表达，M1Tr观察肝癌细胞的生长抑制，Hoeehst33258和流式细胞仪（FCM）检测细胞的凋亡，流式细胞仪（FCM）检测细胞周期。结果RT-PCR和Westernblot显示mda-7／IL-24在肝癌细胞和正常肝细胞中高表达，ELISA提示细胞培养上清液中mda-7／IL-24蛋白也明显增加。MTT和流式细胞仪提示mda-7／IL-24能明显抑制肝癌细胞的生长（生长抑制率分别为75％±2．5％，86％±3．5％，72％±1．8％，HepG2：F=5．86，SMMC7721：F=7．98，MHCC97L：F=5．13，均P〈0．01），促进肝癌细胞的凋亡（凋亡抑制率分别为56．5％±4．0％，34．4％±2．0％，43．3％4-2．5％，HepG2：F=203．4，SMMC7721：F=130．5，MHCC97L：F=160．6，均P〈0．01），阻滞肝癌细胞在G2／M期（G2／M期阻滞分别为35．4％±4．2％，40．5％4-5．O％，42．0％±5．0％，HepG2：F=112．5，SMMC7721：F=133．2，MHCC97I．：F=145．5，均P〈0．01），而对正常肝细胞没有明显的促进凋亡和增殖阻滞作用。结论溶瘤腺病毒SG600-1124能特异性杀伤不同转移潜能人肝癌细胞和诱导凋亡，促进肝癌细胞增殖阻滞，而对正常肝细胞无明显促进凋亡和增殖阻滞作用。
- 肖朝文彭志海王从俊于愿陈堃郑建伟张俊薛新波
- 关键词：肝细胞溶瘤病毒基因治疗
- 腺病毒介导的黑色素瘤分化相关基因-7抑制内质网应激蛋白表达阻滞MHCC-97H血管形成及转移机制的研究被引量：1
- 2013年
- 目的 探讨黑色素瘤分化相关基因（MDA）-7抑制内质网应激蛋白表达,以及阻滞MHCC-97H血管形成的机制.方法 以人肝癌细胞株MHCC-97H为实验对象,使用噻唑蓝（MTT）法和流式细胞仪比较Ad.MDA-7及对照组、缺氧组及正氧组的细胞生存率,比较缺氧环境中,MHCC-97H凋亡率的变化.荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测MDA-7、细胞外信号调节激酶（ERK）、E-钙黏蛋白（E-cad）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）-9 mRNA的变化.Western blot检测MDA-7、蛋白激酶样内质网激酶（PERK）、E-cad、VEGF、MMP-9蛋白表达的变化.结果 MTT表明缺氧条件下,正氧组正常肝细胞LO2生长抑制率分别为（12.60±4.85）％,（7.80±0.61）％,Ad.MDA-7对正常肝细胞LO2无生长抑制作用.肝癌细胞株MHCC-97H生长抑制率缺氧组,正氧组分别为（5.10±0.09）％、（4.80±0.05）％.缺氧环境中,ERK、VEGF和MMP-9空白组及空白对照组mRNA表达量为[（18.042 ±5.915）/（17.512 ±6.354）、（22.654±5.976）/（22.587 ±7.741）、（22.654±2.789）/（22.587±8.551）]高于正氧组[（10.987±2.514）/（12.347±4.385）、（15.321 ±4.262）/（15.634 ±8.521）、（15.321 ±6.384）/（15.634±4.423）].缺氧环境中,E-cad mRNA空白组及空白对照组[（6.427 ±0.512）/（6.042±1.972）]表达低于正氧组[（10.987±2.514）/（12.347 ±4.385）],而Ad.MDA-7干预后,ERK、VEGF和MMP-9 mRNA缺氧组及正氧组表达量降低[（4.117±1.843）/（5.683±0.794）、（5.371 ±0.541）/（4.209 ±0.348）、（5.371 ±0.941）/（4.209±0.265）],E-cad表达量明显增加[（19.573 ±5.971）/（21.309±8.544）].PERK、VEGF和MMP-9蛋白表达与mRNA一致.结论 缺氧环境中,肝癌细胞株MHCC-97H生长抑制率与正氧环境中差异无统计学意义,MDA-7基因明显抑制PERK表达,抑制肝癌细胞血管生成作用.同时,MDA-7基因增强E-cad表达,协同其作用,抑制肿瘤细胞转移.
