邹立林
- 作品数：27 被引量：42H指数：5
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金浙江省科技厅重点资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SHV-4型ESBL在pET26b/BL(DE3)中的表达纯化及其特性研究被引量：3
- 2007年
- 目的:表达SHV-4型超广谱β-内酰胺酶,对纯化的SHV-4酶进行特性研究。方法:将SHV-4基因克隆到pET26b表达质粒,重组质粒转入E.coli BL21(DE3)构建工程菌,重组工程菌经摇瓶发酵后获得种子菌,种子菌转入发酵罐发酵,当菌体密度OD600为0.8时,加入诱导剂IPTG至终浓度为1.0mmol/L,于37℃培养6h。培养液离心收获菌体沉淀,其超声裂解上清液进行Ni2+亲和层析,获取的SHV-4酶进行分子量、纯度、等电点、最适条件、米氏常数、催化常数等特性进行分析。结果:SDS-PAGE电泳,等电聚焦电泳及系列的酶动力学实验表明SHV-4酶分子量约为30kD,纯度大于95%,等电点为7.9,最适pH值为6.0～8.0,最适温度为37℃,以头孢硝噻吩为底物测定的Km值为2.61×10-6mol/L,Kcat为258s,Kcat/Km为9.88×107mol-1·s-1·vL。结论:重组的SHV-4酶初步满足制成商品酶的条件。
- 王震叶明君邹立林季敬璋陈秀枢吕建新
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶纯化
- RT-qPCR检测人IL-6 mRNA的方法建立与运用
- IL-6是由淋巴类及非淋巴类细胞产生的一种多功能细胞因子,对免疫应答、急性期反应、炎症反应、造血系统和神经系统等有多方面的作用。IL-6的异常表达是某些疾病的典型特征,如多发性骨髓瘤、过敏性哮喘、Ⅰ型糖尿病等病人体内均发...
- 邹立林吕建新陆永绥
- 文献传递
- 用于结核杆菌培养滤液蛋白10(CFP-10)定量检测的标准品研制
- 本发明提供了一种融合蛋白，该蛋白由接头肽连接一链亲和素和一结核杆菌培养滤液蛋白10构成，其接头肽氨基酸序列为Ser Ser Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly ...
- 高基民吕建新邹立林郭芳芳许晓玲
- 氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II的表达纯化及初步活性
- 2007年
- 用PCR扩增的氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II[aac(3)-II]基因构建了能表达较高活性AAC(3)-II的重组工程菌,并获取重组AAC(3)-II。含pET28a质粒的工程菌转入aac(3)-II基因前后对氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度进行比较,重组菌超声裂解上清液及其纯化的AAC(3)-II进行SDS-PAGE和Western印迹电泳鉴定。最低抑菌浓度表明转入aac(3)-II基因的工程菌比未转入的工程菌对庆大霉素(gentamicin,GEN)的提高了256倍,对妥布霉素(tobramycin,TOB)及其奈替米星(netilmicin,NTL)提高了16倍,电泳鉴定表明纯化获取的是重组AAC(3)-II,其相对分子质量约为32kDa,纯度大于95%,纯化后的10μgAAC(3)-II,分别在10s内使80μgGEN、30s内使80μgTOB和NTL乙酰化而失去抑菌作用。研究为氨基糖苷类抗生素伴侣的开发研究初步打下基础。
- 王震陈云波查长森邹立林彭颖季敬璋陈秀枢吕建新
- 关键词：最低抑菌浓度氨基糖苷类抗生素
- 细脚拟青霉多糖抑制肿瘤细胞的增殖和诱导外周血单个核细胞细胞因子的表达
- 目的探讨细脚拟青霉多糖的免疫调节和抗肿瘤活性。方法应用水提、乙醇沉淀和层析技术从细脚拟青霉菌丝体中纯化出细脚拟青霉多糖组分I (Paecilomyces tenuipes polysaccharide I,PTPS-I)...
- 左江成邹立林金丽琴吕建新
- 关键词：细脚拟青霉多糖抗肿瘤
- 文献传递
- 细脚拟青霉多糖体外抗肿瘤作用及其机制的实验研究被引量：14
- 2008年
- 目的:通过观察细脚拟青霉多糖的体外抗肿瘤活性,初步探讨其作用机制。方法:采用水提,乙醇沉淀,DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析分离纯化多糖PTPS-I;以PTPS-I和经PTPS-I刺激培养的人外周血单个核细胞(MNC)的条件培养基(PTPS-I-MNC-CM)作用于体外培养的红白血病细胞K562、喉癌细胞Hep2和肝癌细胞SMMC-7721,观察PTPS-I和PTPS-I-MNC-CM对其增殖活性的影响;用cell counting kit-8(CCK-8)检测MNC的增殖活性;以荧光定量PCR检测MNC中TNF-α和IL-6 mRNA的表达。结果:PTPS-I-MNC-CM能抑制K562,Hep2和SMMC-7721细胞的增殖(均为P<0.01);PTPS-I不能抑制肿瘤细胞的增殖(P>0.05),没有显现直接的细胞毒作用。PTPS-I能促进MNC的增殖(P<0.01)和增强TNF-α和IL-6 mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:PTPS-I具有免疫调节活性,通过免疫调节发挥抗肿瘤作用。
- 左江成吕建新金丽琴邹立林李东明镇寰
- 关键词：拟青霉多糖类抗肿瘤活性免疫力
- 丙型肝炎病毒Core蛋白类病毒颗粒的表达及纯化
- 2012年
- 目的通过PCR将丙肝病毒(HCV)Core与蜂毒素信号肽(Mel)进行融合,构建到pIZ/V5载体上获得pIZ/V5-Core-Mel表达载体。方法将pIZ/V5-Mel-core稳定转染Sf9细胞,经Zeocin抗性筛选,获得单克隆抗性细胞株。RT-PCR检测结果表明获得稳定表达Mel-core的细胞系Sf9-Core。对稳定细胞系Sf9-Core的上清进行离心纯化并Western印迹检测。结果在上清离心纯化的样品中有HCV Core形成的类病毒颗粒(VLPs)。透射电镜显示Core蛋白能自组装成直径约30 nm的球形颗粒。结论该研究成功构建了HCV Core与蜂毒素信号肽的融合蛋白并在Sf9细胞稳定表达,在细胞培养的上清中获得了VLPs。
- 李祥邹立林吕建新高基民
- 关键词：丙型肝炎病毒
- 逆转录-聚合酶链反应酶联夹心杂交法半定量检测人白细胞介素-6 m RNA被引量：1
- 2003年
- 邹立林吕建新
- 关键词：半定量检测白细胞介素6MRNA
- 分子生物学教学初探被引量：3
- 2007年
- 通过对分子生物学教学的回顾和总结,从教学内容、教学方法、教学改革、考试形式等方面进行了多方位、多层次的审视,初步形成了一套适应本科生的分子生物学教学思想和教学模式。
- 邹立林王震季敬璋金晶李东
- 关键词：分子生物学教学
- 人心肌肌钙蛋白T/人心肌肌钙蛋白I融合蛋白
- 本发明提供了一种融合蛋白，该蛋白由人心肌肌钙蛋白T和人心肌肌钙蛋白I连接而成。研究证实，该融合蛋白既有人心肌肌钙蛋白T的抗原活性，也有人心肌肌钙蛋白I的抗原活性。时间分辨荧光免疫分析是一种灵敏度非常高、线性范围宽、定量准...
- 高基民邹立林郭芳芳许晓玲
- 文献传递
