郑丹
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 供职机构:南京医科大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- Sepharose 4B混合日本血吸虫22.6kDa/26 GST抗原对小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞的诱导作用
- 2011年
- 目的研究Sepharose 4B颗粒混合日本血吸虫22.6kDa/26GST抗原对CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的诱导作用。方法将不同剂型抗原免疫小鼠,流式细胞术检测脾细胞中Tregs占CD4+T细胞的比例,3H-TDR掺入法检测Tregs的功能。体外用颗粒化抗原负载树突状细胞(DCs),流式细胞术检测DCs表面MHCII类分子、CD40、CD80、CD86,以判定DCs的成熟度,同时用流式细胞术检测负载抗原后的DCs对Tregs的诱导作用。结果Sepharose 4B颗粒混合日本血吸虫22.6kDa/26GST抗原免疫小鼠的脾细胞中,Tregs比例为(11.48±4.12)%,均较其他各对照组高(P均<0.05),其抑制功能(cpm值为720±180.4)亦较其他各对照组增强。体外将脾CD4+T细胞与负载过Sepharose4B颗粒混合rSj22.6/26GST抗原的DCs共培养后,Tregs所占比例为(17.08±80.57)%;而与Sepharose 4B颗粒混合卵白蛋白负载过的树突状细胞共培养后,Tregs所占比例为(30.14±3.62)%,均较对照组增高(P均<0.01)。结论 Sepharose 4B颗粒与抗原蛋白共同存在可以诱导调节性T细胞。
- 周莹石磊郑丹王勇
- 关键词:日本血吸虫SEPHAROSE树突状细胞调节性T细胞
- 日本血吸虫感染小鼠肝脏及脾脏NKT细胞的变化被引量:3
- 2010年
- 目的观察日本血吸虫感染后小鼠肝脏及脾脏自然杀伤(NK)T细胞的动态变化特征。方法将24只6~8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为4组,其中3组每鼠经腹部皮肤感染(14±2)条日本血吸虫尾蚴,分别于感染后3、6、12周剖杀小鼠,分离肝脏及脾脏单个核淋巴细胞,应用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的CD49b单克隆抗体及藻红蛋白(PE)标记的CD3e单克隆抗体标记细胞,流式细胞仪检测CD3/CD49b双阳性的NKT细胞占单核淋巴细胞的比例。体外刺激实验中将分离的正常小鼠脾脏单个核淋巴细胞,分别用SEA、虫卵蛋白、虫卵脂质作为刺激物,观察其中NKT细胞的比例变化。结果日本血吸虫感染小鼠脾脏中NKT细胞,于感染后12周比例为(4.73±0.41)%,显著高于对照组比例(2.07±0.12)%(P<0.01);肝脏NKT细胞在感染后3周(8.03±0.23)%与对照组(8.60±1.48)%无明显变化,但感染后6周及12周NKT比例明显上升,分别为(15.90±0.76)%和(21.00±0.30)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。体外实验结果显示,刺激物为SEA和虫卵脂质时,NKT细胞的比例分别为(0.77±0.03)%及(0.80±0.06)%,明显高于空白对照组(0.53±0.03)%及虫卵蛋白组(0.50±0.06)%(P<0.05)。结论日本血吸虫感染导致小鼠脾脏及肝脏中NKT细胞比例上调,其上调可能与虫卵可溶性抗原中的脂质组分有关。
- 刘亚平梁越进孙新娟郑丹罗洁石磊王勇
- 关键词:日本血吸虫自然杀伤T细胞
- 盐酸法舒地尔抗日本血吸虫感染小鼠肝纤维化的作用被引量:2
- 2011年
- 目的观察Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔对日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化以及肝星状细胞(hepatic stel-late cells,HSCs)的影响。方法 30只雌性BALB/c小鼠随机均分为3组,分别为健康对照组、感染组和干预组,感染组和干预组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(14±2)/只,感染后6周,干预组给予盐酸法舒地尔(10 mg/kg)腹腔注射,2次/d,连续7 d,健康对照组和感染组注射等体积生理盐水。末次注射12 h后剖杀小鼠,分别取健康对照组和感染组小鼠肝脏固定、切片,苏木素-伊红(HE)染色或天狼星红染色后镜下观察。检测3组小鼠肝脏羟脯氨酸(hydrox-yproline,Hyp)含量,以及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原α1链(typeⅠcollagenα1,Col1α1)和上皮细胞转化序列2(epithelial cell transforming sequence 2,Ect2)的mRNA水平。采用原位灌注密度梯度离心法分离肝星状细胞,检测α-SMA、Col1α1和Ect2的mRNA水平。结果感染组小鼠肝内汇管区和虫卵肉芽肿周围炎症细胞浸润,胶原纤维增生。健康对照组、感染组和干预组每克肝湿重羟脯氨酸含量分别为(279.7±21.2)μg、(528.0±14.9)μg和(355.4±22.6)μg,干预组肝脏羟脯氨酸含量显著低于感染组(P<0.01)。干预组肝脏和肝星状细胞的α-SMA、Col1α1和Ect2的mRNA水平均显著低于感染组(均P<0.05)。结论盐酸法舒地尔对日本血吸虫感染小鼠肝纤维化有一定抑制作用。
- 郑丹梁跃进毛雯倩李冉王勇
- 关键词:日本血吸虫病肝纤维化盐酸法舒地尔RHO激酶