- 郑建伟张晓梅李雁秦仁义申铭吴在德薛新波
- 关键词：白细胞介素-24血管形成
- 黑色素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24促进阿霉素杀伤肝癌细胞MHCC-97L机制的研究被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨黑色紊瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24（MDA-7/IL-24）基因促进阿霉素（ADM）杀伤肝癌细胞,逆转肝癌细胞多药耐药（MDR）的机制.方法 以人肝癌细胞株MHCC-97L为实验对象,使用噻唑蓝（MTT）比色法和流式细胞仪比较Ad. MDA-7联合ADM处理组与ADM组、Ad. MDA-7组对肝癌细胞MHCC-97L和正常肝细胞L02的作用差异.观察MDA-7/IL-24对多药耐药的逆转作用.荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测MDR-1、STAT-3、bcl-2、bax mRNA的变化.Western blot检测gp-170、STAT-3、bcl-2、bax蛋白的表达的变化.结果 MTT表明Ad. MDA-7对正常肝细胞LO2无生长抑制作用（P〉0.05）.LO2细胞Ad. MDA-7联合ADM组与ADM组细胞生存率差异无统计学意义（P〉0.05）.低浓度（100 VP/cell）的Ad. MDA-7联合正常肝细胞的IC50浓度的ADM（1.5 mg/L）使得细胞抑制率从ADM组的17.46%上升到79.50%,生长抑制逆转4.55倍（P〈0.05）.MDR-1mRNA相对表达量从（16.49±0.11）下降至（5.48±0.05）.STAT-3 mRNA相对表达量从（13.17±0.08）上升至（21.57±0.11）.bcl-2及BAX表达与其他实验组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）.联合实验组P-170蛋白的表达量较其他组明显降低,而磷酸化STAT-3蛋白的表达量亦增加.结论 Ad. MDA-7具有逆转肝癌细胞MHCC-97L多药耐药的作用,其下调MDR-1 mRNA的表达的同时,并通过活化STAT-3信号通路的表达促进肝癌细胞凋亡.
- 郑建伟薛新波张晓梅王从俊陈堃乌建利李雁易继林吴在德
- 关键词：阿霉素多药耐药脱噬作用
- 纳米磁性靶向药囊对人肝癌裸鼠移植瘤bcl-2/bax蛋白表达的影响被引量：6
- 2006年
- 目的观察纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗人肝癌裸鼠移植瘤对肿瘤细胞凋亡bcl-2及bax蛋白表达的影响。方法透射电镜观察各组移植瘤形态学特征,免疫组化SABC法测定bcl-2和bax蛋白表达水平。结果电镜观察可见B组(5-Fu)和D组(纳米磁性5-Fu药囊加内磁场)肿瘤组织大量癌细胞凋亡。B和D组bcl-2蛋白表达水平低于A组(生理盐水对照)、C组(纳米磁性5-Fu药囊)和E组(纳米磁小体加内磁场)(P<0.01),D组bcl-2蛋白表达水平低于B组(P<0.01);B组和D组bax蛋白表达水平高于其他三组(P<0.01),D组bax蛋白表达水平高于B组(P<0.01)。结论纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗能够降低bcl-2蛋白表达,增加bax蛋白表达,促进人肝癌裸鼠移植瘤细胞凋亡,提高5-Fu抗肿瘤作用。
- 肖宝来王剑明郑建伟邹声泉
- 关键词：细胞株BCL-2BAX
- 微创置管引流对重症急性胰腺炎早期炎症反应的影响被引量：10
- 2012年
- 目的:探讨微创置管引流对重症急性胰腺炎(SAP)患者早期炎症反应的疗效。方法:将57例SAP且有腹腔积液患者,采用随机数表法分为微创置管引流治疗组(观察组,29例)和常规治疗组(对照组,28例)。两组均给予相同的基础治疗,观察组给予微创置管引流,对照组给予B超引导下穿刺置管引流。检测两组患者治疗前后TNF-α,IL-6,IL-8及C反应蛋白(CRP)等急性炎症指标,并观察肠道功能恢复时间,全身炎症反应综合征(SIRS)持续时间及多器官功能不全综合征(MODS)的发生率。结果:两组患者均有急性炎症反应发生。两组血清炎症指标术后均不同程度逐渐降低,观察组引流后第3,7天TNF-α,IL-6及CRP的水平与对照组比较明显下降(均P<0.05),而血清IL-8引流后第7天明显低于对照组(P<0.05);观察组肠道功能恢复时间、SIRS持续时间均明显短于对照组的(均P<0.01);观察组MODS发生率(13.8%)也明显低于对照组(28.6%)(P<0.01)。结论:微创置管引流治疗SAP,能明显减轻早期炎症反应,促进肠道功能恢复,降低MODS的发生率。
- 张春霞王敏龙官保张俊郑建伟申铭
- 关键词：微创置管引流全身炎症反应综合征多器官功能不全综合征
